Este protocolo detalla la técnica para la extirpación del cerebro del cerdo en su totalidad y la disección de varias regiones cerebrales comúnmente estudiadas en neurociencia.
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Artículo de método
Extracción y disección del cerebro de cerdo domesticado
En este artículo
Resumen
Resumen
El uso del cerdo como modelo animal preclínico y traducible ha sido bien documentado y aceptado por campos de investigación que investigan sistemas cardiovasculares, sistemas gastrointestinales y nutrición, y el cerdo está siendo utilizado cada vez más como un gran modelo animal en neurociencia. Además, el cerdo es un modelo aceptado para estudiar el neurodesarrollo, ya que muestra patrones de crecimiento y desarrollo cerebral similares a lo que ocurre en los seres humanos. Como un modelo animal menos común en neurociencia, los procedimientos quirúrgicos y de disección en cerdos pueden no ser tan familiares o bien practicados entre los investigadores. Por lo tanto, un protocolo visual estandarizado que detalla métodos consistentes de extracción y disección puede resultar valioso para los investigadores que trabajan con el cerdo. El siguiente video muestra una técnica para extirpar el cerebro del cerdo mientras mantiene intacta la corteza y el tronco encefálico y revisa los métodos para diseccionar varias regiones cerebrales comúnmente investigadas, incluyendo el tronco encefálico, cerebelo, midbrain, hipocampo, estriado, tálamo y corteza prefrontal medial. El propósito de este video es proporcionar a los investigadores las herramientas y conocimientos necesarios para realizar consistentemente una extracción y disección cerebral en el cerdo de cuatro semanas de edad.
Introducción
El cerdo ha sido bien documentado y aceptado como un modelo animal traducible para la investigación en sistemas cardiovasculares1,sistemas gastrointestinales2,nutrición3,4,diabetes5,toxicología6,y técnicas quirúrgicas7. El uso del cerdo en neurociencia está empezando a aumentar, ya que PubMed busca las palabras clave "modelo de animales cerebrales porcinos" resultan en cuatro veces más resultados de 1996-2005 que el período anterior de 10 años8,y aún más resultados en ....
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Protocolo
Los procedimientos relacionados con temas animales han sido aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso animal (IACUC) de la Universidad de Illinois en Urbana-Champaign
NOTA: Antes de la eutanasia, el cerdo fue anestesiado a través de inyección intramuscular con una combinación de telazol:ketamina:xylazine (50.0 mg de tiletamina HCl más 50.0 mg de zolazepam HCl reconstituido con 2,50 ml de ketamina HCl (100 g/L) y 2,50 ml de xilazina (100 g/L) y se administra a 0,06 mg/kg BW). Una vez anestesiado, el cerdo fue eutanasiado mediante administración intracardiaca de pentobarbital sódico (390 mg/ml administrado a 1 ml/5 kg de BW). Par....
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Resultados
Esta sección describe ejemplos de resultados obtenidos después de la extracción correcta y la disección de un cerebro de cerdo de 4 semanas de edad. La Figura 1 describe la forma de cada región cerebral para su uso como guía durante la disección. Parte del tronco encefálico puede permanecer en el cráneo después de la extirpación del cerebelo (Figura 1B). Esto se puede eliminar mientras se aísla la región deseada del cerebelo. La Tabla 1 muestra .......
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Discusión
Las técnicas descritas en este documento fueron diseñadas para cerdos de aproximadamente 4 semanas de edad. Es fundamental realizar estos pasos inmediatamente después de que el cerdo ha sido eutanasiado humanamente para asegurar que se mantenga la integridad de la estructura del tejido cerebral, especialmente cuando se consideran ensayos bioquímicos posteriores. Es útil utilizar un atlas o guías de disección de fibra16 al aprender por primera vez las técnicas. Se recomienda que el experimentador p.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros competidores.
Agradecimientos
A los autores les gustaría reconocer a Jim Knoblauch y Martin-Booth Hodges, del Colegio de Servicios de Comunicación y Tecnología de la Información de Ciencias Agrícolas, del Consumidor y Ambientales, por su experiencia en el rodaje, grabación y edición de audio y vídeo.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| #22 Hojas de bisturí para mangos #4 Ted | Pella, inc. | 549-4S-22 | |
| Sierra para huesos Satterlee de 11 1/2" | Leica Biosystems | 38DI13425 | |
| Rompecráneos de 5 1/2" con extremo de cincel (gancho para carne) | Leica Biosystems | 38DI37636 | |
| Banco de taller de alta resistencia de 5 pulgadas Vise | Pony | 29050 | |
| Cuchillo de carnicero 25cm | Victorinox | 5.7403.25 | Afilar antes de usar |
| CM40 Caída de servicio ligero Abrazaderas C forjadas | Bessey | 00655BC3120 | |
| Diamante Afilado Cuchillo Shaper | Chef' s Choice | 436-3 | |
| Shandon Mango de hoja de bisturí de acero inoxidable #4 | Pinza de tejido ThermoScientific | 5334 | |
| Henry Schein | 101-5132 | ||
| Almohadilla de disección | de vinilo Carolina 629006 |
Referencias
- Hughes, H. C. Swine in cardiovascular research. Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).
- Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. Biology of the Domestic Pig. , 31-63 (2001).
- Pond, W. G. Of Pigs and People.
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Reimpresiones y permisos
