Cuantificación de la función y morfología biventricular mediante resonancia magnética cardíaca en ratones con bandas en la arteria pulmonar

Summary

Para comprender la fisiopatología de la adaptación del ventrículo derecho (VD) a la carga anormal, los modelos experimentales son cruciales. Sin embargo, la evaluación de las dimensiones y la función del RV es compleja y desafiante. Este protocolo proporciona un método para realizar imágenes de resonancia magnética cardíaca (RMC) como un procedimiento de referencia no invasivo en ratones sometidos a una carga de presión del VD.

Abstract

La función y el fallo del ventrículo derecho (VD) son los principales determinantes del resultado de las cardiopatías adquiridas y congénitas, incluida la hipertensión pulmonar. La evaluación de la función y morfología del VD es compleja, en parte debido a la compleja forma del VD. Actualmente, la resonancia magnética cardíaca (RMC) es el estándar de oro para la evaluación no invasiva de la función y morfología del VD. El protocolo actual describe la obtención de imágenes de RMC en un modelo de ratón de la carga de presión del VD inducida por el bandeado de la arteria pulmonar (PAB). La PAB se realiza colocando una sutura 6-0 alrededor de la arteria pulmonar sobre una aguja de 23 G. El gradiente de PAB se determina mediante ecocardiografía a las 2 y 6 semanas. A las 6 semanas, la morfología y la función de los ventrículos derecho e izquierdo se evalúan midiendo los volúmenes y la masa telesistólica y telediastólica en diez a once cortes de cine de 1 mm de espesor utilizando un escáner de resonancia magnética de 9,4 T equipado con un gradiente de 1.500 mT/m. Los resultados representativos muestran que el PAB induce un aumento significativo en la carga de presión del VD, con efectos significativos sobre la morfología biventricular y la función del VD. También se ha demostrado que a las 6 semanas de carga de presión del VD, el gasto cardíaco se mantiene. Aquí se presenta un protocolo reproducible para la cuantificación de la morfología y función biventricular en un modelo murino de la carga de presión del VD y puede servir como método para experimentos que exploren los determinantes de la remodelación y disfunción del VD.

Introduction

Los pacientes con enfermedades cardiovasculares adquiridas y congénitas, incluida la hipertensión pulmonar (HP), corren el riesgo de disfunción e insuficiencia del ventrículo derecho (VD)¹. La adaptación del VD como resultado del aumento de la carga de presión se caracteriza por hipertrofia concéntrica en estadios tempranos y dilatación progresiva en la enfermedad terminal. Además, se asocia a trastornos en el metabolismo y en la matriz extracelular, procesos de inflamación y, eventualmente, fallo del VD 2,3,4,5,6.

Protocol

Todos los experimentos y el cuidado de los animales se llevan a cabo de acuerdo con la Ley Holandesa de Experimentación Animal y se ajustan a la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio publicada por los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos. El Comité de Experimentos con Animales de la Universidad de Groningen, Países Bajos, aprobó el protocolo experimental actual (número de permiso: 2014-041/3005).

1. Alojamiento y aclimatación

1. Utilice 20-30 g de ratones silvestres tipo C57 negro 6 (C57BL/6) (línea de cría institucional descrita anteriormente⁴⁷), machos y hembras, todos de má....

Results

La tasa de mortalidad del procedimiento quirúrgico PAB es de alrededor del 10%. Los resultados presentados muestran características de los ratones en los grupos simulado (n = 5) y PAB (n = 8). Como se muestra en la Figura 3, los valores del gradiente de PAB aumentaron significativamente en comparación con los animales simulados a las 2 y 6 semanas después del PAB. Este aumento de la carga provocó la dilatación del VD expresada como un aumento del VD, el VED y el VD ESV (

Discussion

Este protocolo proporciona un método reproducible para la PAB en ratones y la posterior evaluación de la remodelación cardíaca y la adaptación funcional mediante RMC.

El PAB se diferencia de otros modelos de aumento de la carga de presión RV porque implica un aumento absoluto y estático de la poscarga sin la presencia de otros desencadenantes. La carga de presión del VD en los modelos de hipoxia, monocrogalina, derivación o una combinación de estos inductores .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Transductor de ecocardiografía i13L de 14,0 MHz	GE Healthcare, Waukesha, WI, EE. UU.
Cánula
20G Aguja
Escáner de resonancia magnética 9.4T con conjunto de gradiente de 1.500 mT/m	Bruker BioSpin, Ellingen, Alemania
Cámara
Blunt 25G
Buprenorfina
Cloruro-hexidina
CMR software de posprocesamiento	Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Países Bajos		Qmass versión 7.6
Software estadístico y de visualización de datos	GraphPad Prism Inc, La Jolla, CA, EE. UU		. versión de software 7.02
Máquina de ecocardiografía	GE Healthcare, Waukesha, WI, EE. UU		Vivid Dimension 7
Ungüento
Estera
térmica Incubadora (37° C)
Isoflurano
			isoflurano
Miniventilador para roedores	Hugo Sachs	modelo 687
monofilamento polipropileno 5-0 suturas monofilamento
polipropileno 6-0 Suturas
subcutáneas
Electrocardiograma pediátrico, pegatinas
ácido poliglicólico puro, suturas 5-0,
mascarilla