Preservación de la fertilidad a través de la vitrificación de ovocitos: perspectivas clínicas y de laboratorio

Resumen

La criopreservación de ovocitos es reconocida por varias sociedades científicas internacionales como el estándar de oro para la preservación de la fertilidad en mujeres pospúrdicas. Las estrategias clínicas y de laboratorio adecuadas garantizan la máxima eficacia, eficiencia y seguridad de los tratamientos de preservación de la fertilidad.

Resumen

Preservar la fertilidad femenina es crucial en un sistema de salud multifuncional que se ocupa de la calidad de vida futura de los pacientes. La criopreservación de ovocitos es reconocida por varias sociedades científicas internacionales como el estándar de oro para la preservación de la fertilidad en mujeres pospúrdicas, tanto para indicaciones médicas como no médicas. Las principales indicaciones médicas son las enfermedades oncológicas, las enfermedades ginecológicas como la endometriosis grave, las enfermedades sistémicas que comprometen la reserva ovárica y las afecciones genéticas que implican la menopausia prematura. Este documento describe todo el trabajo clínico y de laboratorio de un tratamiento de preservación de la fertilidad al delinear recomendaciones para un asesoramiento objetivo y basado en la evidencia. Además, se centra en la eficacia del procedimiento y describe las estrategias más adecuadas para explotar al máximo la reserva ovárica y maximizar el número de ovocitos recuperados en el menor tiempo posible. La evaluación de la reserva ovárica, la definición de un protocolo de estimulación ideal, así como los procedimientos de recuperación, denudación y vitrificación de ovocitos se han detallado junto con los enfoques para maximizar su eficacia, eficiencia y seguridad.

Introducción

El desarrollo e implementación de un programa eficiente de criopreservación para ovocitos humanos ha sido un avance significativo en la medicina reproductiva. Según la evidencia reciente, la vitrificación es la estrategia más efectiva para criopreservar ovocitos de metafase II (MII), ya que resulta en tasas de supervivencia estadísticamente más altas en comparación con la congelación lenta, independientemente de la población de pacientes (pacientes infértiles o programa de donación de ovocitos)^1,2,3. Los notables logros de la vitrificación de ovocitos llevaron a los Comités d....

Protocolo

1. Trabajo y asesoramiento clínico

NOTA: En caso de pacientes que requieran preservación de la fertilidad por razones oncológicas, asegúrese de que no haya lista de espera para programar la consulta, y la cita se proporciona lo antes posible.

1. Examinar la historia clínica y la documentación previa, y evaluar el estado de salud general del paciente.
2. Registre toda la información (incluida la aprobación del oncólogo para someterse a la estimulación ovárica en caso de pacientes con cáncer) en una base de datos relacional.
3. Proporcionar al paciente asesoramiento específico sobre la viabilidad del procedimiento. Expliq....

Resultados

Descripción general del programa de preservación de la fertilidad en el centro

Durante un período de 12 años (2008-2020), 285 mujeres se sometieron a al menos una recuperación de ovocitos que implicó la vitrificación de toda la cohorte de óvulos maduros recolectados. La mayoría de estas mujeres (n = 250) se sometieron a una sola recuperación, y 35 se sometieron a múltiples recuperaciones. Las razones para someterse a la recuperación de ovocitos para la vitrificación de óvulos .......

Discusión

Consideraciones clínicas

Aunque se han explorado estrategias emergentes, como la criopreservación del tejido ovárico y la maduración in vitro, la vitrificación de ovocitos después de COS es la técnica estándar de oro para la preservación de la fertilidad. En este escenario, el número de ovocitos recuperados y criopreservados debe maximizarse en el menor tiempo posible, ya que la mayoría de las pacientes con cáncer podrían beneficiarse únicamente de un ciclo ovárico antes de q.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Collection
Equipment
Placa caliente	IVF TECH
Lab Markers	Sigma Aldrich
Campana de flujo laminar	IVF TECH		Grado A Flujo de aire
Microscopio estereoscópico	Leica Leica	M80
Termómetro
Calentador
de ensayo Incubadora trigás	Panasonic	MCO-5M-PE	02/CO2
Bomba de vacío	Cook	K-MAR-5200
Consumibles
CSCM (Cultivo único continuo completo) medio	Fujifilm Irvine Scientific	90165	Medio de cultivo de FIV complementado con aceite mineral HSA
para el cultivo de embriones	Fujifilm Irvine Scientific	9305
Aguja de aspiración de óvulos (un solo lumen)	Cook	K-OSN-1730-B-60
Plato Primario	Corning	353803	Corning Plato Primaria Plato estándar de 100x20 mm
Tubos de fondo redondo	Falcon	352001	Falcon 14ml Tubo de ensayo de poliestireno de fondo redondo con tapón a presión
Tubos de fondo redondo	Falcon	352003	Tubos de recolección de ovocitos / Falcon 5ml 12x75 Tubo de ensayo de polipropileno de fondo redondo con tapón a presión
Bombilla de goma	Sigma Aldrich	Z111589-12EA
Pipetas Pasteur de vidrio estéril	Hunter Scientific	PPB150-100PL	Pipeta Pasteur Cotonate, 150mm, MEA e CE
Denudación
Equipo
asas ajustables	Cook	G18674	Stripper
soporte Gilson Pipetman	Gilson	66003	p20
Incubadora k-System	Coopersurgical	G210Invicell
Marcadores de laboratorio	Sigma Aldrich
Campana de flujo laminar	IVF TECH		Flujo de aire de grado A
Microscopio estereoscópico	Leica Leica Leica	M80
Consumibles
Biopur epTIPS Rack	Eppendorf	30075331	Micropipetas epTIPS Biopur 2-200 & l
Albúmina sérica humana	thermoFisher Scietific	9988
Hialuronidasa	Fujifilm Irvine Scientific	90101	80 UI/mL de enzima hialuronidasa en placa de cultivo de FIV HTF tamponada con HEPES
(60 x 15 mm)	Corning	353802	Corning Primaria Plato de halcón 60X15mm TC Primaria plato de cultivo celular estándar
Plato de FIV Placa de 4 pocillos con tapa deslizante	ThermoFisher Scietific	176740	Multiplatos 4 pocillos (Nunc)
FIV Plato de un pocillo	Falcon	353653	Falcon 60 x 15 mm TC tratado con pocillo central FIV
Aceite mineral para el cultivo de embriones	Fujifilm Irvine Scientific	9305
Medio HTF modificado	Fujifilm Irvine Scientific	90126	HEPES-Medio tamponado
Bombilla de goma	Sigma Aldrich	Z111589-12EA	1 mL para pipetas pasteur
Vidrio estéril pipetas Pasteur	Scientific	PPB150-100PL	Pipeta Pasteur Cotonate, 150 mm, MEA e CE
pipeta de pelado  puntas (140 µ m)	Cook	K-FPIP-1140-10BS-6	PIPETA FLEXIPETS PER DENUDING puntas de
pipeta de pelado (130 y micro; m )	Cook	K-FPIP-1130-10BS-7	PIPETA FLEXIPETS PER DENUDING puntas de
pipeta de pelado (170 µ m)	Cocinero	K-FPIP-1170-10BS-5	PIPETA FLEXIPETS POR DESNUDING
fuerte>vitrificación
Equipo
Juego de mangos ajustables	Cocinero	G18674	Stripper  holder
Gilson Pipetman	Gilson		F123601 p200
Marcadores de laboratorio	Sigma Aldrich
Campana de flujo laminar	IVF TECH		Grado A
Contenedor de acero inoxidable para rejilla de enfriamiento	Kitazato Contenedor de	nitrógeno líquido para vitrificación
estereoscópico	Leica Leica	M80
Consumibles
Biopur epTIPS Rack	Eppendorf	30075331	Micropipetas epTIPS epTIPS Biopur 2-200 µ L
Albúmina de suero humano	Fujifilm Irvine Scientific	9988
Placa de cultivo de FIV (60 x 15 mm)	Corning	353802	Corning Primaria Plato de halcón 60 x 15 mm TC Primaria placa de cultivo celular estándar
Placa de FIV 6 pocillos	Oosafe	OOPW-SW02	OOSAFE  PLATO DE 6 POCILLOS CON SOPORTE PARA PAJITA
Medium HTF modificado	Fujifilm Irvine Scientific	90126	HEPES-Buffered medium
stripping tips (170 µ m)	Cook	K-FPIP-1170-10BS-5	PIPETA FLEXIPETS PER DENUDING
Kit de congelación de vitrificación	Fujifilm Irvine Scientific	90133-so	2 viales de ES (solución de equilibrio, 2 x 1 mL) y 2 viales de VS (solución de vitrificación, 2 x 1 mL)
Vitrifit	Coopersurgical Origio	42782001A	VitriFit  Caja
Calentamiento
Equipo
Juego de manijas ajustables Flexipet	Cocinero	G18674	Soporte para strippers
Gilson Pipetman	Gilson	F123601	p200
Incubadora k-System	Coopersurgical	G210Invicell
Marcadores de laboratorio	Sigma Aldrich
Campana de flujo laminar	IVF TECH		Grado A Depósito
de acero inoxidable para gradilla de refrigeración	Kitazato Contenedor de		nitrógeno líquido para vitrificación
Microscopio estereoscópico	Leica	Leica M80
Consumibles
Biopur epTIPS Rack	Eppendorf	30075331	Micropipetas epTIPS epTIPS Biopur 2-200 µ L
Medio: CSCM (Cultivo único continuo completo)	Medio Fujifilm Irvine Scientific	90165	Medio de cultivo de FIV complementado con placa de cultivo de FIV HSA
(60 x 15 mm)	Corning	353802	Corning Primaria Plato Falcon 60X15mm TC Primaria plato de cultivo celular estándar TC Primaria
Plato de FIV Placa de 4 pocillos con tapa deslizante	ThermoFisher Scietific	176740	Multiplatos 4 pocillos (Nunc)
Plato de FIV Oosafe de 6 pocillos		OOPW-SW02	OOSAFE®   PLATO DE 6 POCILLOS CON SOPORTE PARA PAJITA
Aceite mineral para el cultivo de embriones	Fujifilm Irvine Scientific	9305
SAnápticas de pipeta de disparo (300µ m)	Cocinero	K-FPIP-1300-10BS-5	PIPETA FLEXIPETS POR DENUDADO
Kit de descongelación de vitrificación	Fujifilm Irvine Scientific	90137-so	4 viales de TS (solución de descongelación, 4 x 2 mL) + 1 vial de DS (solución de dilución, 1 x 2 mL) +1 vial de WS (solución de lavado, 1 x 2 mL)

de tubosCO2 incubadora Eppendorf Galaxy 14S Flexipet juego de Hunter <Temporizador electrónicoMicroscopio Temporizador electrónico