详细描述了临床相关的结肠直肠癌肝转移(CRLM)肿瘤模型以及肝缺血再灌注(I/R)对肿瘤生长和转移的影响。该模型可以帮助更好地了解手术诱导的肝脏转移生长促进机制。
肝缺血和再灌注(I/R)损伤是一种常见的临床挑战,仍然是一个不可避免的病理生理学过程,已被证明诱导多个组织和器官损伤。尽管最近取得了进步和治疗方法,但总体发病率仍然不能令人满意,特别是在有潜在宫腔异常的患者中。在恶性肿瘤生长和转移的背景下,手术I/R被怀疑是调节肿瘤复发的促进剂。本文旨在描述一种临床相关的肝I/R和结肠直肠肝转移模型。在此过程中,我们旨在协助其他研究者建立和完善这一模型,为他们的日常研究实践,以更好地了解肝I/R对促进肝转移的影响。
肝脏是转移性疾病发展的最常见部位之一。死亡率几乎无一例外地归因于与肝脏肿瘤生长相关的并发症。在肝脏转移性实体肿瘤患者中,手术仍然是疾病控制和可能的治疗方法的关键干预措施。然而,绝大多数患者最终都存在复发性疾病,主要在肝脏2,3。在肝手术中,术中出血很常见,经常需要输血和控制出血的不同技术方法,包括血管夹紧方法。然而,这种措施导致肝缺血/再灌注(I/R)到肝脏组织。I/R对肝细胞功能的不利影响已有详细记载。肝脏I/R侮辱通过炎症途径4恢复血流期间点燃炎症级联。肝I/R损伤不仅导致肝功能衰竭,而且目前的证据还表明,I/R损伤刺激肿瘤细胞粘附,促进转移形成发生率和现有微转移性疾病5的生长。我们以前曾报道过,手术应激诱导免疫细胞的活化,这不仅有助于原发性肿瘤的生长,而且通过捕获循环6中的癌细胞,促进转移。
在这里,我们详细描述了建立肝转移小鼠肿瘤模型的技术。在此模型中,我们还提出了一种诱导肝缺血再灌注损伤的方法,该方法在肝切除术期间临床上对临床上存在的手术应激作用。癌症注射和肝I/R的结合方法可以成功地解释原发性肿瘤切除患者CRLM的发展。
本手稿中描述的动物模型基于两种主要方法。第一是识别癌细胞在肝叶中局部化和增殖的能力。二是研究肝缺血再灌注损伤对肿瘤生长和转移的影响。该模型允许在免疫能力小鼠没有继发转移的情况下对肝脏转移进行相关研究。该模型有助于解决转移效率问题,如细胞存活外溢和增殖。
在第一个模型中,首先注射癌细胞,允许微转移性疾病形成。随后,5天后进行肝I/R。该模?…
The authors have nothing to disclose.
作者感谢萨拉·米内迈尔和亚历山大·科默奇对语言的修正。
Dulbecco's Modified Eagle Medium | Lonza | 12-614F | |
Fetal Bovine Serum | Lonza | 900-108 | |
L-Glutamin | Gibco | 25030-081 | |
Penicilin | Fisher scientific | 15-140-122 | |
Stretomysin | Fisher scientific | 15-140-122 | |
HEPES | Fisher Scientific | SH3023701 | |
Trypsin | Hyclone | sh30042.02 | |
Cell culture Flask 75cm | 5 Cells Star | 658170 | |
15ml PP Conical Tubes | BioExcell | 41021037 | |
Trypan Blue Stain | Giibco | 15250-061 | |
Gauze | Fisherbrand | 1376152 | |
Cautry | Bovie | AA01 | |
Microvascular clamp | Finescience tools | 18055-03 | |
Micro-Serrefine clamp applicator with lock | Fine science toosl | FST-18056-14 | |
Spring scissor | Fine science toosl | FST-15021-15 | |
Vessel Dilator | Fine science toosl | FST-00276-13 | |
Magnetic fixator Retraction system | Fine science toosl | FST-18200020 | |
Micro-Adson Forceps | Fine science toosl | FST-11019-12 | |
Micro-Adson Forceps | Fine science toosl | FST-11018-12 | |
4-0 polypropylene suture | Ethicon | K881H | |
Needle holder | Harvard Apparatus | 72-8826 | |
Heating Pad | Fisher scientific | 1443915 | |
Clipper | Oster | 559A | |
Povidone-Iodine solution | Medline | MDS093945 | |
Syringe 1ml 25G | BD safety Glide | 305903 | |
Insulin syringe 0.5 ml | BD insulin Syringes | 32946 | |
Cotton -Tipped Applicator | Fisher Scientific | 23-400-101 | |
Surgical Microscope | Leica | LR92240 | |
Mycoplasma Elisa Kit | Roche | 11663925910 | |
Ketamine | Putney | #056344 | |
Xylazine | NADA | #139-236 | |
ALT strip | Heska | 15809554 | |
AST strip | Heska | 15809542 | |
LDH strip | Heska | 15809607 |