Acumulación Y Distribución De Microplásticos Fluorescentes En Las Primeras Etapas De La Vida Del Pez Cebra

Resumen

Los embriones/larvas de pez cebra se desarrollan externamente y son ópticamente transparentes. La bioacumulación de microplásticos en peces en etapas tempranas de la vida se evalúa fácilmente con microperlas etiquetadas fluorescentemente.

Resumen

Como nuevo tipo de contaminante ambiental, el microplástico se ha encontrado ampliamente en el medio acuático y representa una gran amenaza para los organismos acuáticos. La bioacumulación de los microplásticos juega un papel clave en sus efectos tóxicos; sin embargo, como partículas, sus bioacumulaciones son diferentes de muchos otros contaminantes. Aquí se describe un método factible para determinar visualmente la acumulación y distribución de microplásticos en embriones o larvas de pez cebra utilizando microplásticos fluorescentes. Los embriones se exponen a diferentes concentraciones (0,1, 1 y 10 mg/L) de microplásticos fluorescentes con un diámetro de 500 nm durante 120 h. Se muestra en los resultados que los microplásticos pueden bioacumularse en embriones/larvas de pez cebra de una manera dependiente de la concentración. Antes de la eclosión, se encuentra una fuerte fluorescencia alrededor del corion embrionario; mientras que en las larvas de pez cebra, el saco vitelino, el pericardio y el tracto gastrointestinal son los principales sitios acumulados de microplásticos. Los resultados demuestran la absorción e internalización de microplásticos en el pez cebra en etapas tempranas de la vida, lo que proporcionará la base para una mejor comprensión del impacto de los microplásticos en los animales acuáticos.

Introducción

Desde que se sintetizó por primera vez en la década de 1900, los plásticos son ampliamente utilizados en varios campos, lo que resulta en un rápido crecimiento de la producción mundial¹. En 2018, se produjeron aproximadamente 360 millones de toneladas de plásticos en todo el mundo². Los plásticos en el medio natural se degradarán a partículas finas debido a procesos químicos, físicos o biológicos³. En general, las partículas plásticas finas de tamaño <5 mm se definen como microplásticos⁴. Los microplásticos también están diseñados para aplicaciones específicas, como las mic....

Protocolo

Los peces cebra adultos se originan en el Centro de Recursos de Pez Cebra de China (Wuhan, China). Los experimentos se llevaron a cabo de acuerdo con la guía nacional "Guía de animales de laboratorio para la revisión ética del bienestar animal (GB/T35892-2018).

1. Recolección de embriones

1. Mantener los peces en tanques de vidrio de 20 L con sistema de agua del grifo filtrada por carbón recirculante (pH 7.0 ± 0.2) a una temperatura constante (28 ± 0.5 °C) en un fotoperiodo de 14:10 h luz: oscuro.
2. Alimente a los peces dos veces al día con Artemia nauplii. Se recomienda que la comida se dé a un máximo del 3% de peso....

Resultados

La distribución y acumulación de microplásticos fluorescentes se muestran en la Figura 1 y tabla 1. No se observa fluorescencia visible en el grupo no expuesto (control). Sin embargo, se encuentra una acumulación de fluorescencia que rodea el corion después de la exposición a diferentes concentraciones de microplásticos (24 hpf). La fluorescencia verde también se detecta en larvas, y los niveles de fluorescencia parecen aumentar de una manera dependiente de la concentración .......

Discusión

De acuerdo con la directriz sobre la protección de los animales utilizados con fines científicos, como la Directiva 2010/63/UE de la UE, el permiso de ética animal no es obligatorio para un experimento con etapas tempranas de la vida del pez cebra hasta la etapa de ser capaz de alimentarse de forma independiente (5 días después de la fertilización)¹⁷. Sin embargo, las mejores prácticas de bienestar son importantes para optimizar el uso del pez cebra y, por ejemplo, los métodos humanos de anestesia.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Microscopio fluorescente	Nikon, Japón	Eclipse Ti-S
Perlas de poliestireno verdes marcadas con fluorescencia	Phosphorex, EE. UU.	2103A
Tricaine	Sigma-Aldrich, EE. UU	A5040

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