Establecimiento de un modelo de exposición a la pulpa murina con una mordaza bucal novedosa para la investigación de la pulpitis

Resumen

En este artículo se presenta un protocolo simplificado para establecer un modelo de pulpitis en ratones utilizando una mordaza bucal innovadora, seguido de un análisis histológico posterior.

Resumen

La pulpitis, una causa común de pérdida de dientes naturales, conduce a la necrosis y a la pérdida de bioactividad en la pulpa dental inflamada. Desentrañar los mecanismos subyacentes a la pulpitis y su tratamiento eficiente es un enfoque continuo de la investigación endodóntica. Por lo tanto, comprender el proceso inflamatorio dentro de la pulpa dental es vital para mejorar la conservación de la pulpa. En comparación con otros experimentos in vitro , un modelo de pulpitis murina ofrece un contexto más auténtico y genéticamente diverso para observar la progresión patológica de la pulpitis. Sin embargo, el uso de ratones, a pesar de su rentabilidad y accesibilidad, plantea dificultades debido a su pequeño tamaño, mala coordinación y baja tolerancia, lo que complica los procedimientos intraorales y dentales. Este protocolo introduce un diseño novedoso y la aplicación de una mordaza bucal para exponer la pulpa del ratón, lo que facilita procedimientos intraorales más eficientes. La mordaza bucal, compuesta por un arco dental fácilmente disponible para la mayoría de los dentistas y puede acelerar significativamente la preparación quirúrgica, incluso para los procedimientos por primera vez. Se utilizaron micro-TC, tinción con hematoxilina-eosina (HE) y tinción con inmunofluorescencia para identificar cambios en la morfología y la expresión celular. El objetivo de este artículo es ayudar a los investigadores a establecer un procedimiento más reproducible y menos exigente para crear un modelo de inflamación pulpar utilizando esta novedosa mordaza bucal.

Introducción

La pulpa dental, una parte integral del diente, es responsable de múltiples funciones esenciales, como el suministro de nutrientes, la formación de dentina, la función sensorial^{y las reacciones} de defensa. Sin embargo, la pulpa dental, rodeada de tejido duro, es susceptible a lesiones y daños por caries profundas, pulpitis, traumatismos o terapias posteriores ^2,3. La ausencia de pulpa dental funcional aumenta el riesgo de fragilidad dental⁴. Además, la pérdida de vitalidad de la pulpa en los dientes permanentes jóvenes puede afectar negativamente a la maduración ....

Protocolo

Los procedimientos experimentales de este estudio fueron aprobados por el comité de ética de la Escuela de Estomatología de China Occidental de la Universidad de Sichuan (WCHSIRB-D-2021-125). Se obtuvieron ratones adultos C57BL/6 de Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China. Toda la corona del primer molar maxilar erupciona 21 días después del nacimiento. Los ratones para cirugía deben tener más de 21 días de edad con una vitalidad normal^{de 11}. Aquí, se utilizaron ratones de 6 a 8 semanas de edad para modelar. La Figura 1 es un diagrama de flujo que muestra el protocolo utilizado.

Resultados

El procedimiento descrito anteriormente se realizó en el primer molar maxilar derecho de 3 ratones C57BL/6 de 6-8 semanas de edad, mientras que los primeros molares del maxilar izquierdo se conservaron como control. Para la demostración se utilizaron los resultados histológicos y de inmunofluorescencia del control en blanco, las muestras de pulpitis de 12 h y de pulpitis de 24 h.

Siguiendo el protocolo de análisis de TC de Goldman et ^al.15, la exposición pulpar se confi.......

Discusión

Como tejido blando solitario dentro de los dientes, la pulpa dental cumple un papel crucial en el mantenimiento de la bioactividad del diente, pero sigue siendo muy sensible. La preservación de esta pulpa vital se ha convertido en el enfoque inicial preferido en los tratamientos endodónticos recientes, lo que requiere una comprensión integral de los mecanismos inflamatorios de la pulpa dental¹⁶. La fluctuación espacio-temporal del microambiente inflamatorio y las interacciones entre los tipos de c.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Animal
C57/B6J	Gempharmatech Experimental Animals Company	C57/B6J	Para el establecimiento de la exposición a la pulpa
Equipo
1 mL jeringa	Chengdu Xinjin Shifeng Aparato médico & Instrumentos Co. LTD.	SB1-074 (IV)	Aplicar en inyección de drogas.
8 # Archivo C +	Readysteel 0010047		Aplicar al exponer el techo de la cámara de pulpa.
		de mezcla de anestesia	10% clorhidrato de ketamina + 5% xilacina + solución salina isotónica estéril 85%
DAPI Solución de tinción	Beyotime	C1005	Aplicar en la tinción de inmunofluorescencia para la contra-tinción del núcleo.
Pieza de mano dental de alta velocidad	dental Jing yuan tecnología de comercio electrónico	WJ-422	Aplicar en la exposición de la pulpa.
Cortador de alambre pesado	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	none	Aplicar en el corte de arco.
Kit de tinción de hematoxilina y eosina	Biosharp	BL700B	Para el análisis histológico de los portaobjetos.
Anticuerpo IL-6	Novus	NBP2-89149	Se aplica en la tinción de inmunofluorescencia para detectar la inflamación de la pulpa dental.
Ketamina (clorhidrato de ketamina)	Vet One, Boise, Idaho, EE. UU	C3N VT1	100 mg / kg, IP. Aplicar en nestestetización.
Grifo médico	3M	1530	Aplicar en inmovilización en ratones.
Alambre de arco ortodóncico	Shanghai Wei Rong Aparato Médico Co. LTD.	K417	Diámetro de 8µ m
Fresa dental redonda (0,6 mm)	Shofu global 072208		Aplicar en la eliminación del esmalte y la capa superficial de dentina.
Alicate de flexión de bucle joven	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	none	Aplicar en flexión de arco.

Solución .