Presentamos un protocolo ECG que es técnicamente fácil, barato, rápido y asequible en ratones pequeños, y se puede realizar con mayor sensibilidad. Sugerimos este método como un enfoque de cribado para el estudio de agentes farmacológicos, modificaciones genéticas y modelos de enfermedades en ratones.
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Artículo de método
Grabaciones de electrocardiograma en ratones anestesiados usando plomo II
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En este artículo
Resumen
Resumen
El electrocardiograma es una herramienta valiosa para evaluar el sistema de conducción cardíaca. La investigación en animales ha ayudado a generar información genética y farmacológica novedosa sobre el electrocardiograma. Sin embargo, realizar mediciones de electrocardiogramas en animales pequeños in vivo, como ratones, ha sido un desafío. Para ello, utilizamos un método de registro de electrocardiograma en ratones anestesiados con muchas ventajas: es un procedimiento técnicamente simple, es barato, tiene un tiempo de medición corto y es asequible, incluso en ratones jóvenes. A pesar de las limitaciones con el uso de anestesia, las comparaciones entre el control y los grupos experimentales se pueden realizar con mayor sensibilidad. Tratamos ratones con agonistas y antagonistas del sistema nervioso autónomo para determinar la validez de este protocolo y comparamos nuestros resultados con informes anteriores. Nuestro protocolo ECG detectó aumento de las frecuencias cardíacas y los intervalos QTc en el tratamiento con atropina, disminución de las frecuencias cardíacas e intervalos QTc después del tratamiento con carbachol, y mayores frecuencias cardíacas e intervalos QTc con isoprenalina, pero no notó ningún cambio en los parámetros de ECG en la administración de propranolol. Estos resultados son soportados por informes anteriores, lo que confirma la fiabilidad de este protocolo ECG. Por lo tanto, este método se puede utilizar como un enfoque de cribado para realizar mediciones de ECG que de otro modo no se intentarían debido a los altos costos y dificultades técnicas.
Introducción
El electrocardiograma (ECG), una prueba que mide la actividad eléctrica de los latidos del corazón, es una herramienta valiosa para evaluar el sistema de conducción cardíaca. Los parámetros medidos por un ECG incluyen frecuencia cardíaca, intervalo PR, duración QRS e intervalo QT. En resumen, el intervalo PR corresponde al tiempo necesario para que un impulso eléctrico viaje desde el nodo del seno auricular a través del nodo auriculoventricular hasta las fibras de Purkinje; La duración de QRS es el tiempo para que la despolarización ventricular se produzca a través del sistema Purkinje y el miocardio ventricular; y el intervalo QT es la duración de la repolarización v....
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Protocolo
Todos los procedimientos con animales fueron aprobados por el comité local para el cuidado y uso de animales de laboratorio, Universidad Kyung Hee (número de licencia: KHUASP(SE)-18-108) y se ajustaron a la Guía de los Institutos Nacionales de Salud de los Estados Unidos para el cuidado y uso de animales de laboratorio.
1. Animales experimentales
- Mantener todos los ratones (39 ratones, Balb/c, machos, 7-u20129 semanas de edad) en una instalación libre de patógenos según la guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio.
- Mantenga a los ratones en un ciclo de luz/oscuridad de 12 h a temperatura constante con acceso ....
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Resultados
Experimentos farmacológicos
Para determinar si nuestra medición de ECG no invasiva refleja la influencia de la modulación autonómica en el sistema de conducción cardíaca, los ratones Balb/c normales fueron desafiados con agonistas y antagonistas del sistema nervioso autónomo (ANS). La atropina y el carbachol se utilizaron para provocar el bloqueo autonómico parasimpático y la estimulación, respectivamente, mientras que propranolol e isoprenalina se administraron para provocar .......
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Discusión
Hay varios pasos críticos en el protocolo. El entorno circundante debe estar libre de ruido y vibraciones. Los electrodos ECG deben insertarse debajo de la piel de forma estable y consistente de los cuales el paso de inserción requiere experimentos preliminares hasta que el investigador tenga experiencia técnicamente. Además, el anestésico debe prepararse y almacenarse adecuadamente y utilizarse a la dosis adecuada. Por último, las ondas PQRS deben ubicarse adecuadamente en latidos de ECG individuales en la ventana Vista.......
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Divulgaciones
Los autores no declaran conflictos de intereses, financieros o de otro tipo.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por los Programas de Investigación Científica Básica que son administrados por la National Research Foundation of Korea (NRF) (2015R1C1A2A01052419 y 2018R1D1A1B07042484).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 2,2,2-tribromoetanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | anestésicos, Avertin |
| Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japón | Ratones Balb/c, machos, de 7 a 9 semanas | |
| Atropina | Sigma-Aldrich | A0123 | antagonista parasimpático |
| BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Australia | ML132 | bioamplificador |
| Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | agonista parasimpático |
| Electrodos con agujas de acupuntura | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Corea | DB106 | 0.20 x 15 mm |
| Isoprenalina | Sigma-Aldrich | I2760 | agonista simpático |
| LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | software de análisis de datos | |
| Alimento para ratones | LabDiet, St. Louis, MO, EE. UU. | 5L79 | Dieta para ratones |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | sistema de adquisición de datos | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | antagonista simpático |
| Programa estadístico SPSS Programa estadístico | SPSS SPSS | 25.0 |
Referencias
- Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
- Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiol....
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Reimpresiones y permisos
