Rendimiento medio de selección de ensayos para la evaluación de efectos sobre la Ca2 +-señalización y reacción acrosómica en espermatozoides humanos

Anders Rehfeld; Dorte Louise Egeberg Palme; Kristian Almstrup; Anders Juul; Niels Erik Skakkebaek

doi:10.3791/59212

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Artículo de método

Rendimiento medio de selección de ensayos para la evaluación de efectos sobre la Ca^{2 +}-señalización y reacción acrosómica en espermatozoides humanos

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DOI:

10.3791/59212

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1 de marzo de 2019

Anders Rehfeld¹^,² , Dorte Louise Egeberg Palme¹^,² , Kristian Almstrup¹^,² , Anders Juul¹^,² , Niels Erik Skakkebaek¹^,²

¹Department of Growth and Reproduction, Copenhagen University Hospital, ²International Center for Research and Research Training in Endocrine Disruption of Male Reproduction and Child Health (EDMaRC), University of Copenhagen

En este artículo

Resumen

Aquí, dos ensayos de rendimiento medio para la evaluación de efectos sobre la Ca^{2 +}-reacción señalización y acrosómica en espermatozoides humanos se describen. Estos ensayos se pueden utilizar para rápidamente y fácilmente grandes cantidades de compuestos de efectos sobre la Ca^{2 +}-reacción señalización y acrosómica en espermatozoides humanos.

Resumen

CA^{2 +}-señalización es esencial para la función normal de la célula de la esperma y la fertilidad masculina. Del mismo modo, la reacción acrosómica es vital para la capacidad de un espermatozoide humano penetrar la zona pelúcida y fertilizar el óvulo. Por lo tanto es de gran interés para probar compuestos (por ejemplo, químicos ambientales o medicamentos) para su efecto sobre el Ca^{2 +}-reacción señalización y acrosómica en espermatozoides humanos para examinar los posibles efectos adversos en función de las células de esperma humano o investigar un posible papel como un anticonceptivo. Aquí, se describen dos ensayos de mediano rendimiento: 1) un análisis basado en la fluorescencia para la evaluación de efectos sobre la Ca^{2 +}-señalización en espermatozoides humanos y 2) un análisis de citometría de imagen para la evaluación de la reacción acrosómica en espermatozoides humanos. Estos ensayos pueden utilizarse para un gran número de compuestos de efectos sobre la Ca^{2 +}de la pantalla-reacción señalización y acrosómica en espermatozoides humanos. Además, el análisis pueden ser utilizados para generar las curvas dosis-respuesta altamente específica de compuestos individuales, determinar la posible aditividad/sinergismo de dos o más compuestos y estudiar el modo farmacológico de acción mediante la inhibición competitiva experimentos con los inhibidores de CatSper.

Introducción

El propósito de los dos ensayos descritos aquí es examinar los efectos sobre la Ca^{2 +}-reacción señalización y acrosómica en espermatozoides humanos, como ha sido demostrado por múltiples compuestos en varias publicaciones que emplean estos ensayos de¹^,²^, ³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷. CA^{2 +}-señalización y la reacción del acrosoma son función de las células de esperma humano vital para normal y la fertilidad masculina.