Inducción de la muerte cerebral en ratones que utilizan la monitorización y ventilación de la presión arterial intraarterial a través de la traqueotomía

Summary

Presentamos un modelo murino de inducción de la muerte cerebral con el fin de evaluar la influencia de sus efectos fisiopatológicos en los órganos, así como en injertos consecutivos en el contexto del trasplante de órganos sólidos.

Abstract

Si bien tanto la donación viva como la donación después de la muerte circulatoria proporcionan oportunidades alternativas para el trasplante de órganos, la donación después de la muerte cerebral del donante (BD) sigue representando la principal fuente de trasplantes sólidos. Desafortunadamente, la pérdida irreversible de la función cerebral es conocida por inducir múltiples cambios fisiopatológicos, incluyendo hemodinámicas, así como modificaciones hormonales, finalmente conduce a una respuesta inflamatoria sistémica. Los modelos que permiten una investigación sistemática de estos efectos in vivo son escasos. Presentamos un modelo murino de inducción bd, que podría ayudar a las investigaciones sobre los efectos devastadores de BD en la calidad del aloinjerto. Después de implementar la medición de la presión arterial intraarterial a través de la arteria carótida común y la ventilación confiable a través de una traqueotomía, BD es inducida por el aumento constante de la presión intracraneal utilizando un catéter globo. Cuatro horas después de la inducción de BD, los órganos pueden ser cosechados para análisis o para procedimientos de trasplante posteriores. Nuestra estrategia permite el análisis integral de BD de donantes en un modelo murino, permitiendo así una comprensión profunda de los efectos relacionados con la BD en el trasplante de órganos sólidos y potencialmente allanar el camino para optimizar el preacondicionamiento de órganos.

Introduction

El trasplante es actualmente el único tratamiento curativo para la insuficiencia orgánica terminal. Hasta ahora, los pacientes de muerte cerebral (BD) han sido la principal fuente de donaciones de órganos, aunque la donación y la donación vivas después de la muerte circulatoria son valiosas alternativas¹. La BD se define por un coma irreversible (con una causa conocida), la ausencia de reflejos del tallo cerebral y la apnea^2. Desafortunadamente, los órganos BD demuestran resultados inferiores en la supervivencia del injerto a largo plazo independientemente del antígeno leucocito humano (HLA)-desajuste y tiempo isquémico ....

Protocol

Los experimentos con animales se realizaron de conformidad con los Principios de Cuidado Animal de Laboratorio formulados por la Sociedad Nacional de Investigación Médica y la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio preparada por la Academia Nacional de Ciencias y publicada por los Institutos Nacionales de Salud (Publicación No 86-23 de la NIH, revisada 1985). Todos los experimentos fueron aprobados por el Ministerio de Educación, Ciencia y Cultura de Austria (BMWF-66.011/0071-II/3b/2012).

1. Cateterismo arterial

1. Anestetizar el ratón con una inyección intraperitoneal de ketamina y xilazina¹⁰ y....

Results

El modelo murine BD se realizó con éxito más de 100 veces con una tasa de éxito de más del 90%. Además, el trasplante de órganos post-intervenicional es^el7.

BD induce una variedad de cambios fisiopatológicos que pueden ser investigados más a fondo usando este modelo. Como se muestra en la Figura 1, la presión arterial muestra un pico hipertensivo inicial seguido de una fase h.......

Discussion

La BD, un factor de riesgo para la calidad del aloinjerto en donantes multiorgánicos, implica una plétora de cambios fisiopatológicos, que sólo pueden evaluarse suficientemente utilizando modelos in vivo. Los cambios hemodinámicos, la tormenta de citoquinas, los cambios hormonales y su impacto final en la calidad y supervivencia del injerto de órganos no se pueden analizar in vitro⁴. La mayoría del trasplante básico, así como la investigación inmunológica depende de herramientas de diagnóstico sof.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Catéter arterial (BD Neoflon 26G)
(APT300)	Harvard Apparatus Inc.	73-3862
Catéter de embolectomía arterial Fogarty N° 3	Edwards Lifesciences Corporation	120403F
Pinzas	FST	11271-30
Sistemas de mantas homeotérmicas con sonda flexible	Harvard Apparatus Inc.	55-7020
Ketansol	Graeub 6680110
Micro tijera	FST	15018-10
Portaagujas	FST	12060-02
Prolene 5-0	Ethicon	8698H
Bomba 11 Elite Infusion Solo un aparato	Harvard Inc.	70-4500
Tijera	FST	14075-11
Microscopio estereotáctico	Olympus	SZX7
Transpore Tape	3M	1527-1
Almohadillas	Molinea.A	274301
Ventilador para ratones (MiniVent Modelo 845)	Harvard Apparatus Inc.	73-0043
Xylasol	Graeub	7630109