Un modelo experimental de infarto de miocardio para el estudio de la reparación y remodelación cardíaca en ratones knockout

Resumen

En este trabajo describimos un modelo experimental de infarto de miocardio, un procedimiento de ecocardiografía para estudiar el remodelado y la función cardíaca, y procedimientos para cuantificar la fibrosis y la hipertrofia en secciones teñidas con rojo picrosirius y rodamina, así como el tamaño del infarto y el índice de expansión en cortes teñidos con tricrómico de Masson.

Resumen

Las enfermedades cardiovasculares son la causa más prevalente de muerte en los países occidentales, siendo el infarto agudo de miocardio (IM) la forma más prevalente. En este trabajo se describe un protocolo para estudiar el papel de la galectina 3 (Gal-3) en la evolución temporal de la cicatrización y remodelación cardíaca en un modelo animal experimental de infarto de miocardio.

Los procedimientos descritos incluyen un modelo experimental de IM con ligadura coronaria permanente en ratones machos C57BL/6J (control) y Gal-3 knockout (KO), un procedimiento de ecocardiografía para estudiar el remodelado cardíaco y la función sistólica in vivo, una evaluación histológica de la fibrosis miocárdica intersticial con cortes teñidos con rojo picrosirius y teñidos con lectina conjugada con rodamina para estudiar la hipertrofia de miocitos por el área de la sección transversal (MCSA), y la cuantificación del tamaño del infarto y del remodelado cardíaco (adelgazamiento de la cicatriz, grosor del tabique e índice de expansión) mediante planimetría en cortes teñidos con tricrómico de Masson y cloruro de trifenil tetrazolio. Gal-3 Los ratones KO con infarto de miocardio mostraron una remodelación cardíaca interrumpida y un aumento en la relación de adelgazamiento de la cicatriz y el índice de expansión. Al inicio del infarto de miocardio, la función miocárdica y el remodelado cardíaco también se vieron gravemente afectados. A las 4 semanas después del infarto de miocardio, la evolución natural de la fibrosis en ratones Gal-3 KO infartados también se vio afectada.

En resumen, el modelo experimental de IM es un modelo adecuado para estudiar la evolución temporal de la reparación y remodelación cardíaca en ratones con deleción genética de Gal-3 y otros modelos animales. La falta de Gal-3 afecta la dinámica de la reparación cardíaca e interrumpe la evolución de la remodelación y la función cardíaca después del infarto de miocardio.

Introducción

El infarto de miocardio (IM) es la forma más prevalente de enfermedad cardiovascular. Después del infarto de miocardio, el miocardio experimenta cambios morfológicos y funcionales en serie, incluyendo la curación de la zona del infarto de miocardio, el remodelado ventricular (VR) y la disfunción miocárdica¹. La cicatrización del infarto de miocardio es un proceso dinámico y bien orquestado asociado a una profunda infiltración inflamatoria que termina en la formación de una cicatriz fibrótica ^2,3. El modelo experimental de IM en ratones se utiliza actual....

Protocolo

NOTA: Todos los experimentos descritos en este protocolo fueron aprobados por el Comité de Cuidado e Investigación Animal de la Universidad de Buenos Aires (CICUAL), en línea con el Comité para la Actualización de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio del Consejo Nacional de Investigaciones (EE.UU.)¹³. Para los experimentos, se utilizaron ratones machos C57BL/6J y Gal-3 KO de la misma edad (8-10 semanas de edad) con un peso de 30-35 g, que permiten una mejor manipulación para la cirugía. Permitir que los animales tengan acceso a agua y comida ad libitum. Los ratones Gal-....

Resultados

Supervivencia post-infarto de miocardio y necropsia
Durante 4 semanas de seguimiento, el 17% (4/23) de los ratones C57 frente al 40% (8/20) de los ratones Gal-3 KO fueron encontrados muertos. Se realizó la necropsia; los ratones Gal-3 KO muertos mostraron corazones más grandes que los ratones C57 (Figura 1), y el 38% de los ratones C57 en comparación con el 32% de los ratones Gal-3 KO tenían coágulos torácicos macroscópicos que se asociaron dire.......

Discusión

El modelo experimental de infarto de miocardio por ligadura permanente de la arteria coronaria se utiliza para estudiar una amplia variedad de mecanismos fisiopatológicos de reparación y remodelación cardíaca ^5,14,17. En este artículo se resumen los diferentes métodos utilizados actualmente en este laboratorio para estudiar la evolución temporal de la reparación cardíaca y sus efectos en el remo.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
8-0 sutura de seda	Ratones Ethicon
C57BL/6J	Departamento de Biorrecursos de la Facultad de Veterinaria de la Universidad de Buenos Aires, Argentina
Pinzas
Hardvard 386 respirador	Hardvard empresa Hardvard La
almohadilla			mantiene la temperatura del animal durante la cirugía
Imagen Pro-Plus 6.0	Software	de análisis de imágenes
Ketamina	Holiday
Masson Trichrome	BIOPUR
Picrosirius rojo	BIOPUR
Retractores
Ventilador para roedores modelo 683	Aparato Harvard Ventilador		mecánico
Tijeras
Lupa estereoscópica	Máquina Arcano
Vivid 7 (General Electric Medical Systems, Horten, Noruega)	General Electric		Cualquier software de seguimiento se puede utilizar con este protocolo
WGA no. RL-1022, Laboratorios de vectores, Burlingame	Laboratorios de vectores
Xilacina	Pro-Ser

térmica de cibernética de medios