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Artículo de método

Estructuras interfaciales a nivel molecular de polímeros y biomacromoléculas reveladas a través de la espectroscopia vibratoria de generación de frecuencia de suma

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DOI:

10.3791/59380

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13 de agosto de 2019

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En este artículo

Resumen

Al ser ampliamente utilizada, la espectroscopia vibratoria de la generación de frecuencia de suma (SFG) puede ayudar a revelar el orden de la conformación de la cadena y el cambio estructural secundario que ocurre en las interfaces de polímero y biomacromolécula.

Resumen

Como espectroscopia óptica no lineal de segundo orden, la espectroscopia vibratoria de generación de frecuencia de suma (SFG) se ha utilizado ampliamente en la investigación de varias superficies e interfaces. Esta técnica óptica no invasiva puede proporcionar la información de nivel molecular local con sensibilidad monocapa o submonocapa. Aquí estamos proporcionando metodología experimental sobre cómo detectar selectivamente la interfaz enterrada tanto para macromoléculas como para biomacromoléculas. Con esto en mente, se discuten las estructuras secundarias interfaciales de fibroína de seda y estructuras de agua alrededor del modelo de dúplex de oligonucleótido de cadena corta. El primero muestra una superposición de cadena o un efecto de confinamiento espacial y el segundo muestra una función de protección contra los iones Ca2+ resultantes de la superestructura quiral de la columna vertebral del agua.

Introducción

El desarrollo de la espectroscopia vibratoria de generación de frecuencia de suma (SFG) puede datarse del trabajo realizado por Shen et al. hace treinta años1,2. La singularidad de la selectividad interfacial y la sensibilidad de la subcapa hace que la espectroscopia vibratoria SFG sea apreciada por un gran número de investigadores en los campos de la física, la química, la biología y la ciencia de los materiales, etc3,4 ,5. Actualmente, se está investigando una amplia gama de cuestiones científicas relacionadas con ....

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Protocolo

1. SFG experimental

  1. Utilice un sistema comercial de picosegundo SFG (Tablade materiales),que proporciona un haz fundamental de 1064 nm con un ancho de pulso de 20 ps y una frecuencia de 50 Hz, basado en un láser Nd:YAG.
  2. Convierta el haz fundamental de 1064 nm en un haz de 532 nm y un haz de 355 nm utilizando módulos armónicos segundo y tercero. Guiar directamente el haz de 532 nm como un haz de luz de entrada y generar el otro haz de infrarrojo medio de entrada (IR) que cubre el rango de frecuencia de 1000 a 4000 cm-1 a través de la generación paramétrica óptica (OPG) / amplificación paramétrica óptica (....

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Resultados

En la parte del coeficiente Fresnel de la Sección de Protocolo, hemos demostrado que, teóricamente, es factible detectar selectivamente una sola interfaz a la vez. Aquí, experimentalmente, confirmamos que esta metodología es básicamente correcta, como se muestra en la Figura 5 y la Figura 6.

La Figura 5 muestra la estructura interfacial enterrada PHEMA después de la intrusión de agua con una película de h.......

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Discusión

Para investigar la información estructural desde un nivel molecular, SFG tiene sus ventajas inherentes (es decir, sensibilidad monocapa o submonocapa e selectividad interfacial), que se pueden aplicar para estudiar diversas interfaces, como la sólida/sólida, sólida/ líquido, sólido/gas, líquido/gas, interfaces líquido/líquido. Aunque el mantenimiento del equipo y la alineación óptica siguen llevando mucho tiempo, el pago es significativo en el medida en que se puede obtener la información detallada a nivel molecular en l.......

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Divulgaciones

No tenemos nada que revelar.

Agradecimientos

Este estudio fue apoyado por el Programa Estatal de Desarrollo Clave para la Investigación Básica de China (2017YFA0700500) y la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (21574020). Los Fondos Fundamentales de Investigación para las Universidades Centrales, un proyecto financiado por el Programa Académico Prioritario desarrollo de las Instituciones de Educación Superior de Jiangsu (PAPD) y el Centro Nacional de Demostración de Ingeniería Biomédica Experimental Educación (Universidad del Sureste) también fueron muy apreciados.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DPPC) Avanti Polar Lipids, Inc.850355P-1g
Etanol anhidroSinopharm Reactivo químico Co., Ltd100092680≥ 99.7%
CaF2 prismaChengdu YaSi Optoelectronics Co., Ltd.
Cloruro de calcio anhidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd10005817≥ 96.0%
DPPC deuterado (d-DPPC)Avanti Polar Lipids, Inc.860345P-100mg
Horno electromagnéticoZhejiang Supor Co., LtdC21-SDHCB37
Langmuir-Blodgett (LB) a través deKSV NIMA Co., Ltd.KN 2003
Bromuro de litio anhidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd20056926
Sistema de síntesis Milli-QMilliporeAgua ultrapura
Limpiador de plasmaChengdu Mingheng Science& Tecnología Co., LtdPDC-MG Limpieza deplasma con oxígeno
Poli(2-hidroxietil metacrilato) (PHEMA)Sigma-Aldrich Co., LLC.192066 MSDSMw = 300 000
PoliestirenoSigma-Aldrich Co., LLC.330345 MSDSMw = 48 kDa y Mn = 47 kDa
Capullosde Bombyx mori
Hebra complementaria única de oligonucleótidoNanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.H035965'-CGAAGGCTTCCAGCT-3'Cadena
única de oligonucleótidoNanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.H04936  3 centavos modificado por colesterol-trietilenglicol (Chol-TEG) (5 centavos-GCTTCCGAAGGTCGA-3 centavos)
Carbonato de sodio anhidroSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd10019260≥ 99.8
%HiladoInstituto de Microelectrónica de la Academia China de CienciasKW-4APara la preparación de películas de loymer 
Perfilador escalonadoVeecoDEKTAK 150Para la medición del espesor de la película
Sistema de espectroscopia vibracional de generación de frecuencia total (SFG)EKSPLAUn sistema SFG de picosegundos comercial
de seda

Referencias

  1. Shen, Y. R. Optical Second Harmonic Generation at Interfaces. Annual Review of Physical Chemistry. 40, 327-350 (1989).
  2. Shen, Y. R. Surface properties probed by second-harmonic and sum-frequency generation. Nature. 337, 519-525 (1989).
  3. Lu, X....

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Reimpresiones y permisos

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