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Artículo de método

Preparación estandarizada del anillo coronario de la rata y registro en tiempo real de los cambios dinámicos de tensión a lo largo del diámetro del vaso

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DOI:

10.3791/64121

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16 de junio de 2022

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* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

El presente protocolo describe la técnica de miógrafo de alambre para medir la reactividad vascular de la arteria coronaria de la rata.

Resumen

Como un evento clave de las enfermedades del sistema cardiovascular, la enfermedad de las arterias coronarias (EAC) ha sido ampliamente considerada como el principal culpable de la aterosclerosis, el infarto de miocardio y la angina de pecho, que amenazan seriamente la vida y la salud de las personas en todo el mundo. Sin embargo, cómo registrar las características biomecánicas dinámicas de los vasos sanguíneos aislados ha desconcertado a las personas durante mucho tiempo. Mientras tanto, el posicionamiento preciso y el aislamiento de las arterias coronarias para medir los cambios de tensión vascular dinámica in vitro se han convertido en una tendencia en el desarrollo de fármacos CAD. El presente protocolo describe la identificación macroscópica y la separación microscópica de las arterias coronarias de ratas. La función de contracción y dilatación del anillo de la arteria coronaria a lo largo del diámetro del vaso se monitoreó utilizando el sistema de miógrafo múltiple establecido. Los protocolos estandarizados y programados de medición de la tensión del anillo coronario, desde el muestreo hasta la adquisición de datos, mejoran enormemente la repetibilidad de los datos experimentales, lo que garantiza la autenticidad de los registros de tensión vascular después de la intervención fisiológica, patológica y farmacológica.

Introducción

La enfermedad arterial coronaria (EAC) ha sido ampliamente reconocida y preocupada como una enfermedad cardiovascular típica y representativa, siendo la principal causa de muerte tanto en los países desarrollados como en los países en desarrollo 1,2. Como vía de suministro de sangre y oxígeno para la función fisiológica cardíaca normal, la sangre circulante entra y nutre el corazón a través de dos arterias coronarias principales y una red vascular sanguínea en la superficie del miocardio 3,4. Los depósitos de colesterol y grasa en las arterias coronari....

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Protocolo

El protocolo animal fue revisado y aprobado por el Comité de Gestión de la Universidad de Medicina Tradicional China de Chengdu (Registro No. 2021-11). Se utilizaron ratas macho Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 semanas de edad) para el presente estudio. Las ratas se mantuvieron en una cámara de animales y fueron libres de beber y comer durante el experimento.

1. Preparación de la solución

  1. Preparar solución salina fisiológica (PSS) disolviendo 118 mM de NaCl, 4,7 mM de K+, 2,5 mM de CaCl2, 1,2 mM de KH2PO4, 1,2 mM de MgCl2∙6H2O, 25 mM de NaHCO

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Resultados

Las arterias coronarias de ratas distribuidas y ocultas anatómicamente en el tejido miocárdico no se reconocían fácilmente. Al comparar las arterias coronarias de humanos (Figura 1A) y ratas (Figura 1B), se realizó una separación rápida y precisa de las arterias coronarias de ratas de acuerdo con el proceso de muestreo en la Figura 2. Después de localizar con precisión la aurícula derecha, la arteria pulmonar y el ápice desde el fre.......

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Discusión

La alteración de la microcirculación coronaria, que involucra a una amplia gama de pacientes con EAC, se ha reconocido gradualmente y se ha preocupado por la base para una adecuada perfusión de miocardio. Teniendo en cuenta las complicaciones graves de la enfermedad coronaria repentina y la enfermedad cardiovascular, la prevención y el tratamiento oportunos de los medicamentos son extremadamente importantes para un individuo clínico con CAD17. Inevitablemente, el secreto de la anatomía de la arter.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por el proyecto clave de I + D del Plan Provincial de Ciencia y Tecnología de Sichuan (2022YFS0438), la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (82104533), la Fundación de Ciencia Postdoctoral de China (2020M683273) y el Departamento de Ciencia y Tecnología de la Provincia de Sichuan (2021YJ0175).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
ApigeninaSangon Biotech Co., Ltd., Shanghái, China150731
CaCl2Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghái, ChinaA501330
D-glucosaSangon Biotech Co., Ltd., Shanghái, ChinaA610219
HEPESXiya Reactivo Co., Ltd., Shandong, ChinaS3872
KClSangon Biotech Co., Ltd., Shanghái, ChinaA100395
KH2PO4Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghái, ChinaA100781
LabChart Professional versión 8.3 ADInstrumentos, Australia—
MgCl2· 6H2OSangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100288
Sistema de miógrafo múltiple Danish Myo Technology, Aarhus, Dinamarca620M
NaClSangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100241
NaHCO3Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA100865
Alambres de aceroDanish Myo Technology, Aarhus, Dinamarca400447
U46619Sigma, EE. UU.D8174

Referencias

  1. Malakar, A. K., et al. A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).
  2. Murray, C., et al.

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Reimpresiones y permisos

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