Describimos el uso de ultrasonidos de alta frecuencia con imágenes de contraste como un método para medir el volumen de la vejiga, el grosor de la pared de la vejiga, la velocidad de la orina, el volumen del vacío, la duración del vacío y el diámetro uretral. Esta estrategia se puede utilizar para evaluar la disfunción de la anulación y la eficacia del tratamiento en varios modelos de ratón de disfunción del tracto urinario inferior (LUTD).
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Artículo de método
Ultrasonografía del tracto urinario masculino adulto para pruebas funcionales urinarias
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
La incidencia de hiperplasia prostática benigna clínica (HBP) y síntomas del tracto urinario inferior (LUTS) está aumentando debido al envejecimiento de la población, lo que resulta en una carga económica y de calidad de vida significativa. Se han desarrollado modelos transgénicos y otros modelos de ratón para recrear diversos aspectos de esta enfermedad multifactorial; sin embargo, faltan métodos para cuantificar con precisión la disfunción urinaria y la eficacia de nuevas opciones terapéuticas. Aquí, describimos un método que se puede utilizar para medir el volumen de la vejiga y el espesor de la pared del detrusor, la velocidad urinaria, el volumen del vacío y la duración del vacío, y el diámetro uretral. Esto permitiría evaluar la progresión de la enfermedad y la eficacia del tratamiento a lo largo del tiempo. Los ratones fueron anestesiados con isoflurano, y la vejiga fue visualizada por ultrasonido. Para las imágenes sin contraste, se tomó una imagen 3D de la vejiga para calcular el volumen y evaluar la forma; el espesor de la pared de la vejiga se midió a partir de esta imagen. Para obtener imágenes mejoradas por contraste, se colocó un catéter a través de la cúpula de la vejiga utilizando una aguja de calibre 27 conectada a una jeringa mediante un tubo PE50. Se infunde un bolo de 0,5 ml de contraste en la vejiga hasta que se produjo un evento de micción. El diámetro uretral se determinó en el punto de la ventana de muestra de velocidad Doppler durante el primer evento de anulación. La velocidad se midió para cada evento posterior, lo que produjo un caudal. En conclusión, el ultrasonido de alta frecuencia demostró ser un método eficaz para evaluar las mediciones de vejiga y uretración durante la función urinaria en ratones. Esta técnica puede ser útil en la evaluación de nuevas terapias para la HPB/LUTS en un entorno experimental.
Introducción
La hiperplasia prostática benigna (HBP) es una enfermedad que se desarrolla en los hombres a medida que envejecen y afecta a casi el 90% de los hombres mayores de 80 años de edad1,2. Aunque el desarrollo de la HPB se asocia generalmente con el envejecimiento, otros factores como la obesidad y el síndrome metabólico pueden conducir a la HPB en hombres relativamente más jóvenes3,4. Muchos hombres con HPB desarrollan síntomas del tracto urinario inferior (LUTS, por sus dados) que disminuyen significativamente su calidad de vida, y algunos experimentan com....
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Protocolo
Los procedimientos relacionados con sujetos de animales han sido aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Wisconsin – Madison.
1. Preparación animal
- Coloque un ratón macho C57Bl6/J de 24 meses en una cámara precargada con isoflurano del 3-5% hasta que se pierda el reflejo de retorce y la frecuencia respiratoria disminuya.
- Si es necesario, use cortadores para afeitar el vello abdominal del animal para cirugía y/o imágenes. Retira todo el cabello restante con una crema depilatoria.
- Coloque el ratón en posición supina en un cono nasal con 2% de isoflurano sobr....
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Resultados
El ultrasonido se puede utilizar con o sin mejora de contraste dependiendo del diseño experimental y la medición de punto final. Los ratones son anestesiados con isoflurano y afeitados y todos los restos de pelo eliminados con una crema depilatoria. Los animales anestesiados se colocan en una plataforma calentada con la sonda de ultrasonido colocada a lo largo del eje largo de la vejiga (Figura1).
La Figura 2 muestra imágenes de ultra.......
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Discusión
Las técnicas actuales para evaluar el tracto urinario inferior de los roedores están limitadas por su capacidad de correlacionar directamente los cambios en la fisiología de anulación con los cambios en la histología prostática consecuente a la progresión de la enfermedad. Los ensayos de punto vacío y la uroflujometría se pueden utilizar para evaluar eventos espontáneos de micción en roedores, y estas técnicas se pueden utilizar para evaluar los cambios durante un período de tiempo15,
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar
Agradecimientos
Nos gustaría agradecer a Emily Ricke, Kristen Uchtmann y el laboratorio de Ricke por su ayuda con la cría de animales y comentarios sobre este manuscrito. Nos gustaría agradecer a los NIDDK y NIEHS por su apoyo financiero para estos estudios: U54 DK104310 (WAR, JAM, PCM, CMV, DEB), R01 ES001332 (WAR, CMV), K12 DK100022 (TTL, AR-A, DH). El contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa las opiniones oficiales de los NIH.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Tubo transparente de 21 mm | Supera Anesthesia Innov | 301-150 | |
| Aguja de calibre 27 | BD | Z192376 | |
| Colector de 4 puertos Supera | Anesthesia Innov | RES536 | |
| DEFINITY | Lantheus Medical Imaging | DE4 | |
| F/AIR Canister | Supera Anesthesia Innov | 80120 | |
| Pinzas Graefe (dentadas, Recto) | F.S.T. | 11050-10 | |
| Accesorios de entrada/salida | Supera Anesthesia Innov | VAP203/4 | |
| Isoflurano | Midwest Vet Supply | 193.33161.3 | |
| Vaporizador de isoflurano | Supera Anesthesia Innov VAP3000 | ||
| Sonda MV707 | Fujifilm VisualSonics Inc | ||
| Caudalímetro de oxígeno | Supera Anesthesia Innov | OXY660 | |
| Tubo de polietileno 50 | BD | 427516 | |
| Regulación de presión/manómetro | Supera Anesthesia Innov | OXY508 | |
| Circuitos de reinhalación Supera | Anesthesia Innov | CIR529 | |
| Ratones pequeños Cono de nariz | Supera Anesthesia Inov | ACC526 | |
| Solución salina estéril | Midwest Vet Supply | 193.74504.3 | NaCl 0.9%, Inyectable |
| Tijeras rectas afiladas/romas | Fine Scientific Tools (F.S.T) | 14054-13 | |
| Jeringa | BD | 309646 | 5mL |
| Vevo 770 | Fujifilm VisualSonics Inc | ||
| VIALMIX | Lantheus Medical Imaging | VMIX |
Referencias
- Kirby, R. S. The natural history of benign prostatic hyperplasia: what have we learned in the last decade. Urology. 5, Suppl 1 3-6 (2000).
- Berry, S. J., Coffey, D. S., Walsh, P. C., Ewing, L. L. The development of human benign prostatic hyperplasia with age.
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Reimpresiones y permisos
