El linfedema es la hinchazón de las extremidades causada por una disfunción linfática. Describimos un modelo de cola murina crónica de linfedema y el uso novedoso de la tecnología de nanotransfección tisular (TNT) para la entrega de carga genética a la cola.
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Artículo de método
Un modelo de linfedema de cola murina
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
El linfedema es la hinchazón de las extremidades causada por una disfunción linfática. La extremidad afectada se agranda debido a la acumulación de líquido, adiposo y fibrosis. No hay cura para esta enfermedad. Un modelo de cola de ratón que utiliza una escisión focal de piel de espesor completo cerca de la base de la cola, lo que resulta en hinchazón de la cola, se ha utilizado para estudiar el linfedema. Sin embargo, este modelo puede dar lugar a una comprendeción vascular y la consiguiente necrosis de la cola y la resolución temprana de la hinchazón de la cola, lo que limita su traducibilidad clínica. El modelo de linfedema crónico de cola murina induce linfedema sostenido durante 15 semanas y una perfusión confiable a la cola. Las mejoras del modelo tradicional de linfedema de cola murina incluyen 1) escisión precisa de espesor completo y recorte linfático utilizando un microscopio quirúrgico, 2) confirmación de perfusión arterial y venosa postoperatoria utilizando manchas láser de alta resolución, y 3) evaluación funcional utilizando linfangiografía láser de infrarrojo cercano verde de indocianina. También utilizamos la tecnología de nanotransfección tisular (TNT) para la nueva entrega focal no viral, transcutánea y de carga genética a la vasculatura de la cola del ratón.
Introducción
El linfedema es la hinchazón de las extremidades causada por una disfunción linfática. La extremidad afectada se agranda debido a la acumulación de líquido, adiposo y fibrosis1. El linfedema afecta a 250 millones de personas en todo el mundo2,3,4. Se estima que el 20-40% de las pacientes que se someten a tratamiento para neoplasias malignas sólidas, como cáncer de mama, melanoma, tumores ginecológicos/urológicos o sarcomas, desarrollan linfedema2,4,5. La morbi....
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Protocolo
El protocolo sigue las directrices del comité de ética en investigación animal de la institución. Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Facultad de Medicina de la Universidad de Indiana. Los animales fueron alojados bajo un ciclo de luz-oscuridad de 12 horas con comida y agua ad libitum.
1. Interrupción quirúrgica de los linfáticos de la cola de ratón
- Use ratones C57BL/6 de ocho semanas de edad de igual distribución de género.
- Coloque un ratón bajo anestesia general en una cámara de inducción con 3-4% de isoflurano en oxígeno al 100% seguido de....
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Resultados
La técnica para el modelo de cola de ratón para el linfedema sostenido se muestra en la Figura 1. La figura exhibe la anatomía relevante del modelo de cola de ratón. La Figura 2 demuestra la hinchazón progresiva y el linfedema persistente sostenido en la cola del ratón después de la inducción del linfedema. El volumen de la cola del ratón, calculado por la ecuación del cono truncado, alcanza su punto máximo en la semana 4 y se es.......
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Discusión
El linfedema se clasifica como una lesión primaria (congénita) o secundaria (linfática iatrogénica)38,39. El linfedema secundario comprende el 99% de los casos39. El linfedema secundario es más comúnmente causado por infección (filariasis) o tratamiento post-oncológico con linfadenectomía o radiación4,39. Un modelo animal traslacional es un desafío para el linfedema secundario, ya .......
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Divulgaciones
Los autores no tienen conflictos de intereses en competencia.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por fondos de subvención proporcionados por la Beca Académica de la Asociación Americana de Cirujanos Plásticos y el Departamento de Defensa W81XWH2110135 a AHH. Subvención de la Fundación de Educación e Investigación en Cirugía Estética a MS. NIH U01DK119099, R01NS042617 y R01DK125835 a CKS.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Tegaderm Film | 1626W | ||
| Microscopio quirúrgico | Leica, Wetzlar, Alemania | MSV266 | |
| Apósito adherente (Tegaderm) | 3M, St. Paul, Minn. | 1626W | |
| Moteado láser (Sistema Pericam PSI) | Perimed AB, Estocolmo, Suecia) | PSIZ | |
| Láser de infrarrojo cercano (LUNA) | Stryker (anteriormente Novadaq Technologies, Toronto, Canadá) | LU3000 | |
| C57BL/6 ratones | Jackson Laboratories | 000664 | |
| Pinzas Micro-Adson - 1x2 dientes | Fine Science Tools (EE. UU.) Inc. | 11019-12 | |
| V-Hook | Fine Science Tools (EE. UU.) Inc. | 18052-12 | |
| Bisturí SS NO15 | Fischer Scientific | 29556 | |
| Aguja desechable 30GX1 | Fischer Scientific | 305128 | |
| tijeras Fischer | Scientific | 12-460-796 | |
| Pinza de joyero quirúrgica, Sklar 4-1/2 en | Fischer Scientific | 50-118-4255 | |
| Tijeras de resorte - rectas/afiladas-afiladas/ Herramientas de ciencia fina de 8 mm | (EE. UU.) Inc. | 15024-10 | |
| Cardiogreen | Sigma | I2633-25MG | |
| IsosulfánAzul (Linfazurina) 50 mg/5ml | Mylan | 67457-220-05 |
Referencias
- Kataru, R. P., et al. Fibrosis and secondary lymphedema: chicken or egg. Translation Research. 209, 68-76 (2019).
- Brayton, K. M., et al. Lymphedema prevalence and treatment benefits in cancer: impact of a therapeutic inte....
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Reimpresiones y permisos
