Artículo de método
Este protocolo describe la preparación, las pruebas biotribológicas y el análisis de cilindros osteocondrales que se deslizan contra el material del implante metálico. Las medidas de resultados incluidas en este protocolo son la actividad metabólica, la expresión génica y la histología.
Los defectos osteocondrales en pacientes de mediana edad pueden tratarse con implantes metálicos focales. Desarrollados por primera vez para defectos en la articulación de la rodilla, los implantes ahora están disponibles para el hombro, la cadera, el tobillo y la primera articulación metatarsalfalángica. Al tiempo que proporciona reducción del dolor y mejora clínica, se observan cambios degenerativos progresivos del cartílago opuesto en muchos pacientes. Los mecanismos que conducen a este daño no se entienden completamente. Este protocolo describe un experimento tribológico para simular un emparejamiento de metal sobre cartílago y un análisis exhaustivo del cartílago articular. El material de implante metálico se prueba contra cilindros osteocondrales bovinos como modelo para el cartílago articular humano. Mediante la aplicación de diferentes cargas y velocidades de deslizamiento, las condiciones de carga fisiológicas pueden ser imitadas. Para proporcionar un análisis exhaustivo de los efectos sobre el cartílago articular, la histología, la actividad metabólica y el análisis de la expresión génica se describen en este protocolo. La principal ventaja de las pruebas tribológicas es que los parámetros de carga se pueden ajustar libremente para simular condiciones in vivo. Además, se pueden utilizar diferentes soluciones de prueba para investigar la influencia de la lubricación o agentes proinflamatorios. Mediante el uso de análisis de expresión génica para genes específicos del cartílago y genes catabólicos, se podrían detectar cambios tempranos en el metabolismo de los condrocitos articulares en respuesta a la carga mecánica.
El tratamiento de los defectos osteocondrales es exigente y requiere cirugía en muchos casos. Para las lesiones osteocondriales focales en pacientes de mediana edad, los implantes metálicos focales son una opción viable, especialmente después del fracaso del tratamiento primario, como la estimulación de la médula ósea (BMS) o la implantación de condrocitos autólogos (ACI)1. Los reemplazos parciales de superficie se pueden considerar procedimientos de salvamento que pueden reducir el dolor y mejorar el rango de movimiento2. Estos implantes se componen típicamente de una aleación CoCrMo y están disponibles en diferentes ta....
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1. Preparación de cilindros metálicos
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El área de contacto y la presión de contacto deben confirmarse mediante una película de medición de presión(Figura 1). La condición de carga fisiológica se puede confirmar comparando con las impresiones de referencia para las presiones de contacto definidas. Durante las pruebas, el coeficiente de fricción se controla constantemente. Con un área de contacto de migración, se puede mantener un bajo coeficiente de fricción durante al menos 1 h (Figura 2). Utilizando.......
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Los implantes metálicos focales representan un procedimiento de rescate para defectos osteocondrales, especialmente en pacientes de mediana edad y después de un tratamiento primario fallido. Aunque los estudios clínicos demostraron resultados prometedores a corto plazo, una complicación observada es el daño al cartílago nativo opuesto,10. Los estudios de cadáveres y biomecánicos muestran evidencia clara de que la implantación adecuada con posicionamiento plano o ligeramente empotrada mantiene las .......
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Los autores declaran que no tienen intereses en competencia.
Esta investigación fue financiada por la empresa de la empresa, la empresa.m.b, la empresa, la empresa, la que ha sido financiada por la empresa de la empresa. y el gobierno provincial de la Baja Austria a través de las Llamadas de Ciencias de la Vida (ID de Proyecto: LSC15-019) y por el Programa COMET austriaco (Proyecto K2 XTribology, Subvención No 849109).
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| ¿Anfotericina B | Sigma? Aldrich Chemie GmbH | A-2942-100ML | |
| solución tamponada de formaldehído 4% | VWR | 97131000 | |
| Cell Proliferation Kit II (XTT) | Roche Diagnostics | 11465015001 | Ensayo de toxicología ex vivo basado en |
| XTT Materia prima CoCrMo | Acnis International | Varillas de CoCrMo de 6 mm de diámetro | |
| CryoStar NX70 Cryostat | Thermo Fischer Scientific | dispositivo de criosección | |
| dimetilsulfóxido (DMSO) | Sidma-Aldrich Chemie | D 2438-10ML | |
| Dulbecco' Águila modificada' s medio | Sigma? Aldrich Chemie GmbH | ||
| suero bovino fetal | Gibco | ||
| Ácido hialurónico | Anika Therapeutics Inc. | componente de la solución lubricante | |
| iCycler | BioRad | termociclador | |
| Leica DM?1000 | Microscopio | Leica | |
| LightCycler 480 Lámina de sellado | Roche Diagnostics | ||
| LightCycler 96 | Roche Diagnostics | termociclador para PCR | |
| MagNA Lyser Green Beads | Roche Diagnostics | ||
| Sistema de transferencia de autoinjertos osteocondrales (OATS) | Arthrex Inc. | tubo de corte para la recolección de cilindros osteocondrales | |
| osteosoft | Merck | 1017279010 | solución descalcificadora |
| ¿Penicilina / Estreptomicina | Sigma? Aldrich Chemie GmbH | P4333-100ML | |
| fosfato ?solución salina tamponada | Sigma? Aldrich Chemie GmbH | PBS | |
| Prescale Low Pressure Fujifilm | indicadora de presión | ||
| RNeasy Fibroso Tissue Kit | QIAGEN | 74404 | |
| Synergy 2 | BioTek Instruments | placas | |
| Tetra? Falex DEBE | Falex Tribology | Tribometer | |
| Tissue? Tek O.C.T. | SAKURA | 4583 | formulación de inclusión |
| Transcriptor Primera hebra Kit de síntesis de ADNc Roche | Diagnostics | 40897030001 | |
| β-mercaptoetanol | Sidma-Aldrich Chemie | M3148 |
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