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Artículo de método

Establecimiento de un modelo de ratones con fístula oronasal

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DOI:

10.3791/65578

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8 de septiembre de 2023

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En este artículo

Resumen

Este artículo describe un procedimiento paso a paso para establecer un modelo de ratones con una fístula oronasal. La fístula oronasal se creó mediante el empleo de cauterización oftalmológica calentada para dañar la porción de la línea media del paladar duro, lo que resultó en la formación de una abertura entre las cavidades oral y nasal.

Resumen

Este estudio presenta un método que utiliza cauterización oftalmológica calentada para desarrollar un modelo viable para investigar las fístulas oronasales. Se utilizaron ratones C57BL/6 para establecer el modelo de fístula oronasal (ONF). Para crear el ONF, los ratones fueron anestesiados, inmovilizados y sus paladares duros fueron expuestos. Durante el procedimiento quirúrgico, se indujo una lesión de la mucosa de espesor total de 2,0 x 1,5 mm en la línea media del paladar duro mediante cauterización oftalmológica. Era crucial controlar el tamaño de la ONF y minimizar el sangrado para garantizar el éxito del experimento. La verificación de la efectividad del modelo ONF se llevó a cabo en el 7º día postoperatorio, abarcando tanto evaluaciones anatómicas como funcionales. La presencia del tabique nasal dentro de la cavidad oral y la salida de agua estéril de las fosas nasales tras la inyección en la cavidad oral confirmaron el establecimiento exitoso del modelo de ONF. El modelo demostró una fístula oronasal práctica y exitosa, caracterizada por una baja tasa de mortalidad, cambios significativos de peso y una variación mínima en el tamaño de la FNO. Los estudios futuros pueden considerar la adopción de esta metodología para dilucidar los mecanismos de cicatrización de las heridas del paladar y explorar nuevos tratamientos para las fístulas oronasales.

Introducción

La fístula oronasal (FNO), una abertura anormal entre las cavidades oral y nasal, se manifiesta clínicamente como un defecto en un área estructural desde la apófisis alveolar hasta la úvula, que comúnmente ocurre como una complicación después de la reparación del paladar hendido1. Los pacientes con FNO experimentan reflujo alimentario, trastornos articulares y deterioro de la función velofaríngea, lo que afecta significativamente su calidad de vida 2,3,4. La tasa de FNO postoperatoria oscila entre el 2,4% y el 55% debido a factores como el ancho de la ....

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Protocolo

Todos los procedimientos con animales en este estudio fueron revisados y aprobados por el Comité de Ética de la Escuela de Estomatología de China Occidental de la Universidad de Sichuan. Para el presente estudio se utilizaron ratones adultos C57BL/6 (hembras).

1. Preparación quirúrgica

  1. Reúna los instrumentos quirúrgicos necesarios para el procedimiento: germinador, cauterización oftalmológica, tijeras microquirúrgicas, pinzas microquirúrgicas, jeringas y agujas (26 g x 0,63 pulgadas) (Figura 1A, B) (ver Tabla de materiales).
    NOTA: Antes del procedi....

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Resultados

Para evaluar la viabilidad y estabilidad de este método experimental, se realizó el mismo procedimiento en diez ratones, y se realizaron observaciones sobre la mortalidad, los cambios en el tamaño de la herida, el peso corporal y el análisis histológico. Los ratones fueron sacrificados el día 7.

El procedimiento presentó una baja tasa de mortalidad. La cauterización oftalmológica y el germinador, representados en la Figura 1A-C, f.......

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Discusión

Los investigadores han explorado diversos materiales, fármacos y técnicas novedosas para tratar la FNO 10,11,12,13,14,15,16,17. Con los avances en los procedimientos quirúrgicos, se ha reducido la incidencia y la recurrencia de la FNO. Sin embargo, debido a.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo contó con el apoyo del Programa de Investigación y Desarrollo, el Hospital de Estomatología de China Occidental, la Universidad de Sichuan (RD-02-202107), el Programa de Apoyo a la Ciencia y la Tecnología de la Provincia de Sichuan (2022NSFSC0743) y la subvención de la Fundación de Ciencias Postdoctorales de Sichuan (TB2022005) a H. Huang.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Ciencias de Microscopía Electrónica Germinadora 66118-20 Equipos decalefacción y desinfección
Guantes de látexAllmedo similares
LucesOlympusA1813
MeloxicamMedChemExpressHY-B0261triturado; 5 mg/kg
Instrumentos microquirúrgicos (tijeras y pinzas)Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.M-Y-0087Instrumento quirúrgico
Cauterio oftalmológicoSuqian Wenchong Medical Equipment Co.1.00234E+13Instrumento quirúrgico
Algodón estéril,YanchengBegu Technology Co.o similar
Lámina metálica estérilBiosharpo similar
Hojas estériles3MXH003801129o
similares Paños quirúrgicosYancheng Begu Technology Co.o
jeringasYancheng Begu Technology Co.S-015301o similar
CintaBkmamlabo similar
Dispositivo de mantenimiento de temperaturaAparato Harvard LE-13-2104
Zoletil50Virbac80 mg/kg
similares

Referencias

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.

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