Cambios incrementales de temperatura para la cría y el desove máximos en Astyanax mexicanus

Summary

Este artículo describe las condiciones básicas de laboratorio y los protocolos para un régimen de temperatura incremental para estimular el desove máximo en el tetra mexicano Astyanax mexicanus,que es un modelo emergente para los estudios de desarrollo y evolutivos.

Abstract

El tetra mexicano, Astyanax mexicanus, es un sistema modelo emergente para estudios en desarrollo y evolución. La existencia de morfos de superficie ocular (peces de superficie) y de cueva ciega (peces de cueva) en esta especie presenta una oportunidad para interrogar los mecanismos subyacentes a la evolución morfológica y conductual. Los peces de las cavernas han desarrollado nuevos rasgos constructivos y regresivos. Los cambios constructivos incluyen aumentos en las papilas gustativas y mandíbulas, órganos sensoriales de línea lateral, y la grasa corporal. Los cambios regresivos incluyen pérdida o reducción de los ojos. pigmentación de la melanina, comportamiento de la escolaridad, agresión, y sueño. Para interrogar experimentalmente estos cambios, es crucial obtener un gran número de embriones desovados. Desde que los peces de superficie originales de A. mexicanus y los peces de cueva se recolectaron en Texas y México en la década de 1990, sus descendientes han sido estimulados rutinariamente para reproducir y desovar grandes cantidades de embriones bimestralmente en el laboratorio Jeffery. Aunque la cría está controlada por la abundancia y calidad de los alimentos, los ciclos claros y oscuros y la temperatura, hemos encontrado que los cambios incrementales de temperatura juegan un papel clave en la estimulación del desove máximo. El aumento gradual de la temperatura de 72 ° F a 78 ° F en los primeros tres días de una semana de reproducción proporciona dos o tres días consecutivos de desove con un número máximo de embriones de alta calidad, que luego es seguido por una disminución gradual de la temperatura de 78 ° F a 72 ° F durante los últimos tres días de la semana de desove. Los procedimientos que se muestran en este video describen el flujo de trabajo antes y durante una semana de cría de laboratorio para el desove estimulado por la temperatura incremental.

Introduction

El teleósteo Astyanax mexicanus tiene una forma de vivienda superficial ocular (peces de superficie) y muchas formas diferentes de viviendas de cuevas ciegas (peces de cueva)^1,2. Los peces de las cavernas han evolucionado en la oscuridad perpetua y bajo limitaciones alimentarias, dando lugar a la aparición de nuevos rasgos constructivos y regresivos³. Los rasgos constructivos incluyen aumentos en las papilas gustativas y el tamaño de la mandíbula, los órganos sensoriales de la línea lateral y las reservas de grasa. Los rasgos regresivos incluyen la pérdida o reducción de la pig....

Protocol

Este procedimiento ha sido aprobado por las directrices Institucionales de Cuidado animal de la Universidad de Maryland, College Park (Actualmente IACUC 469 #R-NOV-18-59; Proyecto 1241065-1).

Figura 1. Calendarios durante una semana de cría y una semana no reproductiva. Haga clic aquí para ver una versión más amplia de esta figura.

1. Lunes<....

Results

Generalmente criamos y desovamos a los descendientes de peces de superficie recolectados originalmente en Nacimiento del Río Choy en San Luis Potosí, México (peces de superficie de Río Choy) y San Solomon Springs en el Parque Estatal Balmorhea, Texas (peces de superficie de Texas) y peces de cueva derivados de la Cueva de El Pachón en Tamaulipas, México, y la Cueva de los Sabinos y Sotano de la Tinaja en San Luis Potosí. México.

A lo largo de una semana de cría, se recopilan datos de varios ta.......

Discussion

Astyanax mexicanus es un nuevo modelo biológico que desova con frecuencia y se puede criar fácilmente en el laboratorio^1,2. Debido a que estamos interesados en los mecanismos de desarrollo que subyacen a los cambios evolutivos en los peces de la cueva de A. mexicanus, la producción y el uso de embriones es vital para nuestros objetivos de investigación. El objetivo principal del mantenimiento de una población adulta de peces es la producción de .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Gusanos negros	Acuáticos del este, Lancaster, PA	Ninguno
Redes de cría Huevos de	hechos a
	AquaCave Lake Forest, IL.	Ninguno
Kit de prueba colorimétrica	Petco	SKU:11916	API Kit de prueba de pH de agua dulce
Hojuelas de yema de huevo	Pentair, Minneapolis, MN	Ninguno
Cuencos de dedos	Carolina Biological Supply	741004	Placas de cultivo, 4.5 pulgadas, 250 mL
Redes de mano	Cualquier tienda
Incubadora para embriones	Fisher Scientific	51-029-321HPM	405 L
Sales marinas instantáneas del océano	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Ninguna
Azul de metileno	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	M9140
Pipetas Pasteur	Fisher Scientific	13-678-20	5.75 pulg.
Solución de remojo de red	Cualquier tienda
Ciclo Nutrafin	Amazon	Ninguno	Refuerzo bacteriano
Refrigerador para alimentación en vivo	Cualquier fuente
Microscopio	estereoscópico Cualquier fuente
Termómetro	Cualquier fuente
Tetra Tropical Crisps	Spectrum Brands, Blacksburg, VA	Ninguno