El presente protocolo describe un método simple y eficiente para la recolección dinámica y en tiempo real de sangre de corazón de rata utilizando la técnica de microdiálisis.
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Artículo de método
Extracción dinámica continua de sangre del corazón de rata mediante una técnica de microdiálisis no invasiva
En este artículo
Resumen
Resumen
El análisis dinámico de los componentes sanguíneos es de gran importancia para comprender las enfermedades cardiovasculares y sus enfermedades relacionadas, como el infarto de miocardio, la arritmia, la aterosclerosis, el edema pulmonar cardiogénico, la embolia pulmonar y la embolia cerebral. Al mismo tiempo, es urgente romper la técnica de muestreo continuo de sangre cardíaca en ratas vivas para evaluar la efectividad de la terapia de medicina étnica distintiva. En este estudio, se implantó una sonda de microdiálisis sanguínea en la vena yugular derecha de ratas en un procedimiento quirúrgico preciso y no invasivo. Luego se recolectaron muestras de sangre cardíaca a una velocidad de 2.87 nL / min a 2.98 ml / min conectándose a un sistema de recolección de muestras de microdiálisis en línea. Aún más trascendental, las muestras de sangre adquiridas pueden almacenarse temporalmente en contenedores de microdiálisis a 4 °C. El programa de recolección continua de sangre en línea basado en microdiálisis de corazón de rata ha garantizado en gran medida la calidad de las muestras de sangre, avanzando y vigorizando la racionalidad científica de la investigación sobre enfermedades cardiovasculares sistémicas y evaluando la terapia de etnomedicina desde la perspectiva de la hematología.
Introducción
Con la aceleración del ritmo de vida y el aumento de la presión psicológica, las enfermedades cardiovasculares (ECV) tienden a ocurrir en personas jóvenes, de mediana edad y ancianos 1,2. La morbilidad y mortalidad de las ECV son altas, con características de inicio agudo, progresión rápida y evolución prolongada de la enfermedad, que afectan seriamente la seguridad de los pacientes3. La aparición de ECV puede estar estrechamente relacionada con los cambios en algunos componentes de la sangre, como el colesterol, los lípidos séricos, la glucosa en sangre, las enzimas miocárdicas y
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Protocolo
El protocolo animal ha sido aprobado por el Comité Administrativo de la Universidad de Medicina Tradicional China de Chengdu (Número de registro: 2021-11). Las ratas macho Sprague Dawley (SD) libres de patógenos especificados (8-10 semanas, 260-300 g) se criaron en jaulas de ventilación independientes, manteniendo el ambiente de laboratorio a 22 ° C y 65% de humedad relativa, y se utilizaron para el presente estudio. Los animales fueron obtenidos de una fuente comercial (ver Tabla de Materiales). Todas las ratas se habituaron a la alimentación adaptativa durante 1 semana con agua y dieta gratis durante el período.
1. ....
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Resultados
El presente protocolo permitió obtener la sangre cardíaca de ratas conscientes de acuerdo con los parámetros de muestreo establecidos en el equipo de microdiálisis. Las muestras de sangre normales deben ser de color rojo brillante, mientras que los animales con hipoxia, coágulos sanguíneos potenciales o enfermedad anémica pueden tener púrpura oscuro o rojo oscuro. Las muestras obtenidas mediante la técnica de microdiálisis sanguínea son incoloras, transparentes y transparentes, que pueden utilizarse para analizar los mar.......
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Discusión
Las ECV son una enfermedad crónica común en las clínicas con una incidencia gradualmente creciente en China, y la edad de inicio tiende a ser más joven, causando la preocupación y el pánico de la mayoría de los pacientes20,21. Siendo la primera causa de muerte en el mundo, las ECV pueden inducir infarto cerebral y otras enfermedades de alta mortalidad, amenazando seriamente la vida saludable de los pacientes22. Las ECV, incluyendo cardiopa.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (82104533), la Fundación de Ciencias Postdoctorales de China (2020M683273), el Departamento de Ciencia y Tecnología de la provincia de Sichuan (2021YJ0175) y el proyecto clave de investigación y desarrollo del Plan Provincial de Ciencia y Tecnología de Sichuan (2022YFS0438). Mientras tanto, los autores desean agradecer al Sr. Yuncheng Hong, ingeniero senior de equipos de TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (ciudad de Singapur, Singapur), por la prestación de servicios técnicos para técnicas de microdiálisis.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sistema de anestesia animal | Rayward Life Technology Co., Ltd | R500IE | |
| Mantenedor de temperatura animal | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Sonda de microdiálisis sanguínea | Catéter de microdiálisis CMA AB | T55347 | |
| CMA Microdiálisis AB | T55347 | ||
| Citrato | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 251275 | |
| Afeitadora eléctrica | Rayward Life Technology Co., Ltd | CP-5200 | |
| Tubo Fep | CMA Microdiálisis AB 3409501 | ||
| Tanque de movimiento libre para animales | Microdiálisis CMA AB | CMA120 | |
| Glucosa | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | G8270 | |
| Pinzas hemostáticas | Rayward Life Technology Co., Ltd | F21020-16 | |
| Isofluran | Rayward Life Technology Co., Ltd | R510-22 | |
| Micro tijeras | Beyotime Biotechnology Co., Ltd | FS221 | |
| Microdiálisis tubo de recolección | CMA Microdiálisis AB | 7431100 | |
| Colector de microdiális | CMA Microdiálisis AB CMA4004 | ||
| Soporte de microdiálisis in vitro | CMA Microdiálisis AB | CMA130 | |
| Bomba de microinyección de microdiálisis | CMA Microdiálisis AB | 788130 | |
| Jeringa de microdiálisis (1,0 mL) | CMA Microdialysis AB 8309020 | ||
| Adaptador de tubo de microdiálisis | CMA Microdiálisis AB | 3409500 | |
| Membrana filtrante microporosa | Merck Millipore Ltd. | ||
| Suturas quirúrgicas no absorbibles | Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd | S19004 | |
| Mesa de operaciones | Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd | 30153 | |
| Pinzas oftálmicas | Rayward Life Technology Co., Ltd | F12016-15 | |
| Citrato de sodio | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 1613859 | |
| Sprague Dawley (SD) ratas | Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd | SYXK( )2019-049 | |
| Tijeras quirúrgicas | Rayward Life Technology Co., Ltd | S14014-15 | |
| Tijeras quirúrgicas | Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd | BY-103 | |
| Aguja de jeringa | CMA Microdiálisis AB | T55347 | |
| Limpiador ultrasónico | Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd | KMH1-240W8101 |
Referencias
- van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366(2022).
- Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L.
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Reimpresiones y permisos
