Perfusión hepática aislada normomermica porcina

Joris Blondeel; Nicholas Gilbo; Tine Wylin; Veerle Heedfeld; Diethard Monbaliu

doi:10.3791/65336

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Artículo de método

Perfusión hepática aislada normomermica porcina

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DOI:

10.3791/65336

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9 de junio de 2023

Joris Blondeel¹^,² , Nicholas Gilbo¹^,² , Tine Wylin¹ , Veerle Heedfeld¹ , Diethard Monbaliu¹^,²

¹Department of Microbiology, Immunology and Transplantation, Laboratory of Abdominal Transplantation, KU Leuven, ²Department of Abdominal Transplant Surgery and Coordination, University Hospitals Leuven

En este artículo

Resumen

El modelo porcino de máquina de perfusión normotérmica hepática (NMP), descrito aquí, se puede utilizar con éxito para estudiar la NMP como estrategia de preservación, una herramienta para la evaluación de la viabilidad y una plataforma para la reparación de órganos. Tiene un alto valor traslacional, sin embargo, es técnicamente desafiante y requiere mucha mano de obra.

Resumen

Los modelos porcinos de perfusión normotérmica ex situ hepática (NMP) se utilizan cada vez más en la investigación de trasplantes. A diferencia de los roedores, los hígados porcinos son anatómica y fisiológicamente similares a los humanos, con un tamaño de órgano y una composición biliar similares. La NMP preserva el injerto hepático en condiciones casi fisiológicas al recircular una perfusión a base de glóbulos rojos caliente, oxigenada y enriquecida con nutrientes a través de la vasculatura hepática. La NMP se puede utilizar para estudiar la lesión por isquemia-reperfusión, preservar un hígado ex situ antes del trasplante, evaluar la función del hígado antes de la implantación y proporcionar una plataforma para la reparación y regeneración de órganos. Alternativamente, se puede usar NMP con una perfusión a base de sangre total para imitar el trasplante. Sin embargo, este modelo es intensivo en mano de obra, técnicamente desafiante y conlleva un alto costo financiero.

En este modelo de NMP porcino, utilizamos hígados dañados isquémicos calientes (correspondientes a la donación después de la muerte circulatoria). En primer lugar, se inicia la anestesia general con ventilación mecánica, seguida de la inducción de isquemia caliente mediante el pinzamiento de la aorta torácica durante 60 min. Las cánulas insertadas en la aorta abdominal y la vena porta permiten la extracción del hígado con una solución de conservación fría. La sangre expulsada se lava con un protector de células para obtener glóbulos rojos concentrados. Después de la hepatectomía, se insertan cánulas en la vena porta, la arteria hepática y la vena cava infrahepática y se conectan a un circuito de perfusión cerrado preparado con un expansor de plasma y glóbulos rojos. Se incluye un oxigenador de fibra hueca en el circuito y se acopla a un intercambiador de calor para mantener una pO2 de 70-100 mmHg a 38 °C. La NMP se logra mediante un flujo continuo directamente a través de la arteria y a través de un depósito venoso a través de la vena porta. Los caudales, las presiones y los valores de gases en sangre se controlan continuamente. Para evaluar la lesión hepática, se toman muestras de perfusión y tejido en puntos de tiempo predefinidos; La bilis se recoge a través de una cánula en el conducto biliar común.

Introducción

El trasplante de hígado es el único tratamiento definitivo para la insuficiencia hepática terminal; Sin embargo, su éxito se ve limitado por un desequilibrio persistente entre los pacientes en lista de espera y la disponibilidad de órganos de posibles donantes¹. Para aumentar el número de donantes, los criterios de los donantes se han ampliado gradualmente en la última década, incluyendo la edad avanzada del donante, la esteatosis hepática y la donación después de la muerte circulatoria (DCD)^2,3. Durante un procedimiento de DCD, el hígado sufre invariab....