La prueba de seguridad y amenaza social permite una evaluación simultánea del desarrollo de la evitación social como una medida del aprendizaje condicionado aversivo y la capacidad de discriminación de la seguridad y la amenaza social, ambas utilizadas para identificar individuos susceptibles al estrés y resistentes al estrés dentro de un solo grupo de ratones machos crónicamente derrotados socialmente.
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Artículo de método
Una prueba de seguridad y amenaza social descubre fenotipos relacionados con el estrés psicosocial
En este artículo
Resumen
Resumen
El estrés social es una de las principales causas del desarrollo de trastornos mentales. Para mejorar el valor traslacional de los estudios preclínicos, la experiencia de estrés social y su impacto conductual en ratones deben ser comparables a los humanos. La derrota social crónica (DCS) utiliza un tipo de estrés social que implica ataques físicos y amenazas sensoriales para inducir disfunciones mentales que se asemejan a los trastornos afectivos humanos. Para fortalecer el componente psicosocial de la DCS, se aplicó un protocolo de DCS de 10 días en el que se estandarizan las agresiones físicas diarias a tres episodios de 10 s seguidos de una fase sensorial de 24 h. Después de la10ª fase sensorial, el protocolo de CSD es seguido por un ensayo de comportamiento refinado llamado prueba de seguridad y amenaza social (STST). Los ensayos conductuales posteriores al estrés deben determinar cómo y en qué medida el factor de estrés social ha influido en el comportamiento. El STST permite a los ratones machos crónicamente derrotados socialmente interactuar con 2 nuevos individuos machos (objetivos sociales): un objetivo social de la cepa atacante encontrada durante los días de CSD y el otro de una nueva cepa. Ambos se presentan simultáneamente en diferentes compartimentos de un campo de pruebas de tres cámaras. La prueba permite una evaluación simultánea del desarrollo de la evitación social para medir el éxito del aprendizaje aversivo condicionado y la capacidad de discriminación social entre amenazas y seguridad. El desarrollo de la evitación social hacia ambas cepas refleja una respuesta aversiva generalizada y, por lo tanto, una medida de la susceptibilidad al estrés. Mientras tanto, el desarrollo de la evitación social hacia solo la cepa atacante refleja la discriminación entre amenazas y seguridad y, por lo tanto, una medida de la resiliencia al estrés. Por último, la ausencia de evitación social hacia la cepa atacante refleja un deterioro del aprendizaje aversivo condicionado. El protocolo tiene como objetivo refinar los modelos de susceptibilidad al estrés/resiliencia utilizados actualmente en ratones mediante la inclusión de criterios traslacionales, específicamente la discriminación de amenaza-seguridad y la generalización de la respuesta aversiva, para categorizar un solo grupo de animales crónicamente derrotados socialmente en subgrupos resilientes y susceptibles, avanzando eventualmente en futuros enfoques traslacionales.
Introducción
El estrés se define como la alteración de la homeostasis causada por estímulos físicos o psicológicos1. El estrés es un factor de riesgo importante bien conocido para el desarrollo de trastornos mentales como el trastorno de estrés postraumático, la depresión y la ansiedad 2,3. En particular, el estrés social se considera un factor de riesgo importante para el desarrollo de trastornos mentales relacionados con el estrés4. Un tipo de estrés social que ha cobrado especial importancia en la investigación es el estrés de subordinación social5.....
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Protocolo
Todos los procedimientos se llevaron a cabo de conformidad con la Directiva del Consejo de las Comunidades Europeas relativa al cuidado y la utilización de animales para procedimientos experimentales y fueron aprobados por las autoridades locales (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz). La figura 1 representa una línea de tiempo esquemática.
1. Tratamiento
- Animales de interés: Obtener ratones machos C57BL6/J a las 7 semanas de edad y, a su llegada, en una sola casa en una instalación con temperatura y humedad controladas en un ciclo de luz-oscuridad de 12 h (luces encendidas: 8:00; l....
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Resultados
Índice de interacción social como medida de la respuesta aversiva condicionada
Un índice de interacción social ≥1 refleja una mayor interacción social con el objetivo social respectivo en comparación con la exploración de los recintos de malla vacíos. En condiciones basales, definidas aquí como no tener experiencia ni apetitiva ni aversiva con los rasgos característicos de una cepa específica (en este caso, tanto los objetivos sociales para el grupo de control como el objetivo social 129/Sv para el gr.......
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Discusión
El protocolo conductual aquí describe la Prueba de Seguridad y Amenaza Social, utilizada para dividir un solo grupo después del tratamiento con CSD en tres subgrupos diferentes, que sirve como método para investigar la biología subyacente de la susceptibilidad al estrés y la resiliencia y para probar posibles terapias. El contexto biológico y los detalles técnicos deben considerarse cuidadosamente para guiar un diseño experimental exhaustivo.
Las diferentes condiciones de alojamiento pueden al.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Esta investigación cuenta con el apoyo del Centro de Investigación Colaborativa 1193, Subproyecto Z02, financiado por la Fundación Nacional de Investigación de Alemania (SFB1193, Neurobiología de la Resiliencia) y la Fundación Boehringer Ingelheim (subvención del Instituto Leibniz para la Investigación de la Resiliencia y el Fenotipado Individual y el Análisis Automatizado del Comportamiento de Alta Resolución). Nos gustaría agradecer al Dr. Konstantin Radyushkin y a la Sra. Sandra Reichel por su asistencia técnica, así como a la Sra. Hanna Kim por su apoyo en inglés. Las fuentes de financiación no participaron en el diseño del modelo; recopilación, análisis e interpr....
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Arenas | Noldus, Jaula de sociabilidad, Wageningen, Países Bajos | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | Tres cámaras, de forma rectangular con un tamaño total de 60 cm x 40 cm, hechas de paredes acrílicas transparentes y suelos lisos |
| Cámara para grabación de vídeo | Basler AG, Alemania An der Strusbek 60-62 22926 Ahrensburg | ace Classic acA1300-60gc | Si utiliza un programa de detección automática, asegúrese de que las cámaras sean compatibles |
| Objetivo de la cámara | KOWA Kowa Optimed Deutschland GmbH Fichtenstr. 123 40233 Düsseldorf: LMVZ4411 | 1/1.8" 4.4~11mm Varifokal Objektiv | Part-No. 10504 | |
| Programa de detección/Temporizador | Noldus, EthoVision-XT, Wageningen, Países Bajos | https://www.noldus.com/ethovision-xt | La detección se puede lograr de forma manual (utilizando un temporizador o un software para la puntuación manual) o automática |
| Jaulas de alojamiento | ZOONLAB GmbH, Hermannstraß e 6, 44579 Jaulas Castrop-Rauxel | 3010010 | Tipo 2: 265 mm x 205 mm x 140 mm (largo x ancho x alto), es decir, 360 cm² área inferior. Fabricado en policarbonato y polisulfona. Las tapas están hechas de acero inoxidable. Jaulas estándar europeas para hasta 5 ratones (20– 25 g). Esterilizable en autoclave hasta 134 ° |
| Recintos de malla C | Parte del paquete Arena: Noldus, jaula Sociability, Wageningen, Países Bajos | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | Pequeña jaula acrílica o metálica con un diámetro de 100 mm y una altura de 200 mm con aberturas de 10 mm de tamaño. Dos recintos de malla por arena funcionarían, pero es preferible cuatro (ver punto 2.5 en el protocolo) |
| Pared de malla | hecha por ti mismo | N/A | Acrílico o metal, uno para cada jaula. El tamaño depende de las jaulas utilizadas. Las paredes no deben permitir que los dos animales tengan un contacto físico |
| Objetivos sociales: Ratones de las cepas CD-1 y 129/Sv; criadores machos retirados | Ratones proporcionados por Charles River: Nombre de la cepa: CD-1® Ratón IGS 129S2/SvPasCrl | Crl:CD1(ICR); 129S2/SvPasCrl | CD-1 y 129/Sv reproductores machos jubilados, de una sola casa, congéneres nuevos (desconocidos) de los animales de interés. Si no se dispone de reproductores machos retirados, bastarían con machos de más de 1 año de ambas cepas |
Referencias
- Hyman, S. E. How mice cope with stressful social situations. Cell. 131 (2), 232-234 (2007).
- Kessler, R. C. The effects of stressful life events on depression. Annual Review of Psychology. 48 (1), 191-214 (1997).
- Vos, T., et al.
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Reimpresiones y permisos
