El objetivo de este protocolo es mostrar cómo cargar el CFDA en diferentes sitios de las partes inferiores de Arabidopsis. A continuación, presentamos el patrón de distribución resultante de CF en los brotes.
Artículo de método
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El objetivo de este protocolo es mostrar cómo cargar el CFDA en diferentes sitios de las partes inferiores de Arabidopsis. A continuación, presentamos el patrón de distribución resultante de CF en los brotes.
El marcador simplástica 5 (6)-carboxyfluorescein diacetato (CFDA) se ha aplicado ampliamente en plantas vivas para demostrar la conexión intercelular, el transporte de floema y los patrones vasculares. Este protocolo muestra el movimiento carboxyfluorescein (CF) de abajo a arriba en la Arabidopsis utilizando el procedimiento de corte de la raíz y del hipocotilo-pinching respectivamente. Estos dos procedimientos diferentes resultan en diferentes eficiencias del movimiento CF: alrededor del 91% de aparición de CF en los brotes con el procedimiento hipocotilo-pinching, mientras que sólo alrededor del 70% de la aparición de la CF con el procedimiento de corte de la raíz. El simple cambio de los sitios de carga, lo que resulta en cambios significativos en la eficiencia móvil de este tinte simplástica, sugiere movimiento CF podría estar sujeto a la regulación simplástica, muy probablemente por la Unión raíz-hipocotilo.
Muchos trazadores fluorescentes con una gama de propiedades espectrales, tales como 5 (6)-carboxifluoresceina (CF)1, 8-hidroxiypyrene-1, 3, 6-ácido trisulfónico2, Lucifer Yellow CH (lych)3, Esculin y cter4, se han desarrollado y aplica en plantas para monitorear el movimiento simplásico y la actividad del floema. Generalmente, un tinte simplástica se carga en un corte en el tejido objetivo y la dispersión secuencial del reportero en otras partes de la planta demostrará la comunicación intercelular. Aunque el mecanismo de absorción del tinte no se entiende completamente, el ....
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1. crecimiento vertical de Arabidopsis en media MS
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Los estudios emergentes han demostrado que las plantas pueden responder rápidamente a los estímulos externos23, incluida la manipulación introducida en los procedimientos experimentales22. En nuestro experimento inicial, nuestra supervisión de este conocimiento a menudo conduce a la falta de manchas. Con estas lecciones, sugerimos que se tengan en cuenta las siguientes precauciones al realizar este experimento: (1) las semillas después de la cosecha deben mantenerse en un g.......
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Los autores no tienen nada que revelar.
Esta obra fue financiada por la Fundación Nacional de Ciencias naturales de China (31671257) y el centro de innovación colaborativa de Hubei para la industria del grano (LXT-16-18).
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| KNO3 | Reactivo químico Sinopharm | 10017218 | |
| KH2PO4 | Reactivo químico Sinopharm | 10017608 | |
| MgSO4· 7H2O | Reactivo químico Sinopharm | 10013018 | |
| CaCl2· 2H2O | Reactivo químico Sinopharm | 20011160 | |
| MnSO4· H2O | Reactivo químico Sinopharm | 10013418 | |
| Na2MoO4· 2H2O | Reactivo químico Sinopharm | 10019818 | |
| Ácido bórico | Reactivo químico Sinopharm | 10004818 | |
| ZnSO4· 7H2O | Reactivo químico Sinopharm | 10024018 | |
| CuSO4· 5H2O | Reactivo químico Sinopharm | 10008218 | |
| CoCl2· 6H2O | Reactivo Químico Sinopharm | 10007216 | |
| KI | Reactivo Químico Sinopharm | 10017160 | |
| FeSO4· 7H2O | Reactivo Químico Sinopharm | 10012118 | |
| EDTA | Reactivo Químico Sinopharm | 10009717 | |
| NaOH | Reactivo Químico Sinopharm | 10019718 | |
| KOH | Reactivo Químico Sinopharm | 10017018 | |
| Sacarosa | Reactivo Químico Sinopharm | 10021418 | |
| Myo-inositol | MACKLIN | I811835 | |
| Ácido nicotínico | MACKLIN | N814565 | |
| Piridoxina HCl | MACKLIN | V820447 | |
| Tiamina HCl | MACKLIN T818865 | ||
| Glicina | MACKLIN | G800880 | |
| Agar en polvo | Novon | ||
| Zeiss | Axio Zoom V16 | ||
| Microscopio de disección | SDPTOP | SRE-1030 | |
| 200μ l pipeta | Dragon Laboratory Instruments | 713111110000-20-200ul | |
| 2.5μ l pipeta | Eppendorf | 3120000011 | |
| Pinzas finas | PINZAS | ST-15 | |
| Parafilm | PARAFILM | PM-996 | |
| Cuchilla de doble cara de acero inoxidable | Gillette | Platinum-Plus Cuchilla |
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