Reportamos una técnica eficiente de radioetiquetado carbono-11 para producir trazadores clínicamente relevantes para la tomografía por emisión de positrones (PET) utilizando cartuchos de extracción de fase sólida. 11 El agente metilante C se pasa a través de un cartucho precargado con elución precursora y sucesiva con etanol acuoso proporciona trazadores PET química y radioquímicamente puros en altos rendimientos radioquímicos.
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Artículo de método
Fase sólida 11C-Metilación, purificación y formulación para la producción de trazadores PET
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Resumen
Resumen
La producción rutinaria de radiosondas utilizada en la tomografía por emisión de positrones (PET) se basa principalmente en la química húmeda donde el sintetizador radiactivo reacciona con un precursor no radiactivo en solución. Este enfoque requiere la purificación del trazador mediante cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) seguida de reformulación en un disolvente biocompatible para administración humana. Recientemente desarrollamos un novedoso enfoque de 11C-metilación para la síntesis altamente eficiente de radiofármacos PET etiquetados con carbono-11, aprovechando los cartuchos de fase sólida como unidades desechables "3-en-1" para la síntesis, purificación y reformulación de los trazadores. Este enfoque evita el uso de HPLC preparativo y reduce las pérdidas del trazador en las líneas de transferencia y debido a la descomposición radiactiva. Además, la técnica basada en cartuchos mejora la fiabilidad de la síntesis, simplifica el proceso de automatización y facilita el cumplimiento de los requisitos de Buenas Prácticas de Manufactura (GMP). Aquí, demostramos esta técnica en el ejemplo de la producción de un trazador PET compuesto de Pittsburgh B ([11C]PiB), un agente de imagen in vivo estándar de oro para placas amiloideas en los cerebros humanos.
Introducción
La tomografía por emisión de positrones (PET) es una modalidad de imagen molecular que se basa en la detección de la descomposición radiactiva de un isótopo unido a una molécula biológicamente activa para permitir la visualización in vivo de procesos bioquímicos, señales y transformaciones . El carbono-11 (t1/2 x 20,3 min) es uno de los radioisótopos más utilizados en PET debido a su abundancia en moléculas orgánicas y vida media corta que permite múltiples administraciones de trazador en el mismo día al mismo sujeto humano o animal y reduce la carga de radiación en los pacientes. Muchos trazadores etiquetados con este isótopo se utilizan en estudios clínic....
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Protocolo
1. Preparación de tampones y eluyentes
- Disolver 2,72 g de acetato de sodio trihidrato en 100 ml de agua para preparar 0,2 M de solución de acetato de sodio (solución A).
- Disolver 11,4 ml de ácido acético glacial en 1 L de agua para preparar 0,2 M de solución de ácido acético (solución B).
- Combinar 50 ml de solución A con 450 ml de solución B para preparar el búfer de acetato a pH 3,7 (buffer 1) según el centro de referencia del búfer15. Verifique el pH del tampón con tiras de pH o un medidor de pH.
- Combinar 12,5 ml de etanol absoluto con 87,5 ml de tampón 1 para hacer una solución EtOH acuosa al 12,5% (la....
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Resultados
Para resumir una radiosíntesis típica de [11C]PiB, gaseoso [11C]CH3OTf se pasa primero a través de un cartucho tC18 precargado con una solución de precursor (Figura 1). La separación de la mezcla de reacción se logra entonces mediante la elución sucesiva con soluciones de etanol acuoso de la siguiente manera. En primer lugar, el 12,5% EtOH eluye la mayoría de losSoluciónde OTfy6-OH-BTA-0 no reaccionados, .......
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Discusión
A pesar de la reciente aparición y la aprobación por la FDA de varios 18marcadores PET con etiqueta F, como florbetapir, florbetaben y flutemetamol, [11C]PiB sigue siendo un marcador estándar de oro para imágenes amiloideas debido a la rápida aparición cerebral y baja inespecífico Vinculante. Actualmente este trazador se sintetiza a través de la química húmeda16 o utilizando un enfoque de "bucle seco"4,17. Am.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.
Agradecimientos
Este estudio fue parcialmente apoyado por una subvención 18-05 de la Sociedad de Alzheimer de Canadá (para A. K.) y Brain Canada Foundation con el apoyo de Health Canada. Los autores quieren reconocer a la Facultad de Medicina de la Universidad McGill, el Instituto Neurológico de Montreal y el Centro de Imágenes Cerebrales McConnell por el apoyo a este trabajo. También damos las gracias a la Sra. Monica Lacatus-Samoila por su ayuda con los procedimientos de control de calidad y a los doctores Jean-Paul Soucy y Gassan Massarweh por el acceso a los radioisótopos y a las instalaciones de radioquímica.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 6-OH-BTA-0 | Compuestos bioquímicos avanzados ABX | 5101 | Precursor no radiactivo de [11C]PiB |
| 6-OH-BTA-1 | Compuestos bioquímicos avanzados ABX | 5140 | Estándar no radiactivo de [11C]PiB |
| Sistema de HPLC Agilent 1200 | Agilent | Agilent 1200 | Sistema de HPLC analítico |
| Etanol absoluto | Alcoholes comerciales | 432526 | |
| jeringa Hamilton (luer-tip, 250 y micro; L) | Hamilton | HAM80701 | |
| MZ Analytical PerfectSil 120 | MZ-Analysentechik GmbH | MZ1440-100040 | Columna analítica de HPLC |
| Perkin Elmer Clarus 480 Sistema GC Perkin Elmer Clarus 480 | Colector | ||
| policarbonato | Scintomics | ACC-101 | Colector de síntesis |
| Restek Columna MTX-Wax (30 m, 0,53 mm) | Restek | 70625-273 | Columna analítica de GC |
| Módulo de PRFV Scintomics | Scintomics | GRP | Unidad de síntesis automatizada |
| Sep-Pak tC18 Plus | Waters | WAT020515 | Cartucho de extracción en fase sólida |
| Colector resistente a disolventes | Scintomics | ACC-201 | Colector de síntesis |
| Aguja espinal | BD | 405181 | |
| Estéril línea de extensión | B. Braun | 8255059 | |
| Filtro estéril | Millipore | SLLG013SL | |
| Frasco estéril (20mL) | Huayi | SVV-20A | |
| Agua estéril | Baxter | JF7623 | |
| Synthra MeIplus Research | Synthra | MeIplus Research | [11C]CH3I/[11C]CHMódulo 3OTf |
| Jeringa (10 mL) | BD | 309604 | |
| Jeringa (1 ml) | BD | 309659 | |
| Jeringa (20 mL) | B. Braun | 4617207V | Jeringa dispensadora |
| Filtro de ventilación | Millipore | TEFG02525 |
Referencias
- Langstrom, B., Lundqvist, H. The preparation of 11C-methyl iodide and its use in the synthesis of 11C-methyl-L-methionine. The International journal of applied radiation and isotopes. 27 (7), 357-363 (1976).
- Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M.
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Reimpresiones y permisos
