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Artículo de método

Una técnica de manguito modificado para el modelo de trasplante cardíaco heterotópico cervical de ratón

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DOI:

10.3791/63504

7 de febrero de 2022

* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

En el presente protocolo, se utiliza un modelo de trasplante cardíaco de ratón para investigar el mecanismo del rechazo del aloinjerto cardíaco. En este modelo heterotópico de trasplante cardíaco, se mejora la eficiencia de la operación y la supervivencia de los injertos cardíacos se garantiza mediante una anastomosis cervical de extremo a extremo de la implantación cardíaca utilizando una técnica de manguito modificado.

Resumen

El rechazo del aloinjerto cardíaco limita la supervivencia a largo plazo de los pacientes después del trasplante de corazón. Un modelo de trasplante de corazón de ratón es ideal para investigar el mecanismo de rechazo del aloinjerto cardíaco en estudios preclínicos debido a su alta homología con genes humanos. Esta comprensión ayudaría a desarrollar enfoques únicos para mejorar la supervivencia a largo plazo de los pacientes tratados con aloinjertos cardíacos. En un modelo de ratón, la implantación cardíaca de un donante abdominal se realiza comúnmente con una anastomosis de extremo a extremo en la aorta del receptor y la vena cava inferior mediante puntos de sutura. En este modelo, el corazón del donante se implanta mediante anastomosis de extremo a extremo en la arteria carótida y la vena yugular del receptor mediante la técnica del manguito modificado. La cirugía de trasplante se realiza sin suturas y, por lo tanto, puede aumentar la supervivencia del receptor, ya que no hay interferencia con el suministro de sangre y el reflujo venoso de la parte inferior del cuerpo. Este modelo de ratón ayudaría a investigar los mecanismos subyacentes al rechazo inmunológico y patológico (agudo/crónico) de los aloinjertos cardíacos.

Introducción

El trasplante de corazón se ha convertido en el tratamiento estándar para la insuficiencia cardíaca terminal. Más de 5.500 trasplantes de corazón por año se realizan en las organizaciones registradas bajo la Sociedad Internacional de Trasplante de Corazón y Pulmón. Entre los receptores de trasplante alogénico de corazón, la tasa de rechazo a 1 año sigue siendo del >10%, mientras que la tasa de rechazo a 3 años aumentó al 36%1,2. Sin embargo, faltan tratamientos profilácticos efectivos para los pacientes con rechazo del aloinjerto cardíaco. Por lo tanto, se justifican estudios con modelos animales que aclaren l....

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Protocolo

Todos los experimentos con animales se realizaron de conformidad con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio, octava edición, Consejo Nacional de Investigación (EE.UU.) 2011. Los procedimientos que involucran sujetos animales han sido aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales del Hospital de Cáncer de la Universidad de Chongqing, Chongqing, China. Para el estudio de trasplante alogénico se utilizaron ratones machos BALB/c y C57BL/6 con un peso de 20-30 g, obtenidos de fuentes comerciales (ver Tabla de materiales). Los ratones C57BL/6 se utilizaron como donantes y receptores singénicos, mientras que los ratones BALB/c sirvie....

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Resultados

En este modelo de trasplante cardíaco heterotópico cervical de ratón, la tasa de supervivencia de los ratones receptores fue de aproximadamente el 95,2% (20 de 21 ratones sobrevivieron). La causa principal de muerte fue el sangrado postoperatorio. El latido cardíaco rápido con un ritmo regular sirve como un indicador de la supervivencia del corazón del donante implantado.

Los ratones C57BL/6 y BALB/c eran tipos MHC (H-2b) y MHC (H-2d) en este modelo, respectivamente

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Discusión

El modelo de trasplante de corazón de ratón contribuye a la investigación de los mecanismos de rechazo después del trasplante de corazón, contribuyendo al desarrollo de enfoques únicos para mejorar la supervivencia a largo plazo de los receptores de aloinjertos cardíacos. Sin embargo, el trasplante cardíaco en ratones es una tarea compleja y desafiante, que requiere un alto nivel de técnicas de microcirugía, especialmente en anastomosis vascular11,12,13

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81870304) a Jun Li.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
  5-0 Sutura de monofilamento de poliamidaB.Braun Medical Inc.C3090954
  8-0 Sutura de monofilamento de poliamidaB.Braun Medical Inc.
Sutura de monofilamento de poliamida 10-0B.Braun Medical Inc.
Brazalete de poliuretano de 22 GB.Braun Medical Inc.4251628-02
Manguito de poliuretano de 26 GSuzhou Linhua Medical Instrument Co., LTDREF383713
Cámara de inducción de anestesiaRWD Life Science Co., LTDV100
Pinza microvascular atraumáticaBeyotimeFS500
BALB/c y C57BL/6 ratones (20– 30 g)Centro de Animales de Experimentación (Universidad Médica del Ejército, Chongqing, China)
BuprenorfinaEE. UU. Ciencias de la vida biológica352004
ElectrocoaguladorGuangzhou Runman Medical Instrument Co., LTDZJ1099
GasaHenan piaoan group Co., LTD10210402
Almohadilla térmicaGuangzhou Dewei Biological Technology Co., LTDDK0032
HeparinaNorth China Pharmaceutical Co., LTD2101131-2
Solución HTKShenzhen Changyi Pharmaceutical Co., LtdYZB/Min8263-2013
Jeringa de inyección (10 mL)Shandong weigao group medical polymer Co., LTD20211001
IsofluranoRWD Life Science Co., Ltd 21070201
Solución salina fisiológicaSouthwest pharmaceutical Co., LTD H50021610
Aguja para el cuero cabelludo Afeitadora20183150210del Grupo Médico Hongyu
BeyotimeFS600
Máquina de anestesia para animales pequeñosRWD Life Science Co., LTDR500
Microscopio de operación quirúrgicaTiannuoxiang Scientific Instrument Co., Ltd, Pekín, ChinaSZX-6745
HisopoYubei Materiales Médicos Co., LTD21080274
C2090880G0090781

Referencias

  1. Khush, K. K., et al. The International thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-sixth adult heart transplantation report - 2019; focus theme: Donor and recipient size match. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 3....

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Etiquetas

Trasplante de coraz n de rat nModelo de trasplante cervicalRechazo del aloinjerto card acoAnastomosis vascularAnastomosis extremo a extremoImplantaci n del coraz n donantePinza microvascularSupervivencia del injerto card acoModelo de trasplante animal