Construcción de una hoja de varias capas células madre mesenquimales con un sistema de cultivo dinámico 3D

Yingwei Wang; Cheng Lu; Chengzhi He; Baoxin Chen; Youling Zheng; Junming Zheng; Jianhua Zhang; Zheng Wu

doi:10.3791/58624

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Artículo de método

Construcción de una hoja de varias capas células madre mesenquimales con un sistema de cultivo dinámico 3D

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DOI:

10.3791/58624

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20 de octubre de 2018

Yingwei Wang^*¹^,² , Cheng Lu^*¹^,² , Chengzhi He³ , Baoxin Chen¹^,² , Youling Zheng¹^,² , Junming Zheng¹^,² , Jianhua Zhang⁴ , Zheng Wu¹^,²

¹Key Laboratory for Regenerative Medicine, Ministry of Education, Jinan University, ²Department of Developmental and Regenerative Biology, Jinan University, ³Nansha College Preparatory Academy, ⁴Department of Cardiology, First Affiliated Hospital of Jinan University

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Este artículo proporciona un método eficiente y factible para la construcción de hojas de varias capas de células madre con células madre favorable propiedad.

Resumen

Terapia con células madre muestra un prometedor futuro en regenerar las heridas órganos y tejidos, y la técnica de la hoja de la célula ha sido desarrollada para mejorar la retención baja celular y la supervivencia pobre dentro de la zona de destino. Sin embargo, durante el proceso de construcción en vitro , una solución para mantener la actividad biológica de células madre y aumento de la cantidad de células dentro de la hoja de la célula es urgente. Aquí, este protocolo presenta un método para la construcción de una hoja de varias capas de células con células madre favorable bioactividad y óptima operatividad. Pericardio porcino decellularized (DPP) es preparado por fosfolipasa un método de descelularización₂ (PLA₂) como el andamio de la hoja de la célula, y rata médula ósea las células madre mesenquimales (BMSCs) son aisladas y ampliadas como las células sembradas. La estructura de la hoja temporal varias capas celulares se construye mediante el uso de RAD16-I péptido hidrogel. Finalmente, la hoja de la célula se cultiva con un sistema de perfusión dinámica para estabilizar la estructura tridimensional (3D), y la hoja de la célula podría obtenerse después de un cultivo de 48-horas en vitro. Este protocolo proporciona un método eficiente y factible para la construcción de una hoja de varias capas de células, y la hoja de la célula podría desarrollarse como un producto de terapia de células madre favorable en el futuro.

Introducción

Terapia de células madre se ha divulgado como un tratamiento efectivo para muchas enfermedades; sin embargo, retención celular baja y pobre supervivencia dentro de la zona de destino siguen siendo cuestiones críticas después de la inyección de células madre tradicional. Para resolver este problema, científicos ingeniería tejido desarrollado la técnica de la hoja de la célula. Una hoja monolayered célula con la matriz extracelular intacta en primer lugar se preparó utilizando la temperatura de respuesta cultura plato¹, y sus seguimiento estudios informaron mejorías significativas de la célula de vástago de retención y sobrevivencia en el infarta....