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Pruebas de hipofagia inducida por la sacarosa y la novedad en ratas utilizando un sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos

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DOI:

10.3791/60953

8 de mayo de 2020

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En este artículo

Resumen

Aquí se presenta un protocolo para estudiar el comportamiento anhedónico y similar a la depresión en ratas. Combina dos métodos de comportamiento bien establecidos, la preferencia de sacarosa y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad, con un sistema automatizado de monitoreo de ingesta de alimentos y líquidos, para investigar indirectamente el comportamiento de los roedores utilizando parámetros suplentes.

Resumen

La prevalencia y la incidencia de trastornos depresivos están aumentando en todo el mundo, afectando a unos 322 millones de individuos, subrayando la necesidad de estudios conductuales en modelos animales. En este protocolo, para estudiar el comportamiento anhedónico y similar a la depresión en ratas, la preferencia de sacarosa establecida y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad se combinan con un sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos y líquidos. Antes de las pruebas, en el paradigma de preferencia de sacarosa, las ratas macho se entrenan durante al menos 2 días para consumir una solución de sacarosa además del agua del grifo. Durante el examen, las ratas se exponen de nuevo al agua y a la solución de sacarosa. El sistema automatizado registra el consumo cada segundo. La relación entre sacarosa y la ingesta total de agua (relación de preferencia de sacarosa) es un parámetro suplente de la anhedonia. En la prueba de hipofagia inducida por la novedad, las ratas macho pasan por un período de entrenamiento en el que están expuestas a un aperitivo apetecible. Durante el entrenamiento, los roedores muestran una ingesta estable de refrigerios basales. El día de la prueba, los animales son transferidos de jaulas caseras a una jaula fresca y vacía que representa un nuevo entorno desconocido con acceso a la conocida tentempié apetecible. El sistema automatizado registra la ingesta total y su microestructura subyacente (por ejemplo, latencia para acercarse a la merienda), proporcionando información sobre los comportamientos anhedónicos y ansiosos. La combinación de estos paradigmas con un sistema de medición automatizado proporciona información más detallada, junto con una mayor precisión al reducir los errores de medición. Sin embargo, las pruebas utilizan parámetros suplentes y solo representan la depresión y la anhedonia de manera indirecta.

Introducción

En promedio, el 4,4% de la población mundial está afectada por la depresión. Estos representan 322 millones de personas en todo el mundo, un 18% más en comparación con hace diez años1. Según estimaciones de la Organización Mundial de la Salud, la depresión será la segunda en el ranking de Años de Vida Ajustados por Discapacidad en 20202. Para abordar la creciente prevalencia de trastornos afectivos y establecer nuevas estrategias de intervención, es necesario seguir estudiando este comportamiento. Antes y además del examen en humanos, son necesarios estudios en animales.

Se han establecido var....

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Protocolo

El cuidado de los animales y los procedimientos experimentales siguieron las directrices específicas de ética institucional y fueron aprobados por la autoridad estatal para la investigación animal.

1. Funcionamiento del sistema de monitoreo automatizado

NOTA: Al utilizar el sistema de monitoreo automatizado, es crucial documentar cada acción en el cuadro de comentarios incluido en el software inmediatamente antes de la acción. La descripción se debe escribir en el cuadro de comentarios y, pulsando Guardar, se guarda con un punto de tiempo específico. Los puntos de tiempo son significativos al anali....

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Resultados

Para probar la distribución de datos, se utilizó la prueba Kolmogorov-Smirnov. Se utilizaron pruebas T cuando los datos se distribuyeron normalmente y se utilizó la prueba Mann-Whitney-U, si no. ANOVA unidireccional seguido de la prueba post-hoc de Tukey se utilizó para la comparación de varios grupos normalmente distribuida. ANOVA unidireccional seguido de la prueba de comparación múltiple de Dunn se utilizó en casos de distribución no normal. Las diferencias entre grupos se consideraron significativas cuando p

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Discusión

La preferencia de sacarosa y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad son dos técnicas establecidas para evaluar la anhedonia en ratas. Su combinación con el sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos permite un análisis más detallado en ratas sin perturbaciones y reduce la medición errónea.

La incidencia de errores se ve reducida por diferentes enfoques. En primer lugar, para solucionar el error que se produce debido a derrames, el espacio entre la tolva de alimento.......

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Divulgaciones

A.S. es consultor de a & r Berlin, Boehringer-Ingelheim, Takeda y Schwabe. No existen conflictos de intereses.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por la financiación de la Fundación Alemana de Investigación (STE 1765/3-2) y Charité University Funding (UFF 89/441-176, A.S.).

....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Montaje Montaje en jaula LH - RAT-FOOD - incluye montaje en jaula de acero inoxidable, tolva, bloqueador, acoplamientoResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EE. UUBCMPRF01
Montaje en jaula LH Desenchufado - RAT - FOOD incluye montaje en jaula de acero inoxidable, tolva, bloqueador, adaptador desenchufado, acoplamientoResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USABCMUPRF01
jaula con 2 aberturas - RAT - Jaula modificada por coste: incluye la parte superior de la jaula y una botella de agua estándarResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EE. UUCarcasa únicaBCR02
Recopilación de datos Computadora portátil Windows - Configurada con software BioDAQResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EE. UUEnriquecimiento BLT003
(tubos de plástico, madera roedora)distribuido por el animalario
HoneyMaid Graham Cracker CrumbsNabisco, East Hanover, NJ, EE. UUASIN:bocadillo sabroso para la prueba de los NIH
Bastidor de polímero de baja vibraciónResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EE. UU.BRACKR
ratas macho Sprague DawleyEnvigo Códigopedido: 002
Modelo #2210 Controlador central BioDAQ de 32 puertos: incluye cables y kitde calibraciónResearch Diets, Inc., Jules Lane, Nuevo Brunswick, Nueva Jersey, EE. UU.BCC32_03
Controlador de sensor periférico - incluye cableResearch Diets, Inc., Jules Lane, Nuevo Brunswick, NJ, EE. UUBPSC01
SigmaStat 3.1Systat Software, San José, CA, EE. UUAnálisis estadístico
Bloqueador de acero inoxidableResearch Diets, Inc., Jules Lane, Nuevo Brunswick, NJ, EE. UU.BBLKR
dieta estándar para roedores con 10 kcal% de grasaResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EE. UU.D12450B
sacarosa en polvoRoth4621.1para SPT
. . . . B01COWTA98 de . .

Referencias

  1. World Health Organization. Depression. , Available from: https://www.who.int/health-topics/depression (2018).
  2. Reddy, M. S. Depression: the disorder and the burden. Indian Journal of Psychological Medicine. 32 (1), 1-2 (2010).
  3. Cryan, J. F., Mombereau, C.

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Etiquetas

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