Liposomas antigénicos para la generación de anticuerpos específicos de la enfermedad

Kyle J. Bednar; Lakeya Hardy; Johanna Smeekens; Dharmendra Raghuwanshi; Shiteng Duan; Mike D. Kulis; Matthew S. Macauley

doi:10.3791/58285

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Artículo de método

Liposomas antigénicos para la generación de anticuerpos específicos de la enfermedad

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DOI:

10.3791/58285

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25 de octubre de 2018

Kyle J. Bednar^*¹ , Lakeya Hardy^*²^,³ , Johanna Smeekens^*³^,⁴ , Dharmendra Raghuwanshi⁵ , Shiteng Duan⁶ , Mike D. Kulis³^,⁴ , Matthew S. Macauley⁵^,⁷

¹Janssen R&D, ²Department of Microbiology and Immunology, University of North Carolina, ³UNC Food Allergy Initiative, University of North Carolina, ⁴Department of Pediatrics, University of North Carolina, ⁵Department of Chemistry, University of Alberta, ⁶Department of Molecular Medicine, Scripps Research Institute, ⁷Department of Medical Microbiology and Immunology, University of Alberta

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Descrito es la preparación de nanopartículas liposómicos antigénicas y su uso en estimular la activación de células B en vitro e in vivo. Respuestas de anticuerpos consistente y robusto condujeron al desarrollo de un nuevo modelo de la alergia del cacahuete. El protocolo para la generación de liposomas antigénicas puede ampliarse a los diferentes antígenos y vacunas.

Resumen

Respuestas de anticuerpos proporcionan inmunidad protectora crítica a una amplia gama de patógenos. Existe un gran interés en la generación de anticuerpos robustos para la vacunación, así como entender cómo patógeno anticuerpo respuestas desarrollan alergias y enfermedades autoinmunes. Generar respuestas de anticuerpos específicos del antígeno robusta no es siempre trivial. En modelos de ratón, a menudo requiere múltiples rondas de inmunización con adyuvante que conduce a una gran cantidad de variabilidad en los niveles de anticuerpos inducidos. Un ejemplo es en modelos de ratón de alergia a los cacahuates en modelos más robustos y reproducibles que minimicen el número de ratón y el uso de adyuvante sería beneficiosos. Presentado aquí es un modelo de ratón altamente reproducible de anafilaxis alergia del cacahuete. Este nuevo modelo se basa en dos factores clave: (1) específica de antígeno esplenocitos eventualmente se transfieren de un ratón sensibilizado de maní en un ratón receptor ingenuo, normalizando la cantidad de memoria específica de antígeno las células B y T a través de un gran número de ratones; y ratones receptores (2) posteriormente se refuerzan con un fuerte inmunógeno multivalente en forma de nanopartículas liposómicos mostrando el alergénico principal del cacahuete (Ara h 2). La gran ventaja de este modelo es su reproducibilidad, que en última instancia, disminuye el número de animales utilizados en cada estudio, al tiempo que minimiza el número de animales que recibieron las inyecciones múltiples de adyuvante. El montaje modular de estos liposomas inmunogénicas proporciona relativamente fácil adaptabilidad a otros modelos alérgicas o autoinmunes que involucran anticuerpos patógenos.

Introducción

La alergia alimentaria afecta al 8% de los niños en los Estados Unidos y prevalencia se ha incrementado en los últimos decenio¹. Alergia al maní afecta a 1% de los niños y no es típicamente pequeño². Aunque varios prometedores ensayos clínicos están en marcha para el tratamiento de la alergia alimentaria, incluyendo inmunoterapia oral (OIT), la inmunoterapia sublingual (SLIT) y epicutánea inmunoterapia (EPIT), actualmente no hay estrategias de tratamiento aprobado por la FDA para individuos alérgicos a cacahuete³^,⁴^,⁵^,....