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Artículo de método

Tomografía de coherencia óptica guiada por imágenes para evaluar los cambios estructurales en las retinas de los roedores

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DOI:

10.3791/64783

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10 de febrero de 2023

* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

El protocolo presentado aquí detalla los procedimientos de recopilación y análisis de datos para la tomografía de coherencia óptica guiada por imágenes (OCT) y demuestra su aplicación en múltiples modelos de enfermedades oculares en roedores.

Resumen

Las enfermedades oculares, como la degeneración macular asociada a la edad, el glaucoma, la retinosis pigmentaria y la uveítis, siempre van acompañadas de cambios estructurales en la retina. Estas enfermedades que afectan al fondo de ojo siempre exhiben anomalías típicas en ciertos tipos de células de la retina, incluidas las células fotorreceptoras, las células ganglionares de la retina, las células de los vasos sanguíneos de la retina y las células de las células vasculares coroideas. Tanto para la práctica clínica como para la investigación básica se requieren técnicas de imagen no invasivas, altamente eficientes y adaptables. La tomografía de coherencia óptica (OCT) guiada por imágenes cumple con estos requisitos porque combina la fotografía de fondo de ojo y la OCT de alta resolución, proporcionando un diagnóstico preciso de lesiones diminutas, así como cambios importantes en la arquitectura de la retina. Este estudio detalla los procedimientos de recopilación y análisis de datos para la OCT guiada por imágenes y demuestra su aplicación en modelos de roedores de neovascularización coroidea (CNV), aplastamiento del nervio óptico (ONC), degeneración de la retina inducida por luz y uveítis autoinmune experimental (EAU). Esta técnica ayuda a los investigadores en el campo ocular a identificar los cambios estructurales de la retina de los roedores de manera conveniente, confiable y tratable.

Introducción

Las enfermedades oculares que afectan al fondo de ojo siempre presentan anomalías típicas en ciertos tipos de células de la retina, como las células fotorreceptoras, las células ganglionares de la retina, las células de los vasos sanguíneos de la retina y las células de los vasos sanguíneos coroideos, que posteriormente pueden influir en la agudeza visual de los pacientes1. Para evitar una discapacidad visual irreversible, se requieren diagnósticos oportunos y tratamientos adecuados1. La tomografía de coherencia óptica (OCT) ha sido ampliamente utilizada en la clínica para evaluar una va....

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Protocolo

Todos los procedimientos con animales se ajustaron a la declaración de la Asociación para la Investigación de la Visión y la Oftalmología sobre el uso de animales en la investigación oftálmica y de la visión y fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Médica de Wenzhou (WMU). Las ratas y ratones tuvieron libre acceso a agua y alimentos con una intensidad de luz ambiental de 18 lux en un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas.

1. Preparación de los modelos animales oculares

  1. Modelo de neovascularización coroidea (NVC) inducida por láse....

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Resultados

La OCT guiada por imágenes se puede utilizar para monitorear el desarrollo del punto láser en la neovascularización coroidea (CNV) inducida por láser en ratones. Como se muestra en la Figura 1, los vasos sanguíneos del recién nacido atravesaron la membrana de Bruch, así como la capa de epitelio pigmentario de la retina (EPR) y formaron una cicatriz fibrótica después de la lesión por láser11,12. Esta mancha de la lesión se puede captu.......

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Discusión

Este protocolo proporciona instrucciones para la recolección de imágenes y la medición del espesor de la OCT guiada por imágenes. Al demostrar los cuatro modelos de enfermedades oculares más populares en roedores, los investigadores descubrieron que la OCT guiada por imágenes proporcionó un excelente rendimiento en el examen de alteraciones estructurales drásticas de la retina. De hecho, con las imágenes de alta resolución, también se pueden encontrar fácilmente lesiones diminutas en las.......

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Divulgaciones

Ninguno de los autores tiene ningún conflicto de intereses que revelar.

Agradecimientos

Los autores agradecen a los miembros del Laboratorio Estatal Clave de Oftalmología, Optometría y Ciencias de la Visión por su apoyo técnico y comentarios útiles sobre el manuscrito. Este trabajo fue apoyado por subvenciones de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (82101169, 81800857, 81870690), la Fundación Provincial de Ciencias Naturales de Zhejiang de China (LGD22H120001, LTGD23H120001, LTGC23H120001), el Programa de la Oficina de Ciencia y Tecnología de Wenzhou de China (Y20211159), el Proyecto de Apoyo a la Ciencia y la Tecnología de Guizhou (Qiankehezhicheng [2020] 4Y146) y el Proyecto del Laboratorio Estatal Cla....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Ratón BALB/cBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., LtdPreparaciones de modelos animales
C57BL/6JNifdcratón Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., LtdPreparaciones de modelos animales
Gel de ojos de carbómeroFabrik GmbH Filial de Bausch & LombHumedecer la córnea 
Freund completo s adyuvanteSigma F5881Experimento EAU
Plataforma experimentalPhoenix Technology GroupPreparaciones de modelos animales
hIRBP161-180Shanghai Sangon Biological Engineering Technology & Servicios Co., Ltd.Experimento EAU
KetaminaCeva Sante AnimaleAnestesia general
Caja láserHaag-Streit GroupMerilas 532αPreparaciones de modelos animales
Rata LewisBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., LtdPreparaciones de modelos animales
Mycobacterium Tuberculosis H37RASigma Experimento EAU344289
Phoneix Micron IV con OCT guiado por imagen y láser guiado por imagenPhoenix Technology GroupPreparaciones de modelos animales
Pinzas de tejidoSuzhou Mingren Medical Instrument Co., LtdMR-F101A-5Preparaciones de modelos animales
Tropicamida Fenilefrina ColirioSANTEN OY, JapónDilatación ocular
Tijeras VannasSuzhou Mingren Medical Instrument Co., LtdMR-S121APreparaciones de modelos animales
XilacinaCeva Sante AnimaleAnestesia general

Referencias

  1. Cen, L. -P., et al. Automatic detection of 39 fundus diseases and conditions in retinal photographs using deep neural networks. Nature Communications. 12, 4828(2021).
  2. Kashani, A. H., et al.

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Cambios estructurales retinianosimagen de retina de roedoresfotografía de fondo de ojoneovascularización coroideaaplastamiento del nervio ópticodegeneración retinianauveítis autoinmunecélulas fotorreceptorascélulas ganglionares de la retina

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