Procedimiento de operación y precauciones de la terapia con aguja de fuego de Lingnan en ratas modelo de osteoporosis

Resumen

En este trabajo se presenta un protocolo para la aplicación de la terapia con agujas de fuego de Lingnan en la intervención de ratas modelo con osteoporosis.

Resumen

En comparación con la terapia con agujas filiformes, la terapia con agujas de fuego tiene tanto la estimulación de las agujas como el efecto de calentamiento del calor, lo que la hace tener efectos inesperados en algunas enfermedades crónicas e incurables. La osteoporosis (OP) tiene una alta incidencia en mujeres posmenopáusicas y hombres de mediana edad y ancianos, y el ciclo de tratamiento es largo. Según la Medicina Tradicional China (MTC), la terapia con agujas de fuego Lingnan ha demostrado potencial en el tratamiento de la osteoporosis. Sin embargo, todavía queda un largo camino por recorrer antes de que pueda ser ampliamente utilizado. Este artículo se centra en la aplicación de la terapia con agujas de fuego de Lingnan en la intervención de OP en ratas. Cubre la selección de herramientas de aguja, la selección del punto de acupuntura, el posicionamiento de los cuerpos de las ratas y los métodos de fijación. También describimos los pasos y precauciones que se deben tomar durante y después de punción con agujas de fuego. El experimento se realizó con tres grupos: un grupo normal, un grupo modelo y un grupo de agujas de fuego, cada uno con 10 ratas. Las ratas del grupo de agujas de fuego fueron tratadas con intervención de agujas de fuego durante seis sesiones. Una vez finalizado el periodo de intervención, se recogieron muestras femorales y se realizaron microtomografías computarizadas. Los resultados sugieren que la punción ignífuga puede mejorar la morfología ósea y la densidad mineral en ratas OP. Esta información puede servir como base metodológica para llevar a cabo investigaciones básicas sobre la terapia con agujas de fuego.

Introducción

La medicina china cree que factores como el clima y el medio ambiente pueden afectar el físico de una persona, lo que a su vez afecta la aparición y el desarrollo de enfermedades. La región de Lingnan de China, que incluye principalmente Guangdong, Guangxi y la isla de Hainan, se encuentra en la región de clima monzónico tropical. Como resultado, las personas que viven en esta región durante mucho tiempo son propensas a una forma de deficiencia de bazo. En algunos casos, se disemina al riñón y al hígado, lo que lleva a la prevalencia de osteoporosis¹. El bazo y el estómago transportan y absorben el agua y los granos, que son la fuente de qi y bioquímica de la sangre, mientras que el hígado ayuda a mantener las médulas. Por lo tanto, la nutrición ósea se basa en el suministro del bazo, el estómago y el hígado. En la medicina china, el riñón es capaz de generar médula y fortalecer los huesos, y su vitalidad afecta directamente la fuerza y la función de los huesos. Por lo tanto, la insuficiencia renal está directamente relacionada con la osteoporosis. Según la medicina tradicional china, la deficiencia hepática (Gan)-riñón (Shen) y la falta de esencia (Jing) son las causas subyacentes. En algunos casos, la desnutrición puede ocurrir debido a una deficiencia del bazo (Pi) y del estómago (Wei) o a un desequilibrio de ambos. Es decir, la deficiencia del hígado (Gan), los riñones (Shen), el bazo (Pi) y el estómago (Wei) son las causas principales, mientras que el qi externo (Xie qi) bloquea los meridianos y daña los huesos y los músculos. Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), la OP es una condición médica caracterizada por una baja masa ósea y deterioro de los tejidos², lo que constituye una grave preocupación para las personas mayores. La selección de las intervenciones adecuadas es crucial para la prevención y el tratamiento de la osteoporosis.

Los acupunturistas modernos han desarrollado una característica única de la terapia con punción de fuego al combinar el clima de Lingnan y las características físicas de^{la gente} Lingnan. La terapia con agujas de fuego es un tipo de método de tratamiento en el que se queman agujas especiales de color rojo y se perforan rápidamente en partes específicas o puntos de acupuntura del cuerpo humano para tratar diversas dolencias. Este método es ampliamente utilizado en enfermedades de la piel, enfermedades musculoesqueléticas y articulares, enfermedades neurológicas y otras enfermedades sistémicas y muestra buena eficacia⁴. El tratamiento de la osteoporosis con agujas de fuego se ha utilizado en las clínicas durante mucho tiempo y tiene un mejor efecto curativo que la simple acupuntura o la administración oral de la medicina tradicional china ^5,6,7. La terapia con agujas de fuego de Lingnan integra acupuntura, agujas de tres filos y moxibustión cicatricial. Puede mejorar el qi y la circulación sanguínea en los meridianos mientras calienta el riñón. Este tratamiento puede tratar tanto la estasis sanguínea como la deficiencia renal (Shen), que contribuyen a la patogénesis de la OP en la medicina tradicional china. Además, tiene las ventajas de ser de bajo costo, tener efectos rápidos, un período de tratamiento corto y ser seguro. Sin embargo, hay una falta de investigación sobre su mecanismo. Este artículo presenta un procedimiento específico de la aguja de fuego de Lingnan en ratas modelo con osteoporosis y proporciona una base metodológica para llevar a cabo la investigación básica relacionada.

Protocolo

Todos los experimentos se llevaron a cabo siguiendo la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio de los Institutos Nacionales de Salud y fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Medicina Tradicional China de Hubei. Para la prueba se utilizaron ratas hembras adultas de Sprague-Dawley (SD), con un peso de 220 ± 20 g. Todas las ratas se mantuvieron en un ciclo de luz/oscuridad de 12 h a 23 ± 1 °C y 40%-50% de humedad, con libre acceso a comida y agua.

1. Preparación preoperatoria

1. Diseño de grupos
   1. Después de genotipificar 30 ratas hembras de 3 meses de edad, divídelas aleatoriamente en tres grupos (n = 10 en cada grupo): el grupo normal, el grupo modelo y el grupo de la aguja de fuego. Trate a las ratas en el grupo de agujas de fuego con intervención de agujas de fuego 1 vez al día durante 6 sesiones, con 1 día de descanso entre sesiones.
      NOTA: El grupo normal y el grupo modelo suspendieron la rata atada con un abrigo seguro de acuerdo con la misma frecuencia y la misma duración que el grupo de aguja de fuego, pero sin el tratamiento de aguja de fuego.
2. Preparación de un modelo de osteoporosis en ratas
   1. Para las ratas en el grupo modelo y en el grupo de aguja de fuego, se extirparon quirúrgicamente los ovarios para establecer un modelo de osteoporosis como se describe en ^8,9,10.
      1. Para la ovariectomía, administrar anestesia mediante inyección intraperitoneal de pentobarbital sódico al 2% (0,2 mL/100 g) antes de la operación, y considerar la anestesia exitosa cuando los animales no responden en un plano quirúrgico de anestesia basado en la falta de respuesta de una prueba de pinzamiento del dedo del pie. Use ungüento veterinario en los ojos para prevenir la sequedad mientras está bajo anestesia. Inyectar buprenorfina (0,05 mg/kg) por vía subcutánea como analgésico antes de la cirugía. Mantener las condiciones asépticas durante la operación.
         NOTA: Si la cirugía no se ha completado y la rata muestra signos de reanimación, la inyección intraperitoneal de solución sódica de pentobarbital al 2% puede suplementarse temporal y adecuadamente, y cada dosis suplementaria no excederá el 20% de la cantidad total inyectada.
      2. Después de la cirugía, coloque las ratas en una almohadilla térmica para animales pequeños y ajuste la temperatura a 32 °C. No deje a las ratas desatendidas hasta que recuperen la conciencia y puedan gatear libremente. No los devuelva a la compañía de otros animales hasta que se hayan recuperado por completo.
      3. Cuando las ratas hayan revivido, verifique que las suturas estén íntegras y vuelva a colocarlas en la jaula. Inyectar a todas las ratas por vía intramuscular penicilina sódica (50.000 U al día, durante 3 días) e inyectar por vía intraperitoneal 0,1 mL de solución de diclofenaco sódico al 0,05% (al día, durante 3 días) para prevenir la infección y acelerar la cicatrización ^9,10.
   2. Observe el ciclo estral de acuerdo con el frotis de células exfoliadas vaginales de ratas hembras como se describe en¹¹. Si el ciclo es desordenado, el modelo se establece con éxito¹¹.
      NOTA: Las ratas tardan aproximadamente de 8 a 12 semanas en desarrollar osteoporosis después de la ovariectomía.
3. Selección de herramientas de aguja
   1. Compre agujas de fuego de los fabricantes de dispositivos médicos. Asegúrese de que las herramientas de aguja estén hechas de aleación de tungsteno y manganeso, que sea resistente a la temperatura, no sea maleable, no sea fácil de deformar y se caliente uniformemente. La aguja de fuego tiene la forma de una aguja de filamento. Asegúrese de que la aguja sea gruesa, que la punta esté afilada y recta, y que el mango esté envuelto con alambre de cobre, que es aislante del calor y no quema las manos.
   2. Elija una aguja de fuego de una sola cabeza con un tamaño de 0,40 mm x 13 mm porque las ratas son pequeñas. Compruebe si la aguja de fuego tiene púas y grietas.
      NOTA: En la práctica clínica, la mayoría de las agujas de fuego utilizadas son las desarrolladas por He Puren, maestro médico nacional¹². Con base en esto, Lin Guohua creó la Aguja de Fuego de Cabeza Larga Lingnan y la Aguja de Fuego de Tres Cabezas Lingnan¹³. Elija diferentes tamaños de agujas de fuego según la necesidad del experimento.
4. Selección y posicionamiento de los puntos de acupuntura
   1. De acuerdo con los datos y la literatura relevantes, seleccione puntos de acupuntura para el tratamiento de la osteoporosis posmenopáusica.
      NOTA: Los puntos de acupuntura más utilizados son, en orden de frecuencia, Shenshu (BL 23), Zusanli (ST 36), Pishu (BL 20), Xuanzhong (GB 39) y Dazhu (BL 11)^14,15. En la investigación básica sobre la intervención de la acupuntura para la osteoporosis en ratas modelo deovulatorias, los puntos de acupuntura más utilizados son Shenshu (BL 23), Sanyinjiao (SP 6), Guanyuan (CV 4) y Zusanli (ST 36)16,17,18.
   2. Determine los puntos de acupuntura seleccionados para este experimento. Teniendo en cuenta los puntos de acupuntura seleccionados en estudios previos 14,15,16,17,18 y la patogenia de la osteoporosis, se seleccionaron cuatro puntos de acupuntura, a saber, Shenshu (BL 23), Pishu (BL 20), Zusanli (ST 36) y Sanyinjiao (SP 6), para este estudio. Estos corresponden al meridiano de la vejiga, el meridiano de Du, el meridiano del bazo y el meridiano del riñón.
      NOTA: Está prohibido el uso de agujas de fuego en partes con grandes vasos y troncos nerviosos.
   3. Afeita el sitio de acupuntura con una maquinilla eléctrica para mascotas antes de colocarla para exponer el punto de acupuntura.
   4. La ubicación de los puntos de acupuntura se refiere a los nombres y la ubicación de los puntos de acupuntura comúnmente utilizados en¹⁹. Localice los puntos de acupuntura de la siguiente manera: el Shenshu (BL 23) se encuentra en los dos lados inferiores de la segunda vértebra lumbar, a 6 mm de la línea dorsal media; el Pishu (BL 20) se encuentra entre las costillas en los dos lados inferiores de la^12ª vértebra torácica, a 6 mm de la línea dorsal media; el Zusanli (ST 36) se localiza en la cara posterior y lateral de la rodilla, a unos 3 mm por debajo de la pequeña cabeza del peroné; y Sanyinjiao (SP 6) se encuentra a unos 10 mm en línea recta desde la punta del tobillo interno de la extremidad trasera.
   5. Márcalos con un rotulador a base de aceite después de ubicar los puntos.
5. Método de sujeción de ratas
   NOTA: Con el fin de reducir el estrés durante la inmovilización y el tratamiento de las ratas, se eligieron como método de inmovilización las ratas suspendidas atadas con una capa^{de seguridad 20,21}. El método de suspensión de pelaje de rata tiene las siguientes ventajas: En primer lugar, aprovecha al máximo el hábito de la rata de preferir un ambiente oscuro y reduce la reacción de estrés de la rata durante la fijación. En segundo lugar, las ratas suspendidas son más silenciosas y cooperativas durante todo el proceso de tratamiento con agujas ignífugas debido a la falta de puntos de fuerza en sus extremidades y dedos de los pies. En tercer lugar, los puntos de acupuntura en la espalda y las extremidades de las ratas estaban lo suficientemente expuestos como para facilitar el tratamiento. Un solo tratamiento requiere sujetar a la rata durante 5-10 minutos. Cuando están seguras en el pelaje, las ratas no luchan en la sujeción y están tranquilas.
   1. Prepara el abrigo de rata. Cose la tela limpia y conviértela en un abrigo de rata en forma de tubo de 50 cm x 13 cm. Corta agujeros para cada una de las cuatro extremidades y la parte posterior del abrigo de rata y cose lazos en las cuatro esquinas.
   2. Póngase guantes, coloque la rata en una mesa que no sea resbaladiza, sostenga la cola de la rata con la mano izquierda y tire suavemente hacia atrás. Abre el puerto del abrigo de rata con la mano derecha. Usando el hábito de la rata de oscuridad y excavación, colóquelo en la boca del pelaje de la rata, la rata se enterraría en él por sí sola.
   3. Cuando la rata se entierre en el centro del pelaje de la rata, usa la mano izquierda para sostener ambos lados de los omóplatos de la rata y saca las dos extremidades delanteras de la rata con la mano derecha.
   4. Aprieta las cuerdas de la parte delantera del abrigo, cruza las cuerdas y envuélvelas alrededor del lomo de la rata. Ajusta la elasticidad de las cuerdas y ata el nudo en el lomo de la rata. Finalmente, fije el extremo posterior del cuerpo de la rata de manera similar para que sus extremidades traseras bilaterales se encuentren fuera del pelaje de la rata.
   5. Para la suspensión tipo columpio, tome dos ganchos en S y engánchelos en el nudo en la parte posterior del abrigo de rata y enganche los ganchos en el marco de hierro. En este punto, la rata está suspendida de la tira de tela, en un estado ligeramente oscilante (Figura 1).
      NOTA: La altura de la tira de tela desde el suelo es de unos 70 cm, para que el experimentador sentado en un taburete pueda operar cómodamente y sin esfuerzo. Coloque un acolchado grueso en la superficie plana debajo de la rata como precaución si el animal se resbala.

2. Tratamiento de acupuntura

1. Desinfección
   1. Esterilice el área local con una solución desinfectante de yodóforo al 5% 3 veces antes de acupuntar. Agregue un aderezo con alcohol después de cada exfoliante de yodofor.
2. Agujas ardientes
   NOTA: Se deben tomar precauciones de seguridad para evitar quemaduras y lesiones.
   1. Tome las pinzas hemostáticas para recoger la bola de algodón, empapada con alcohol al 95%, con la mano izquierda y enciéndala con un encendedor.
   2. Sostenga el mango de la aguja con el pulgar, el índice y el dedo medio de la mano derecha en una posición ligeramente curvada, como si sostuviera un bolígrafo.
   3. Coloque la punta de la aguja y el cuerpo de la aguja sobre las bolas de algodón con alcohol y caliéntelo; Primero caliente el cuerpo de la aguja y luego caliente la punta de la aguja. Queme la aguja hasta que esté de color blanco brillante o rojo, dependiendo del propósito del tratamiento (Figura 2).
      NOTA: El cuerpo de la aguja debe estar completamente quemado de color blanco brillante o rojo, de lo contrario, afectará la eficacia de la acupuntura o causará infección postoperatoria y otros problemas.
3. Acupuntura
   NOTA: De acuerdo con la velocidad, la profundidad, el rango, el tiempo de retención de la aguja y el propósito del tratamiento, Lingnan Fire-Needle se puede dividir en varias técnicas operativas, como acupuntura puntual, acupuntura dispersa, acupuntura densa, acupuntura rápida y acupuntura lenta²². La clave para operar con Lingnan Fire-Needle es roja, precisa y rápida.
   1. Espere hasta que la aguja se queme de color rojo, aleje la aguja de la llama y manténgala por encima del punto de acupuntura.
   2. Apunte la punta de la aguja verticalmente al punto de acupuntura, perfore y tire rápidamente. Asegúrese de que todo el proceso se complete en 1 s.
   3. La profundidad de penetración de los puntos de acupuntura es de aproximadamente 1-2 mm, solo perfore la punta de la aguja al rojo vivo.
      NOTA: La profundidad de la acupuntura debe determinarse de acuerdo con la condición, la constitución, la edad, el grosor muscular del punto de acupuntura, la profundidad de los vasos sanguíneos y la distribución de los nervios.
   4. Perfora cada punto de acupuntura 3x-5x. Repita esto para todos los puntos de acupuntura (Figura 3).
      NOTA: Al realizar la operación, esté completamente concentrado y ágil. En el mismo procedimiento en una rata, se debe usar la misma aguja de fuego, y la aguja se vuelve a esterilizar mediante llama entre cada dos punciones; La aguja no debe colocarse hacia abajo ni quedar estéril.

3. Manejo post-acupuntura

1. Levante la aguja de fuego para separarla de la piel y sostenga una bola de algodón seca estéril para presionar el orificio de la aguja y evitar el sangrado. Después de la terapia con agujas de fuego, las ratas mostraron una movilidad sin problemas y sin complicaciones detectables.
   NOTA: Si se produce sangrado después de la punción de fuego, no es necesario detener el sangrado, simplemente limpie con una bola de algodón seca después de que se detenga naturalmente.

4. Recopilación y análisis de datos

1. Después de 6 ciclos de intervención con punción ignífuga, eutanasiar a las ratas mediante una inyección intraperitoneal alta de pentobarbital sódico (150-200 mg/kg). Recoger muestras de fémur y realizar microtomografías computarizadas²³.
2. Analice los datos estadísticamente, utilizando software de análisis. Mostrar las mediciones como media y analizar utilizando ANOVA de un factor, considerándose estadísticamente significativo p <0,05.

Resultados

Los datos de la Tabla 1 muestran que, en comparación con el grupo normal, el grosor del hueso trabecular (Tb.Th), el número de hueso trabecular (Tb.N) y la fracción de volumen óseo del parámetro estático del hueso trabecular (BV/TV) en el grupo modelo se redujeron significativamente (p <0,05), y la separación del hueso trabecular (Tb.Sp) se elevó (p <0,05); lo que indica que la estructura ósea del hueso trabecular en las áreas enriquecidas con hueso trabecular de la epífisis femoral de la rata se alteró significativamente después de la deosteoporosis, lo que indica un daño evidente.

En comparación con el grupo modelo, el grosor trabecular, el número trabecular y la fracción del volumen óseo del fémur del parámetro estático trabecular en el grupo de acupuntura con fuego aumentaron significativamente (p <0,05) y la separación trabecular disminuyó (p <0,05). Esto sugiere que la terapia con aguja de fuego puede mejorar el daño a la estructura ósea esponjosa del fémur en ratas modelo con osteoporosis inducidas por la extirpación de hueso.

La Figura 4 muestra las imágenes tridimensionales de la estructura de la matriz esponjosa de hueso de rata en cada grupo. La Figura 4A es el grupo normal, la Figura 4B es el grupo modelo y la Figura 4C es el grupo de la aguja de fuego. Como se puede observar en la figura, en comparación con el grupo normal, en el grupo modelo se perdió un gran número de trabéculas en el centro e incluso en la periferia de la matriz esponjosa del fémur, y en la parte inferior apareció un gran número de cavidades. La continuidad general de la estructura ósea estaba dañada, con la aparición de parte de las trabéculas óseas libres. En comparación con el grupo modelo, hubo un gran aumento en el grosor de las trabéculas en el centro y la periferia del hueso esponjoso del fémur en el grupo de aguja de fuego, y mejoró la continuidad de la estructura ósea general. Esto sugiere que las agujas de fuego pueden proteger la estructura trabecular del hueso esponjoso del fémur en el modelo de rata de osteoporosis inducida por ovariectomía.

Figura 1: Método de fijación de ratas: columpio de ratas atadas con pelaje. Después de vestir a la rata con un abrigo de rata, la rata se asegura y se suspende en el aire enganchando el abrigo de rata con dos ganchos en S. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figura 2: Aguja de fuego Lingnan. (A) Herramientas de aguja. Elija una aguja de fuego fino con un tamaño de 0,40 mm x 13 mm. (B) Agujas ardientes. Coloque la punta de la aguja y el cuerpo de la aguja sobre las bolas de algodón empapadas en alcohol y caliéntelas. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figura 3: Procedimiento de acupuntura con aguja de fuego en cuatro puntos de acupuntura. (A) Pishu (BL 20): Ubicado entre las costillas en los dos lados inferiores de la^12ª vértebra torácica, a 6 mm de la línea dorsal media (B) Shenshu (BL 23): Ubicado en los dos lados inferiores de la segunda vértebra lumbar, a 6 mm de la línea dorsal media (C) Zusanli (ST 36): Se localiza en la cara posterior y lateral de la rodilla, unos 3 mm por debajo de la pequeña cabeza del peroné. (D) Sanyinjiao (SP 6): Ubicado a unos 10 mm en línea recta desde la punta del tobillo interno de la extremidad trasera. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figura 4: Comparación de la estructura tridimensional del hueso esponjoso del fémur distal de ratas en varios grupos. (A) El grupo normal. B) El grupo modelo. (C) El grupo de la aguja de fuego. Barras de escala: 500 μm. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Grupo	Tb.N(mm)	Tb.Sp(mm)	Tb.Th (milímetro)	BV/TV
Grupo normal	3,29±0,47	0,23±0,06	0,12±0,03	0,39±0,14
Grupo de modelos	0,96±0,78*	0,66±0,44*	0,09±0,01*	0,17±0,11*
Grupo de Agujas de Fuego	2.73±0.76Δ	0.33±0.20Δ	0.12±0.02Δ	0.33±0.16Δ

Tabla 1: Efecto de la aguja del fuego sobre los índices microestructurales de la osteoporosis femoral. Los datos muestran una media ± DE, n= 10. Para la comparación realizada con el grupo normal, *p<0,05; Para la comparación realizada con el grupo de modelos, Δp<0.05.

Discusión

La terapia con agujas de fuego de Lingnan tiene un profundo trasfondo histórico. Los registros sobre el fuego, las agujas y los métodos de punción se remontan a Huangdi Neijing. Los acupunturistas modernos Situ Bell y Zhang Jiawei combinaron el clima de Lingnan y las características físicas de su gente para crear^{la terapia de} aguja de fuego de Lingnan. Lin Guohua resumió la terapia de la aguja de fuego de Lingnan, como calentamiento, dragado, tonificación, limpieza y eliminación, con el calentamiento como esencia²⁴.

El primer paso para usar agujas de fuego es seleccionar el tipo de aguja apropiado. Las agujas de fuego se pueden clasificar en tres categorías principales: de una sola cabeza, de varias cabezas y de cabeza plana. La aguja de fuego de un solo cabezal es ampliamente utilizada en la práctica clínica y se usa comúnmente para enfermedades multisistémicas. La aguja de fuego multicabezal combina tres agujas de fuego finas o tres de tamaño medio-grueso en forma triangular, utilizadas principalmente para tratar enfermedades de la piel. La aguja de fuego de cabeza plana se usa comúnmente para eliminar varios tipos de lunares, verrugas y otros organismos excesivos en la piel^25,26. El estudio seleccionó agujas de un solo cabezal porque tienen una gama más amplia de aplicaciones y más características, lo que facilita la obtención de agujas finas adecuadas para el tamaño de las ratas.

En segundo lugar, el uso adecuado de la terapia con agujas de fuego requiere criterios críticos para cauterizar las agujas. Los investigadores²⁷ han descubierto que es necesario cauterizar las agujas a una temperatura específica para su efectividad. Es posible que la estimulación no alivie los cambios patológicos relevantes si la temperatura no es lo suficientemente alta. Por lo tanto, para lograr el efecto terapéutico deseado, las agujas utilizadas en la terapia con agujas de fuego deben quemarse hasta obtener un color rojizo o blanco brillante y luego insertarse rápidamente en los puntos de acupuntura o partes seleccionadas. Además, dado que los criterios para quemar agujas con agujas de fuego varían según los instrumentos de punción de fuego, los sitios de punción y las enfermedades tratadas, hemos compilado un conjunto completo de criterios para quemar agujas con agujas de fuego que se pueden consultar en la Tabla 2. En el presente estudio, utilizamos una aguja de fuego de una sola cabeza para la estimulación multipunto en lugar de una aguja de fuego de múltiples cabezas. Esto se debía a que el hecho de que varias agujas estuvieran demasiado juntas no podía garantizar que cada aguja se cauterizara de manera uniforme.

Herramientas de aguja	Grado de combustión de la aguja	Indicaciones
Aguja de fuego de una sola cabeza	Rojo rojizo.	Enfermedades óseas y articulares y enfermedades dolorosas
Aguja de fuego multicabezal	La punta de la aguja está ligeramente caliente.	Enfermedades de la piel como el acné
Aguja de fuego de cabeza plana	Blanco brillante. El mango de la aguja está ligeramente caliente.	Neoplasias como verrugas filiformes

Tabla 2: Los criterios para quemar agujas.

En cuanto al ángulo de inserción de la aguja de fuego, suele ser vertical. En cuanto a la profundidad a la que se debe insertar la aguja, aún no hay estándares establecidos. Sin embargo, generalmente se sugiere que la inserción más profunda es mejor para áreas con más músculo y piel más gruesa, mientras que la inserción menos profunda es más apropiada para áreas con piel y músculos más delgados. Además, muchos expertos en la materia creen que la profundidad de la punción del fuego debe ser como la de la aguja filiforme²⁸. Un estudio sugiere que la profundidad de las agujas de fuego debe ser menos profunda que la de las agujas filiformes cuando se pungen puntos de acupuntura y ligeramente más profunda que la de las agujas filiformes cuando se puncionan puntos de dolor²². Como resultado, con respecto a la aplicación real de agujas de fuego, es aconsejable consultar primero el estándar para agujas filiformes y luego determinar la profundidad de la punción en función de la experiencia clínica.

Según la opinión colectiva de 192 expertos en Lingnan, la causa principal de OP en grupos de alto riesgo es la deficiencia renal (Shen), que conduce a estasis sanguínea secundaria. Por lo tanto, el tratamiento de la OP implica abordar simultáneamente tanto la deficiencia renal (Shen) como la estasis sanguínea²⁹. En la actualidad, la acupuntura es un tratamiento ampliamente utilizado para la OP. Los diferentes tipos de tratamientos de acupuntura incluyen la terapia con agujas filiformes, la moxibustión, la acupuntura tibia, la electroacupuntura (EA), la terapia de inserción de hilos, la inyección de puntos de acupuntura, una combinación de acupuntura y medicamentos, y una combinación de acupuntura y moxibustión. Entre estos, los tratamientos más utilizados en la práctica clínica son la terapia de inserción de hilos, la moxibustión y la combinación de acupuntura y medicina³⁰. Clínicamente, la terapia con agujas de fuego es ampliamente utilizada para 137 enfermedades diferentes dirigidas a varios sistemas de órganos, como el sistema motor, el sistema nervioso, el sistema endocrino, el sistema digestivo, la obstetricia y la ginecología, entre las cuales las más aplicadas son las enfermedades motoras³¹. La terapia con agujas de fuego de Lingnan es un tratamiento que combina los beneficios de la acupuntura, las agujas de tres filos y la moxibustión cicatricial. Puede mejorar el qi y la circulación sanguínea en los meridianos y calentar el riñón (Shen). Este tratamiento puede tratar tanto la estasis sanguínea como la deficiencia renal (Shen), que contribuyen a la patogénesis de la OP en la medicina tradicional china. Además, tiene las ventajas de ser de bajo costo, tener efectos rápidos, un período de tratamiento corto y ser seguro. Los ensayos clínicos también muestran que la combinación de la terapia con agujas de fuego y el tratamiento con acupuntura es más eficaz en el tratamiento de la OP que la acupuntura simple o la medicación ^5,6. El dolor articular es uno de los síntomas típicos de la OP, y se ha confirmado que la eficacia de la terapia con agujas de fuego es significativamente mejor que la terapia con agujas filiformes en el tratamiento del dolor articular³².

La resistencia ósea depende de la densidad ósea, es decir, de la cantidad de hueso por unidad de volumen. El número y la distribución de las trabéculas óseas, un componente de la masa ósea, influyen significativamente en el volumen óseo y, en consecuencia, en la densidad ósea. La fracción de volumen óseo indica el porcentaje de volumen óseo por unidad de volumen tisular y es una referencia esencial para la masa ósea²³. Como parte del sistema esquelético, la función principal del hueso esponjoso es apoyar y facilitar el movimiento. Sin embargo, aumentar su tamaño puede reducir la densidad ósea, disminuyendo la resistencia ósea. La estructura esquelética del hueso esponjoso es esponjosa y está compuesta por trabéculas. Por lo tanto, la estructura del hueso esponjoso está determinada por las trabéculas. Para mantener la fuerza del hueso esponjoso, es crucial asegurarse de que haya suficientes trabéculas como marco. En segundo lugar, es necesario mantener un número relativamente adecuado de conexiones entre las trabéculas para garantizar la estabilidad estructural del hueso³³. Para que las trabéculas puedan soportar una cierta cantidad de carga, se debe mantener su grosor. La estructura del hueso esponjoso se evalúa en función del número de trabéculas presentes, su conectividad y su grosor³⁴. Después de comparar los parámetros estructurales del hueso esponjoso (Tabla 1), nuestros hallazgos revelaron diferencias significativas entre el grupo modelo de ratas y el grupo normal. El número de trabéculas, el grosor trabecular y la fracción del volumen óseo del fémur se redujeron, mientras que la separación trabecular se elevó en el grupo modelo. Estos hallazgos sugieren que la estructura ósea esponjosa cambia el grupo modelo, lo que posiblemente conduce a la osteoporosis u otras enfermedades óseas. A partir de la imagen estructural tridimensional del hueso esponjoso, se observó que la parte media carecía de trabéculas, y más de la mitad de las trabéculas de la parte superior de la periferia también faltaban. Esto indica que la integridad de la estructura ósea del fémur en ratas después de la ovariectomía se ha visto comprometida. En comparación con el grupo modelo, el fémur en el grupo de aguja de fuego mostró un aumento de las trabéculas, el grosor trabecular, la fracción de volumen óseo y una disminución de la separación trabecular. Además, cuando se consideró el diagrama estructural tridimensional del hueso esponjoso, se observó que la cavidad central del grupo aguja de fuego estaba reducida y las trabéculas óseas periféricas estaban completas (Figura 4). Este estudio demuestra que la terapia con aguja de fuego previene y controla eficazmente el daño a la estructura ósea esponjosa del fémur en ratas que se han sometido a una ovariectomía.

Las limitaciones del modelo de ovariectomía en ratas seleccionadas para este estudio son las siguientes. La reducción de estrógenos es uno de los factores de riesgo para la OP³⁵ primaria. Por esta razón, la cirugía de ovariectomía es un método confiable para establecer modelos de ratas OP ^8,9,10. Además, las ratas SD no solo son fácilmente accesibles, sino también dóciles, con condiciones de alimentación relajadas. En consecuencia, inicialmente examinamos este modelo y recomendamos el uso de agujas de fuego finas para estimular los puntos de acupuntura. Nuestro plan a largo plazo es ampliar nuestro alcance de investigación validando aún más la eficacia de la terapia con punción de fuego para aliviar la OP en otros modelos, como las ratas envejecidas. Finalmente, la Tabla 3 resume la eficacia de la acupuntura sola en ratas modelo con osteoporosis y su mecanismo de acción. Tenemos la intención de llevar a cabo una investigación más profunda sobre los posibles mecanismos en el futuro próximo 36,37,38,39,40,41,42.

Indicador de resultado		Mecanismo de acción				Referencia
Resorción ósea		La acupuntura previene la pérdida ósea y los cambios estructurales al suprimir la resorción ósea.				36
Fuerza ósea		La acupuntura aumentó el volumen y el grosor del hueso trabecular, disminuyó la separación trabecular de las tibias y restringió la excreción de fósforo y Dpd, al tiempo que promovió las concentraciones de osteocalcina sérica.				37
Metabolismo óseo		La acupuntura puede reducir significativamente los niveles séricos de ALP, BGP y TRAP en ratas OVX.				38
Vía de señalización		La acupuntura mejora la densidad mineral ósea, atenúa la respuesta inflamatoria in vivo y aumenta los niveles de factores que influyen en la osteogénesis en ratas mediante la modulación de la vía de señalización Wnt.				39,40
Efecto modulador endocrino		La acupuntura moduló los niveles séricos de estradiol, hormona liberadora de corticotropina (CRH), hormona adrenocorticotrópica (ACTH) y corticosterona (CORT).				41
Peso		La acupuntura modula los cambios en los niveles de leptina para anular el aumento de peso corporal.				36,41
Factor neurotrófico derivado del cerebro		La acupuntura puede elevar los niveles de expresión de BDNF y TrkB y acelerar el proceso de curación de fracturas después de la osteoporosis.				42

Tabla 3: El efecto de la acupuntura simple sobre la eficacia de la osteoporosis en ratas modelo.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
75% Alcohol	Shandong Lircon medicaltechnology co., ltd		Desinfección
95% Alcohol	Shandong Lircon medicaltechnology co., ltd		Agujas para quemar
Ratas Sprague-Dawley (SD) hembras adultas	Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.	SCXK 2020-0001	Modelado de osteoporosis
Estera térmica de termostato de lujo	Zhenhua Instruments		Para mantener la temperatura corporal de las ratas.
Inyección de diclofenaco sódico	Provincia de Shandong Jianmu Bio-pharmaceutical Co.	150182913	Antipirético y analgésico
Estante de fijación elevada	Taizhou Shi Ai Instrumentos y equipos científicos y educativos Co.		Arreglar ratas
Agujas de fuego	Beijing Luoya Shanchuan Medical Equipment Co., Ltd.	20190240	Una herramienta de punción
Pinzas hemostáticas	Qingdao Schultz Biotechnology Co.		Arreglar ratas
Liguter	Shanghai Machi Trading Co.	H5	Ignite alcohol
Lodophor solución desinfectante	Qingdao Hai's Hainuo Inovation Disinfection Technology Co., Ltd.	2016-0604	de desinfección
	Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.	20172142357	Desinfección
pentobarbital sódico	Beijing Jiehui Biotechnology Co.	P3761	anestesia
Maquinilla eléctrica para mascotas	Fenghua Xikou Lubao Cuchillos & Tijeras Fábrica		Afeitar el pelo de las ratas
		rata hecho a sí mismo	Arreglar ratas
Pinzas	Qingdao Schultz Biotechnology Co.		Pizca bolas de algodón