Debido a la compleja anatomía, un protocolo de disección y recolección consistentemente reproducible para muestras cardíacas puede ser difícil de implementar. Este manuscrito presenta los elementos clave de algunos protocolos estándar de disección cardíaca, destacando tanto los enfoques de examen macroscópico como los sitios de muestreo comúnmente utilizados para el examen histopatológico.
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Artículo de método
Técnicas de disección y muestreo histológico del corazón en grandes modelos animales para enfermedades cardiovasculares
En este artículo
Resumen
Resumen
El examen bruto estándar y el muestreo son elementos clave en la reproducibilidad y el éxito de los estudios experimentales de enfermedades cardiovasculares llevados a cabo en animales grandes. Teniendo en cuenta la compleja anatomía del corazón, las diferencias entre especies y los tipos de reacciones compensatorias y patológicas, los protocolos consistentes son difíciles de implementar. La utilización de múltiples protocolos de disección generalmente se adapta a la experiencia del prosector, y la preferencia personal sigue siendo una fuente de variabilidad experimental e interobservador. Aquí, el objetivo es presentar las principales características anatómicas y puntos de referencia, protocolos de disección y estándares de muestreo histológico del corazón en algunas especies de uso común (incluidos perros, cerdos, rumiantes y gatos) como modelos de enfermedades cardiovasculares.
Aquí se presentan dos protocolos estándar de examen bruto. Primero, el método de entrada-salida, que sigue la dirección fisiológica del flujo sanguíneo a través del corazón y los vasos grandes (utilizado con frecuencia en perros, rumiantes y cerdos), y segundo, la técnica de disección de cuatro cámaras (ejemplificada en gatos). Ambas técnicas pueden adaptarse a cualquier especie en determinadas circunstancias experimentales. Los protocolos de muestreo incluyen todas las áreas de interés (ganglio sinoauricular, ventrículos, tabique interventricular, aurículas, válvulas y aorta) y, si se llevan a cabo correctamente, mejoran tanto la reproducibilidad como la fiabilidad de los estudios experimentales.
Introducción
Debido a la compleja anatomía y el rigor temprano, que pueden interferir con la evaluación del grosor de la pared cardíaca, el examen macroscópico del corazón es desafiante y propenso a varios errores relacionados con la técnica o la interpretación. Esto se ve amplificado por las variaciones morfológicas interespecíficas y por el hecho de que muchas patologías cardíacas clínicas mayores (incluidos los casos tempranos de enfermedades coronarias, fibrosis, arteritis y amiloidosis) no están asociadas con ningún cambio macroscópico, siendo, en esencia, patologías histológicas. Un protocolo estandarizado de disección y recolección de muestras histológicas puede aportar con....
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Protocolo
El protocolo experimental recibió un acuerdo bioético (No. 311 de 2022) y fue aprobado por el Comité de Bioética de la Universidad de Ciencias Agrícolas y Medicina Veterinaria de Cluj-Napoca, en cumplimiento de la legislación nacional (Ley No. 43 de 2014) y europea (Directiva de la UE No 63 de 2010). Consulte la Tabla de materiales para obtener detalles sobre todos los materiales e instrumentos utilizados en este protocolo.
1. Protocolo de necropsia
NOTA: Se recomienda que se utilice el mismo protocolo de necropsia para todas las especies presentadas debido a la facilidad de acceso....
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Resultados
Este protocolo se utilizó para visualizar las características anatómicas y recolectar muestras para el examen histológico del corazón en cuatro especies diferentes (perro, gato, cerdo y vaca). El protocolo de necropsia se repitió en cada una de las especies mencionadas anteriormente, pero se ilustró solo en perros. El protocolo de necropsia comienza con un examen externo extenso del cuerpo (Figura 1A) (incluyendo la piel, los ganglios linfáticos explorables y la mucosa exterior), midiendo el.......
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Discusión
Al realizar el protocolo actual, se deben considerar cuidadosamente varios pasos críticos para obtener resultados consistentes. En animales jóvenes, las medidas cardíacas son diferentes de las de los adultos (incluido el grosor de la pared ventricular) y, en general, el corazón representa una mayor proporción del peso corporal11,12. El grado de hipertrofia ventricular se puede cuantificar aplicando una fórmula de peso general, la relación entre el ventrículo izqu.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen conflictos de intereses que revelar.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Solución salina al 0,9% | B. BRAUN MELSUNGEN AG | Para lavar toda la sangre y los coágulos de sangre del corazón. | |
| 10% de formalina tamponada neutra (NBF) | Q Ruta | 11699404 | Materiales para la recogida de muestras histopatológicas. |
| Pinza de corte de hueso | HELEN SRL LS109HV | Instrumento robusto para cortar hueso. | |
| Tabla de cortar | Ambition | 86304 | Para facilitar la manipulación, y el corte de los órganos. |
| La solución descalcificante | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | mezcla 1:1 de ácido fórmico al 8% y ácido clorhídrico. |
| Cámara digital | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | Para documentación fotográfica y videográfica. |
| Pinzas | MKD-Medicale | 15-430 Instrumentos de | disección. |
| Casetes histológicos | Q Path | 720-2215 | Materiales para la recogida de muestras de histopatología. Dimensiones: 3 veces; 2,5 veces y 0,4 cm |
| Cuchillo | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Cuchilla afilada para cortar tejidos blandos. |
| Guantes de látex | MKD-Medicale | SANTEX-S Equipo de | protección. |
| Mascarilla | MKD-Medicale | 21221 | Equipo de protección. |
| Placas de Petri | MKD-Medicale | 0598-1V | Materiales para la recogida de muestras de pruebas auxiliares. |
| Recipientes de plástico | Corning Gosselin | TP200-02 | Materiales para la recogida de muestras de histopatología. |
| Báscula | ESPERANZA MEEKS008 | Para pesar los órganos. | |
| Báscula | Blancas Ofertas | 72 | Para el pesaje de los sujetos. |
| Bisturí | MKD-Medicale | 10322E | Cuchilla afilada para cortar tejidos blandos. |
| Tijeras | MKD-Medicale | 13-260 Instrumentos de | disección. |
| Fregador | MKD-Medicale | 410100-52 Equipo de | protección. |
| Jeringas | MKD-Medicale | 10573EU | Materiales para la recogida de muestras de pruebas auxiliares. |
Referencias
- Ashworth, M. Pathology of Heart Disease in the Fetus, Infant and Child: Autopsy, Surgical and Molecular Pathology. , Cambridge University Press. Cambridge. (2019).
- Barone, R. Anatomie Comparée des Mammifères Domestiques: Angiologie. Vigot, , Lyon. (2011).
- Basso,....
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Reimpresiones y permisos
