Aquí, presentamos un protocolo de electrocardiografía no invasiva (ECG), optimizado para ratones postnatales tempranos, que no requiere el uso de anestésicos.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
Electrocardiografía no invasiva en el ratón perinatal
En este artículo
Resumen
Resumen
La electrocardiografía (ECG) se ha considerado durante mucho tiempo como un método eficaz y fiable para evaluar la función cardiovascular (y cardiopulmonar) tanto en modelos humanos como animales de enfermedad. La frecuencia cardíaca individual, el ritmo y la regularidad, combinados con parámetros cuantitativos recogidos del ECG, sirven para evaluar la integridad del sistema de conducción cardíaca, así como la fisiología integrada del ciclocardíaco. Este artículo proporciona una descripción completa de los métodos y técnicas utilizados para realizar un ECG no invasivo en cachorros de ratón perinatal y neonatal tan pronto como el primer día postnatal, sin necesidad de usar anestésicos. Este protocolo fue diseñado para abordar directamente la necesidad de un método estandarizado y repetible para obtener ECG en ratones recién nacidos. Desde una perspectiva traslacional, este protocolo resulta ser totalmente eficaz para la caracterización de defectos cardiopulmonares congénitos generados utilizando líneas transgénicas de ratón, y particularmente para el análisis de defectos que causan letalidad en o durante los primeros días postnatales. Este protocolo también tiene como objetivo abordar directamente una brecha en la literatura científica para caracterizar y proporcionar datos normativos asociados con la maduración del sistema de conducción cardíaca postnatal temprana. Este método no se limita a un punto de tiempo postnatal específico, sino que permite la recopilación de datos de ECG en cachorros de ratón neonatal desde el nacimiento hasta el día 10 postnatal (P10), una ventana que es de importancia crítica para modelar enfermedades humanas in vivo, con especial énfasis en la cardiopatía congénita (CHD).
Introducción
La función cardíaca se puede medir de diferentes maneras, la más común de las cuales incluye el uso de electrocardiografía (ECG) para analizar la conducción de corriente eléctrica a través del corazón, así como su ciclo cardíaco general y la función1. La electrocardiografía sigue siendo una herramienta de diagnóstico útil para identificar y caracterizar anomalías cardíacas tanto en modelos humanos como animales de enfermedad1,2. Las irregularidades en la lectura de un electrocardiograma se pueden encontrar en el desarrollo cardíaco anormal (es decir, enfermedad cardíaca congénita (CHD))....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Protocolo
El siguiente protocolo sigue los estándares del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Nueva Inglaterra. La observación estrecha del protocolo debe proporcionar lecturas de ECG satisfactorias en todos los neonatos examinados (n > 70).
1. Preparaciones del dispositivo
- Conecte el dispositivo al puerto USB de un ordenador con el software ECG descargado en él. El dispositivo de medición comenzará automáticamente a calentarse hasta (37 oC/98,6 oF). La unidad de calefacción interna se encuentra dentro de la unidad de medida y calienta sólo la superficie de plástico. Los electrodos de alambre de plata no s....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Resultados
Un ECG ideal tendría una señal clara y prominente que permite analizar todas las ondas en varios marcos de tiempo diferentes (Figura 1). El laboratorio empleó inicialmente una aplicación personalizada de un aparato de electromiografía para producir ECGs de una calidad insatisfactoria, lo que sólo nos permitió analizar parámetros básicos como la frecuencia cardíaca (Figura S1). Esto inspiró el trabajo con una empresa para desarrollar un prototipo novedoso dispositivo ECG espe.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
Los puntos de datos recogidos en cachorros perinatales de 1 ratón de día 1 están ligeramente por debajo de los valores medios esperados para ratones adultos (500-700 latidos por minuto). 8 Hay un aumento en la frecuencia cardíaca a medida que el ratón envejece, que cae más en línea para los valores esperados (Tabla 1). Sin embargo, es importante destacar que los valores neonatales estaban en el extremo inferior de este rango, apoyando la idea de que los valores normativos deben do.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Divulgaciones
Los autores no reportan conflictos de intereses.
Agradecimientos
Los autores reconocen el generoso apoyo de la Sociedad de Corazones Diminutos (KLT), el Programa UNE COBRE (NIGMS otorga el número P20GM103643; LAF), y el Programa de Becas SURE en la Universidad de Nueva Inglaterra (VLB), así como el apoyo técnico al paciente de Ashish More (iWorx, Dover, NH). La Figura 3, la Figura 4 y la Figura S1 se crearon con el software Biorender.
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| LabScribe4 | iWorx | LabScribe4 | Software utilizado para registrar ECG ECG |
| de ratón neonatal & Sistema de respiración | iWorx | RS-NMECG : Ratón neonatal ECG | Dispositivo de ECG |
| Gel adhesivo conductor tensivo | Parker Laboratories, Inc | 22-60 | Tac-gel utilizado como gel conductor para ECG |
Referencias
- Pappano, A. J., Wier, W. G. Cardiovascular Physiology. 11, Elsevier. 40-41 (2019).
- Kaese, S., Verheule, S. Cardiac electrophysiology in mice: A matter of size. Frontiers in Physiology. 3, Semptember 1-19 (2012).
- Sisakian, H.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
