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Optimización de la tecnología de procesamiento de aceite de cordero Epimedii folium y prueba de su efecto en el desarrollo embrionario del pez cebra

DOI:

10.3791/65096

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March 17th, 2023

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1Chongqing Academy of Chinese Materia Medica, 2Bioengineering College of Chongqing University

In This Article

Summary

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En este protocolo, la tecnología de procesamiento de aceite de cordero de Epimedii folium (EF) se optimizó aplicando una metodología experimental de superficie de diseño-respuesta de Box-Behnken, y se investigó preliminarmente el efecto de la EF cruda y optimizada extraída en agua en el desarrollo embrionario del pez cebra.

Abstract

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Como medicina tradicional china (MTC), Epimedii folium (EF) tiene una historia en medicina y alimentos que tiene > 2.000 años de antigüedad. Clínicamente, la EF procesada con aceite de cordero se usa a menudo como medicamento. En los últimos años, los informes de riesgos de seguridad y reacciones adversas de productos que utilizan FE como materia prima han aumentado gradualmente. El procesamiento puede mejorar efectivamente la seguridad de la MTC. Según la teoría de la MTC, el procesamiento del aceite de cordero puede reducir la toxicidad de la FE y mejorar su efecto tonificante en los riñones. Sin embargo, hay una falta de investigación sistemática y evaluación de la tecnología de procesamiento de aceite de cordero EF. En este estudio, utilizamos la metodología experimental de superficie de diseño-respuesta de Box-Behnken para optimizar los parámetros clave de la tecnología de procesamiento mediante la evaluación del contenido de múltiples componentes. Los resultados mostraron que la tecnología óptima de procesamiento de aceite de cordero de EF era la siguiente: calentar el aceite de cordero a 120 °C ± 10 °C, agregar el EF crudo, freírlo suavemente a 189 °C ± 10 °C hasta que esté uniformemente brillante, y luego retirarlo y enfriarlo. Por cada 100 kg de EF, se deben usar 15 kg de aceite de cordero. Las toxicidades y teratogenicidades de un extracto acuoso de EF cruda y procesada con aceite de cordero se compararon en un modelo de desarrollo de embriones de pez cebra. Los resultados mostraron que el grupo de hierbas crudas tenía más probabilidades de causar deformidades de pez cebra, y su concentración de EF letal media máxima era menor. En conclusión, la tecnología optimizada de procesamiento de aceite de cordero fue estable y confiable, con buena repetibilidad. A una cierta dosis, el extracto acuoso de EF fue tóxico para el desarrollo de embriones de pez cebra, y la toxicidad fue más fuerte para el medicamento crudo que para el medicamento procesado. Los resultados mostraron que el procesamiento del aceite de cordero redujo la toxicidad de la FE cruda. Estos hallazgos se pueden utilizar para mejorar la calidad, la uniformidad y la seguridad clínica de la FE procesada con aceite de cordero.

Introduction

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Epimedii folium (EF) son las hojas secas de Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim., Epimedium pubescens Maxim., o Epimedium koreanum Nakai. La FE se puede utilizar para tratar la osteoporosis, el síndrome menopáusico, los bultos en los senos, la hipertensión, la enfermedad coronaria y otras enfermedades1. Como medicina tradicional china (MTC), EF tiene una historia en medicina y alimentos de más de 2.000 años. Debido a su bajo precio y notable efecto de tonificación de los riñones, es ampliamente utilizado en medicamentos y alimentos saludables. EF se procesa salteándolo con....

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Protocol

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Todos los experimentos relacionados con animales se llevaron a cabo con la aprobación del Comité de Ética de Experimentos del Instituto de MTC de Chongqing (número de certificado de revisión ética de animales de laboratorio: ZJS2022-03).

1. Determinación de los componentes bioactivos

NOTA: La especie utilizada en esta investigación fue Epimedium sagittatum, y las muestras se recolectaron en el condado de Fengdu, Chongqing. La muestra fue identificada como una parte seca sobre el suelo de E. sagittatum (Sieb. et Zucc.) Máxima. por investigadores del Instituto de Medicina Biológica ....

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Results

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Resultados de la investigación metodológica
Se observó una relación lineal entre la concentración de icariina, EA, EB, EC, BI y áreas pico cromatográficas (ver Tabla 3). Los valores de RSD% (n = 6) de las áreas pico cromatográficas de icariin, EA, EB, EC y BI fueron 0,28%, 1,22%, 0,65%, 1,67% y 1,06%, respectivamente, lo que indica que la precisión de las mediciones de HPLC fue buena. Los valores de RSD% (n = 6) de los contenidos de icariin, EA, EB, EC y BI fueron 1,59%, 1,46%, 1,86%,.......

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Discussion

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Variables independientes y determinación de sus niveles
La tecnología de procesamiento EF solo se describe en la edición 2020 de la Farmacopea China y las especificaciones locales de procesamiento de medicamentos chinos publicadas por 26 provincias, municipios y regiones autónomas de todo el país1. La descripción implica los siguientes pasos: tomar aceite de cordero y calentarlo para que se derrita, agregar trozos EF, freír a fuego lento hasta que esté uniforme y brillante, sac.......

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Disclosures

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Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

Acknowledgements

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Este trabajo cuenta con el apoyo del Proyecto Empresarial de Investigación Científica Básica de la Academia de Medicina Tradicional China de Chongqing (Número de proyecto: jbky20200013), el Proyecto de Orientación de Incentivos al Desempeño de las Instituciones de Investigación Científica de Chongqing (Número de proyecto: cstc2021jxjl 130025), y el Proyecto de Construcción de Disciplina Clave de la Comisión Municipal de Salud de Chongqing de Procesamiento de Materia Médica China.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AcetonitriloFisher197164
Baohuoside figure-materials-1 (Bfigure-materials-2 ) Chengdu Manst Biotecnología Co., Ltd.MUST-20042402
Columna cromatográficaWaters CorporationSymmetry C18
prueba8.0.6.1
DetectorWaters Corporation2998
DesintegradorHefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd.S-FS553
Balanza analítica electrónicaMettler-Toledo International Inc.
Epimedin A (EA)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-21112118
Epimedin B (EB)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20080403
Epimedin C (EC)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20080310
EtanolChongqing Chuandong Chemical ( Grupo ) Co., Ltd.
Software GraphpadGraphPad Software Inc., San Diego, CA, EE. UU. 6.02
Cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC)Waters Corporation2695
IcariinChengdu Glip Biotechnology Co., Ltd.
MetanolChongqing Chuandong Chemical (Grupo) Co., Ltd.
Membrana microporosaTianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd.0.22μ m
Aceite de corderoKuoshan Zhiniu Tienda de alimentos frescos20211106
Office Excel software de oficinaMicrosoftOffice Excel 2021
Tamiz de farmacopeaShaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd.R40/3
Máquina de agua puraChongqing Andersen Environmental Protection Equipment Co., Ltd.AT Sro 10A Papel de
filtro cualitativoShanghai Leigu Instrument Co., Ltd.18 cm
Carl Zeiss, Oberkochen, AlemaniaStemi 2000
Limpiador ultrasónicoBranson Ultrasonics (Shanghai) Co.,Ltd.BUG25-12
Pez cebraChina Centro de recursos de pez cebra (CZRC)La cepa
Design Software experto Stat- Ease Inc., Minneapolis, MN Versión de MS205DU201808012109140120171101Microscopio estereoscópico de AB

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Commission. Chinese Pharmacopoeia. Volume I. , China Medical Science and Technology Press. Beijing, China. (2020).
  2. Wang, X. T. Collection of Traditional Chinese Medicine Processing Methods. , Nanchang Science and Technology Press. Jiangxi, China. (1998).
  3. Chen, L. L., Jia, X. B., Jia, D. S.

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Epimedii FoliumMutton Oil ProcessingResponse Surface MethodBox Behnken DesignZebrafish Embryo DevelopmentHPLC AnalysisToxicity AssessmentChinese Medicine PreparationIcariin ContentTeratogenicity Testing

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