Aquí, describimos el uso de la tomografía de coherencia óptica de dominio espectral (SD-OCT) para visualizar estructuras retinianas y oculares in vivo en modelos de degeneración retiniana, glaucoma, retinopatía diabética y miopía.
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Artículo de método
Aquí, describimos el uso de la tomografía de coherencia óptica de dominio espectral (SD-OCT) para visualizar estructuras retinianas y oculares in vivo en modelos de degeneración retiniana, glaucoma, retinopatía diabética y miopía.
La tomografía de coherencia óptica de dominio espectral (SD-OCT) es útil para visualizar estructuras retinianas y oculares in vivo. En la investigación, SD-OCT es una herramienta valiosa para evaluar y caracterizar los cambios en una variedad de modelos de enfermedades y lesiones retinianas y oculares. En modelos de degeneración retiniana inducida por luz, SD-OCT se puede utilizar para rastrear el adelgazamiento de la capa de fotorreceptores a lo largo del tiempo. En modelos de glaucoma, SD-OCT se puede utilizar para controlar la disminución de la capa de fibras nerviosas de la retina y el grosor total de la retina y para observar las ventosas del nervio óptico después de inducir hipertensión ocular. En roedores diabéticos, SD-OCT ha ayudado a los investigadores a observar la disminución del grosor total de la retina, así como la disminución del grosor de capas retinianas específicas, particularmente la capa de fibra nerviosa de la retina con la progresión de la enfermedad. En modelos de miopía en ratones, SD-OCT se puede utilizar para evaluar parámetros axiales, como los cambios de longitud axial. Las ventajas de SD-OCT incluyen imágenes in vivo de estructuras oculares, la capacidad de rastrear cuantitativamente los cambios en las dimensiones oculares a lo largo del tiempo y su rápida velocidad de escaneo y alta resolución. Aquí, detallamos los métodos de SD-OCT y mostramos ejemplos de su uso en nuestro laboratorio en modelos de degeneración retiniana, glaucoma, retinopatía diabética y miopía. Los métodos incluyen anestesia, imágenes SD-OCT y procesamiento de las imágenes para mediciones de espesor.
La tomografía de coherencia óptica de dominio espectral (SD-OCT) es una modalidad de imagen precisa y de alta resolución que permite a los médicos e investigadores examinar las estructuras oculares de forma no invasiva. Esta técnica de imagen se basa en la interferometría para capturar imágenes retinianas tridimensionales in vivo a escala micrométrica 1,2. Se ha convertido en una de las modalidades de imagen más utilizadas en la investigación de la visión y en la clínica debido a la fácil detección y precisión de características patológicas como defectos estructurales y / o adelgazamiento de las capas retinian....
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Todos los procedimientos descritos fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de Asuntos de Veteranos de Atlanta y se ajustaron a la guía de los Institutos Nacionales de Salud para el cuidado y uso de animales de laboratorio (NIH Publications,8ª edición, actualizada en 2011).
NOTA: El sistema SD-OCT utilizado para desarrollar el protocolo a continuación se describe en la Tabla de materiales. Si bien algunos de los procedimientos son específicos de este sistema en particular, el enfoque general puede adaptarse para otros dispositivos OCT y modelos animales. Además, en nuestro laborat....
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SD-OCT se considera exitosa si se obtienen imágenes de alta calidad de tal manera que las dimensiones oculares se puedan medir de manera confiable. Aquí, una variedad de usos de SD-OCT se ilustran utilizando modelos de degeneración retiniana, glaucoma, retinopatía diabética y miopía.
En un modelo de degeneración retiniana inducida por la luz (LIRD), la exposición a la luz brillante (10.000 lux) induce la degeneración de las células fotorreceptoras en la retina9. Las imá.......
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Las imágenes de alta resolución de estructuras oculares in vivo permiten la evaluación de los cambios retinianos y oculares a lo largo del tiempo. En este protocolo, se demostró que SD-OCT captura diferencias en estructuras oculares in vivo en modelos de degeneración retiniana, glaucoma, retinopatía diabética y miopía.
El aspecto más crítico a la hora de realizar SD-OCT es obtener una imagen clara de la retina u otra estructura ocular de interés. Es importante tomarse el tiempo para asegurarse.......
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Los autores no tienen nada que revelar.
Este trabajo fue apoyado por los Premios de Desarrollo de Carrera del Servicio de Investigación y Desarrollo de Rehabilitación del Departamento de Asuntos de Veteranos (CDA-1, RX002111; CDA-2; RX002928) a RSA, Premio al Mérito (RX002615) y Premio al Científico de Carrera de Investigación (RX003134) a MTP, Premio de Desarrollo Profesional (CDA-2, RX002342) a AJF, EY028859 a MTP, NEI Core Grant P30EY006360, Investigación para prevenir la ceguera y Foundation Fighting Blindness.
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 1% tropicamida | Sandoz Sandoz | #6131403550; NDC- 24208-585-59 | |
| 0,5% tetracaína | Alcon | NDC 0065-0741-12 | |
| AIM-RAS G3 120 V | Leica Bioptigen | 90-AIMRAS-G3-120 | Plataforma especializada para sostener el cabezal de escáner OCT para ratones |
| Gel celulástico | REFRESH CELLUVISC | #4554; NDC-0023-4554-30 | |
| G3 Lente telecéntrica de 18 mm | Leica Bioptigen | 90-BORE-G3-18 | |
| G3 Lente de ratón | Leica Bioptigen | 90-BORE-G3-M | |
| G3 Lente de rata | Leica Bioptigen | 90-BORE-G3-R | |
| Fabricación | 11-1130 | ||
| Software InVivoVue | Leica Bioptigen | Software especializado que se empareja con el sistema Leica Bioptigen SD-OCT Programa de | |
| modelado matemático | MATLAB | Mathworks | |
| Kit de ratón/rata | Leica Bioptigen | 90-KIT-M/R | Sistema de alineación de roedores ratón/rata |
| solución salina | Sistema ADDIPAK | 200-39 | |
| Envisu R4300 VHR 120 V | Sistema Leica Bioptigen | 90-R4300-V1-120 | SD-OCT |
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