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Artículo de método

Modelo de isquemia-reperfusión renal bilateral para la lesión renal aguda en ratones

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DOI:

10.3791/65838

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2 de febrero de 2024

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* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

El modelo de lesión por isquemia-reperfusión (IRI) se puede utilizar en diferentes etapas del desarrollo de la lesión renal aguda (IRA), especialmente durante la progresión de la LRA a la enfermedad renal crónica (ERC). Aquí, describimos el procedimiento para el desarrollo del modelo IRI en ratones a través de un abordaje transabdominal, pinzando pedículos renales a través de un clip vascular para inducir lesión isquémica.

Resumen

La lesión renal aguda (IRA) se define como un rápido deterioro de la función renal, en el que la disfunción renal persistente progresa gradualmente a enfermedad renal crónica (ERC) debido a la pérdida irreversible de nefronas y su reparación desadaptativa. En los últimos años, la incidencia de LRA ha ido en aumento en diversas etiologías, incluyendo la depleción de volumen, la sepsis, la nefrotoxicidad, la lesión muscular y el traumatismo mayor, en el que la lesión por isquemia-reperfusión (IRI) representa la mayoría de los episodios. El desarrollo del modelo IRI en ratones es inducido por el pinzamiento quirúrgico de los pedículos renales, lo que proporciona herramientas potentes y controlables para los modelos preclínicos de LRA. Es importante destacar que el modelo IRI se despliega en diferentes etapas del desarrollo de AKI, especialmente en los procesos de AKI a CKD. A pesar de que el modelo IRI está ampliamente practicado en muchos laboratorios, una serie de variables siguen influyendo en los resultados de este modelo. Aquí, describimos el procedimiento de desarrollo del modelo IRI para proporcionar un método repetible y confiable para que los investigadores exploren la patogénesis subyacente en el desarrollo de LRA y la progresión de LRA a ERC.

Introducción

La lesión renal aguda (IRA) es un síndrome clínico grave con una morbilidad y mortalidad significativas, definida como un aumento de la creatinina sérica de ≥ 0,3 mg/dl (26,5 μM/l) en 48 h o un aumento de la creatinina sérica hasta ≥ 1,5 veces el basal en un plazo de 7 días, o un volumen de orina < 0,5 mL/kg/h durante 6 h1, 2,3. A pesar de décadas de investigación, no existe una terapia eficaz para la LRA que alivie el daño renal o acelere la recuperación renal, y una proporción considerable de pacientes con LRA progresa a enfermedad renal cr....

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Protocolo

Se utilizaron ratones machos C57BL/6J de 8 semanas de edad y 25 g de peso para establecer el modelo de LRA mediante isquemia-reperfusión bilateral. De acuerdo con estudios previos, mantenemos la temperatura corporal en torno a 36,5 °C-37 °C, y la duración de la isquemia renal es de 30 min en la cirugía IRI12,13. Se necesitaron un total de 6 ratones para cada grupo, y los ratones operados simuladamente sirvieron como controles. Los experimentos con animales en este estudio han sido aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Z....

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Resultados

Estado del riñón durante la cirugía

La característica de la isquemia exitosa es que el riñón cambia gradualmente de rojo a púrpura oscuro en 1-2 minutos, y la reperfusión exitosa se caracteriza por el cambio gradual del riñón de púrpura oscuro a rojo en 1-2 minutos.

Histología del riñón después de la cirugía

La HE y la tinción de Schiff con ácido peryódico (PAS) son las formas directas de verificar la les.......

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Discusión

En este trabajo hemos realizado un procedimiento detallado sobre el modelo de IRI renal, destacando posteriormente que es un modelo robusto para la progresión de LRA e LRA a ERC. Además, demostramos el impacto de los dos criterios principales de la lesión renal, incluida la histología y la función renal.

Es necesario enfatizar varios puntos clave en los procedimientos quirúrgicos para un modelo repetible y confiable. Para la cirugía abdominal, se recomienda un.......

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Divulgaciones

Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

Agradecimientos

Expresamos nuestro agradecimiento a todos los participantes por su colaboración en el presente estudio. Este estudio contó con el apoyo financiero de la Fundación Provincial de Ciencias Naturales de Zhejiang de China (LZ22H050001) y el programa provincial de Zhejiang para el cultivo de talentos innovadores de alto nivel en salud para Weiqiang Lin.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Cortapelos de animalesFEIYUBIO19-7002
Jeringas de 1 mlLongreenSR60061
EtanolMacklin E885996
gasaFEIYUBIO19-5022
Sistema de monitor homeotérmicoWarmmate40 x 50
PortaagujasDKBTCZQ-00160
EsparcidorRWDR22029-03
Suero fisiológico estérilBiosharpBL158A Tijeras
de tejidoDKBTDC-YKJ1002
Pinzas de tejidoDKBTDK079904
Pinza vascularFine Science Tools18055-02
Sutura de vicrylShanghai Jinhuan4 -0 

Referencias

  1. Al-Jaghbeer, M., Dealmeida, D., Bilderback, A., Ambrosino, R., Kellum, J. A. Clinical decision support for in-hospital AKI. J Am Soc Nephrol. 29 (2), 654-660 (2018).
  2. Kellum, J. A., Lameire, N. KDIGO AKI Guideline Work Group. Diagnosis, evaluat....

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