In vitro Inducción de células madre de pulpa dental humana hacia linajes pancreáticos

Suryo Kuncorojakti; Watchareewan Rodprasert; Quynh Dang Le; Thanaphum Osathanon; Prasit Pavasant; Chenphop Sawangmake

doi:10.3791/62497

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Artículo de método

In vitro Inducción de células madre de pulpa dental humana hacia linajes pancreáticos

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DOI:

10.3791/62497

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25 de septiembre de 2021

Suryo Kuncorojakti^*¹^,² , Watchareewan Rodprasert^*¹ , Quynh Dang Le¹^,⁵ , Thanaphum Osathanon³^,⁴ , Prasit Pavasant³^,⁴ , Chenphop Sawangmake¹^,⁵^,⁶

¹Veterinary Stem Cell and Bioengineering Innovation Center (VSCBIC), Veterinary Pharmacology and Stem Cell Research Laboratory, Faculty of Veterinary Science, Chulalongkorn University, ²Department of Veterinary Anatomy, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga, ³Department of Anatomy, Faculty of Dentistry, Chulalongkorn University, ⁴Center of Excellence in Regenerative Dentistry, Faculty of Dentistry, Chulalongkorn University, ⁵Veterinary Stem Cell and Bioengineering Research Unit, Faculty of Veterinary Science, Chulalongkorn University, ⁶Department of Pharmacology, Faculty of Veterinary Science, Chulalongkorn University

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Este protocolo presenta una comparación entre dos protocolos de inducción diferentes para diferenciar las células madre de la pulpa dental humana (hDPSC) hacia los linajes pancreáticos in vitro:el protocolo integrador y el protocolo no integrativo. El protocolo integrador genera más células productoras de insulina (IMIC).

Resumen

A partir de 2000, el éxito del trasplante de islotes pancreáticos utilizando el protocolo de Edmonton para tratar la diabetes mellitus tipo I todavía enfrentaba algunos obstáculos. Estos incluyen el número limitado de donantes de páncreas cadavérico y el uso a largo plazo de inmunosupresores. Las células madre mesenquimales (CME) se han considerado un candidato potencial como una fuente alternativa de generación de células similares a los islotes. Nuestros informes anteriores han ilustrado con éxito el establecimiento de protocolos de inducción para diferenciar las células madre de la pulpa dental humana (hDPSC) a las células productoras de insulina (IMC). Sin embargo, la eficiencia de inducción varió mucho. En este artículo, demostramos la comparación de la eficiencia de inducción pancreática de hDPSC a través de protocolos de inducción integrativos (manipulación microambiental y genética) y no integrativos (manipulación microambiental) para administrar IVC derivados de hDPSC (hDPSC-IVC). Los resultados sugieren una eficiencia de inducción distinta para ambos enfoques de inducción en términos de estructura de colonias en 3 dimensiones, rendimiento, marcadores de ARNm pancreático y propiedad funcional en el desafío de glucosa de dosis múltiples. Estos hallazgos apoyarán el establecimiento futuro de una plataforma de producción de IMIC y linaje pancreático clínicamente aplicable.

Introducción

La diabetes mellitus es una preocupación mundial constante. Un informe de la Federación Internacional de Diabetes (FID) estimó que la prevalencia mundial de la diabetes aumentaría de 151 millones en 2000 a 415 millones en 2015¹^,². El último estudio basado en la epidemiología ha predicho que la prevalencia mundial estimada de diabetes aumentará de 451 millones en 2017 a 693 millones en 2045¹. El éxito del trasplante de islotes pancreáticos utilizando el protocolo de Edmonton se demostró por primera vez en el año 2000, cuando se demostró que mantenía la producción endógena de insulina y e....