La enterocolitis necrosante (ECN) es la enfermedad gastrointestinal (GI) más grave que a menudo ocurre en bebés prematuros, especialmente en bebés de muy bajo peso al nacer, con alta mortalidad y patogénesis poco clara. La causa de la NEC puede estar relacionada con anomalías inflamatorias del sistema regulador inmunitario. Un modelo animal NEC es una herramienta indispensable para la investigación inmune de la enfermedad NEC. Los modelos animales NEC generalmente usan ratones neonatales C57BL / 6J; Los ratones neonatales BALB/c rara vez se utilizan. Los estudios relacionados han demostrado que cuando los ratones están infectados, la diferenciación de células Th2 es predominante en ratones BALB / c en comparación con ratones C57BL / 6J. Los estudios han sugerido que la aparición y el desarrollo de NEC se asocian con un aumento en las células T auxiliares tipo 2 (Th2) y generalmente se acompañan de infección. Por lo tanto, este estudio utilizó ratones BALB/c neonatales para inducir un modelo de NEC con características clínicas similares y cambios patológicos intestinales como los observados en niños con NEC. Se justifica un estudio adicional para determinar si este modelo animal podría usarse para estudiar las respuestas de las células Th2 en NEC.
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Artículo de método
Un modelo de ratón BALB/c neonatal de enterocolitis necrosante
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Resumen
Resumen
La enterocolitis necrosante (ECN) es la enfermedad gastrointestinal (GI) más grave que a menudo ocurre en bebés prematuros, especialmente en bebés de muy bajo peso al nacer, con alta mortalidad y patogénesis poco clara. La causa de la NEC puede estar relacionada con anomalías inflamatorias del sistema regulador inmunitario. Un modelo animal NEC es una herramienta indispensable para la investigación inmune de la enfermedad NEC. Los modelos animales NEC generalmente usan ratones neonatales C57BL / 6J; Los ratones neonatales BALB/c rara vez se utilizan. Los estudios relacionados han demostrado que cuando los ratones están infectados, la diferenciación de células Th2 es predominante en ratones BALB / c en comparación con ratones C57BL / 6J. Los estudios han sugerido que la aparición y el desarrollo de NEC se asocian con un aumento en las células T auxiliares tipo 2 (Th2) y generalmente se acompañan de infección. Por lo tanto, este estudio utilizó ratones BALB/c neonatales para inducir un modelo de NEC con características clínicas similares y cambios patológicos intestinales como los observados en niños con NEC. Se justifica un estudio adicional para determinar si este modelo animal podría usarse para estudiar las respuestas de las células Th2 en NEC.
Introducción
La enterocolitis necrosante (ECN), la enfermedad gastrointestinal (GI) más grave, ocurre en la mayoría de los bebés prematuros (>90%), especialmente en aquellos con muy bajo peso al nacer (VLBW)1. En los lactantes VLBW, la incidencia de la enfermedad oscila entre el 10% y el 12%, y la mortalidad de los niños diagnosticados con ECN se sitúa entre el 20% y el 30%2,3. La causa de la NEC puede estar relacionada con lesiones mucosas, invasión por bacterias patógenas y alimentación intestinal, lo que puede conducir a respuestas inflamatorias y a la inducción de lesiones intestinales en huéspe....
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Protocolo
Esta investigación fue aprobada por el Comité de Ética Médica del Centro Médico de Mujeres y Niños de Guangzhou (NO. 174A01) y el Comité de Ética Animal del Centro de Animales de Laboratorio de Guangzhou Forevergen Biosciences (IACUC-G160100). Todos los animales fueron criados en la misma habitación en un ambiente específico libre de patógenos (SPF), y los experimentos se llevaron a cabo en un ambiente convencional. Los ratones utilizados para la cría tenían 7-8 semanas de edad; los ratones para inducir NEC (n = 72) se separaron de la presa el día 4, y las presas (n = 14) se mantuvieron en la jaula original y amamantaron a los ratones del grupo de control (Cont.) (n =....
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Resultados
El modelo NEC de ratón BALB/c fue inducido por la alimentación con fórmula, la alimentación lpS, la hipoxia y la estimulación en frío. Durante el período de inducción, los ratones fueron observados para la patología intestinal, las características de las heces, los cambios en el peso corporal y la supervivencia diaria. Imágenes representativas del intestino delgado durante la inducción de NEC; los números en la imagen representan la puntuación de patología intestinal de 0 (epitelio normal) a 4 (el más grave) (
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Discusión
La ECN es la emergencia del sistema gastrointestinal más frecuente para los neonatos, con una alta incidencia y mortalidad, especialmente en prematuros1,2,3. Sin embargo, su patogénesis aún no está clara. Actualmente se cree que el daño de la mucosa, la invasión de patógenos y la alimentación enteral son factores de alto riesgo para NEC3. Hasta la fecha, los animales utilizados para el modelo NEC son prin.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen conflictos de intereses que revelar.
Agradecimientos
Los autores agradecen al Banco de Recursos Biológicos Clínicos del Centro Médico de Mujeres y Niños de Guangzhou por proporcionar la muestra clínica y al Centro de Animales de Laboratorio de Guangzhou Forevergen Biosciences por proporcionar ratones. Esta investigación fue apoyada por la fundación de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China 81770510 (R.Z.).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Etanol absoluto | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | ||
| Leche de cabra en polvo | Petag | ||
| solución de colorante HE | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | G1003 | |
| Isoflurano | RWD, Shenzhen Reward Life Technology Co., LTD. | R510 | |
| LPS | Sigma-Adrich | L2880 | |
| Oxígeno médico | varios | varios | |
| Microscopio | NIKON | Sistema de imagen NIKON (DS-Ri2) | |
| Resina neutra | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | ||
| Parafina | varios | varios | |
| Leche en polvo para bebés prematuros | Abbott | 57430 | |
| Xileno | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | ||
| Ácido clorhídrico al 1% | varios | varios | |
| Formalina al 10% | LEAGENE | DF0110 |
Referencias
- Horbar, J. D., et al. Mortality and neonatal morbidity among infants 501 to 1500 grams from 2000 to 2009. Pediatrics. 129 (6), 1019-1026 (2012).
- Stoll, B. J., et al. Neonatal outcomes of extremely preterm infants from the NICHD Neonat....
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Reimpresiones y permisos
Erratum
Formal Correction: Erratum: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis
Posted by JoVE Editors on 3/07/2022. Citeable Link.
An erratum was issued for: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis. The Representative Results section was updated.
Figure 1 was updated from:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
to:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
