Consideración de la recolección, el procesamiento y el almacenamiento para la investigación de biomarcadores urinarios

Summary

Este protocolo tiene como objetivo proporcionar consideraciones para la recolección, el procesamiento y el almacenamiento de muestras de orina para estudios de biomarcadores de infección del tracto urinario.

Abstract

Hay varias proteínas urinarias que se muestran prometedoras como nuevos marcadores de infecciones del tracto urinario. La identificación de un nuevo biomarcador que tenga una mayor precisión predictiva en comparación con los métodos de diagnóstico actuales tiene el potencial de mejorar en gran medida la capacidad de manejo de los pacientes con infecciones del tracto urinario. Sin embargo, la recolección, el procesamiento y el almacenamiento de muestras pueden afectar potencialmente los resultados de la investigación de biomarcadores. Es necesario comprender los efectos de cada una de estas etapas en los estudios de biomarcadores para informar futuras investigaciones de alta calidad en esta área, así como para revisar críticamente otros estudios en esta área. Aquí, el estudio revisa la literatura sobre los efectos de cada etapa del procesamiento de muestras de orina e informa sobre los efectos de diversas afecciones en las proteínas urinarias. El protocolo se centrará en las técnicas de recolección, el tiempo y la temperatura de almacenamiento, las técnicas de procesamiento, el uso de reactivos y la congelación a largo plazo en la estabilidad de los biomarcadores. Se centrará en las proteínas, pero discutirá brevemente otros materiales que pueden utilizarse en la investigación de biomarcadores. De este modo, este protocolo proporcionará una guía a futuros investigadores para ayudar en el diseño de estudios de biomarcadores urinarios.

Introduction

Las infecciones del tracto urinario (ITU) son una de las infecciones bacterianas más comunes tanto en niños como en adultos¹. Si bien el diagnóstico de ITU en algunas poblaciones puede ser sencillo, puede ser más complejo en otras, como las personas con vejigas neuropáticas². La capacidad de diagnosticar con precisión las infecciones urinarias ayudará a mejorar los esfuerzos de administración de antibióticos al disminuir el uso de antibióticos innecesarios y, potencialmente, ayudará en el diagnóstico temprano de las infecciones urinarias, disminuyendo así el riesgo de morbilidad. Dada la....

Protocol

Este protocolo sigue los lineamientos del comité de ética en investigación en seres humanos de la institución. Asegurarse de que se obtenga la aprobación de la junta de revisión institucional (IRB, por sus siglas en inglés) antes de la recolección y utilización de especímenes biológicos para la investigación.

1. Colección

1. Obtenga una muestra de orina en un recipiente estéril para muestras. Decidir el tipo de muestra de orina, así como los criterios específicos de inclusión y exclusión, en función del diseño específico del estudio. Para los estudios de infecciones urinarias, utilice el método de ....

Results

La centrifugación tuvo un pequeño impacto en los niveles de NGAL. Las muestras centrifugadas almacenadas a -80 °C tenían niveles más bajos de NGAL que las muestras no centrifugadas (2,17 ng/mL ± 0,32 ng/mL, 2,77 ng/mL ± 0,21 ng/mL). Los ciclos de congelación también tuvieron un impacto en los niveles de NGAL después del tercer ciclo de congelación-descongelación. (Figura 2). De las condiciones estudiadas (centrifugación, ciclos de congelación-descongelación y temperatura de almacenamiento), .......

Discussion

La importancia de producir resultados consistentes y reproducibles no se limita al éxito de los estudios individuales, sino que también permitirá una mejor comparación de los resultados dentro de la literatura⁹. La variación entre estudios en etapas clave del procedimiento puede introducir sesgos irreversibles que pueden afectar las señales de los biomarcadores y su interpretación, lo que puede ser responsable de discrepancias entre varios estudios

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Ácido bórico	Sigma-Aldrich	B6768	A tener en cuenta para muestras que no se pueden procesar y congelar rápidamente
Cajas de congelación	Fisher Scientific	03-395-464
Tubos de microcentrífuga	Thomas scientific	1149X93
NGAL ELISA Kit	R& D Systems	DLCN20	Se utiliza para crear resultados representativos
Pipeta y puntas	Depende del tamaño de la pipeta y del volumen de fluido.
Azida sódica	Sigma-Aldrich	S2002	A tener en cuenta para muestras que no se pueden procesar y congelar rápidamente
Vasos de recolección de orina	Thermo Scientific	3122B03ORG	No se requieren vasos estériles a menos que sean necesarios para otros estudios