La cirugía de bypass duodenal-yeyunal (DJB, por sus siglas en inglés) puede mejorar el metabolismo de la glucosa y reducir la resistencia a la insulina. Aquí, presentamos un protocolo para establecer un modelo de ratón estable y confiable de DJB.
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La cirugía de bypass duodenal-yeyunal (DJB, por sus siglas en inglés) puede mejorar el metabolismo de la glucosa y reducir la resistencia a la insulina. Aquí, presentamos un protocolo para establecer un modelo de ratón estable y confiable de DJB.
La prevalencia de la obesidad y la diabetes tipo 2 es un grave problema de salud mundial. La obesidad es un factor patógeno importante en la diabetes tipo 2, las enfermedades cardiovasculares y algunos tipos de cáncer. La cirugía bariátrica ofrece una opción de tratamiento eficaz y a largo plazo tanto para la obesidad como para la diabetes. La gastrectomía en manga (SG) y el bypass gástrico en Y de Roux (RYGB) son ampliamente reconocidos como las cirugías bariátricas más populares. Además, varias cirugías bariátricas exploratorias han demostrado efectos terapéuticos prometedores. El bypass duodenal-yeyunal (DJB), diseñado específicamente para diabéticos con bajo índice de masa corporal, ha mostrado resultados metabólicos beneficiosos. Sin embargo, sus beneficios metabólicos independientes del peso no se comprenden completamente debido a los modelos animales limitados. En este artículo, describimos los protocolos de atención optimizados y las técnicas quirúrgicas para realizar la cirugía DJB en ratones diabéticos obesos inducidos por la dieta (DIO). El uso de un modelo de ratón contribuye a una mejor comprensión de la naturaleza de los cambios inducidos por la cirugía de DJB, al tiempo que facilita la práctica clínica relacionada.
La obesidad y la diabetes tipo 2 son las enfermedades crónicas más comunes en el mundo, y su prevalencia está aumentando entre los jóvenes1. La cirugía bariátrica es el tratamiento más eficaz para la obesidad y la diabetes, ya que facilita la estabilidad de la glucosa en sangre a largo plazo y mejora las complicaciones asociadas a la obesidad 2,3. Existen varios tipos de cirugía bariátrica, clasificadas por si reducen el volumen gástrico o la absorción intestinal; Estos incluyen restrictivos, malabsortivos y combinados 4,5.
El bypass duodenal-yeyunal (DJB) fue desarrollado por primera vez por Rubino y Marescaux, quienes demostraron que la diabetes tipo 2 podría aliviarse conectando el duodeno y el yeyuno en lugar de reducir el volumen gástrico 6,7. DJB preserva todo el estómago y evita todo el duodeno y el yeyuno proximal. El intestino se divide en biliopancreático, digestivo y miembros comunes 6,8. La DJB comparte algunas similitudes con las cirugías bariátricas, como el bypass gástrico en Y de Roux (RYGB), el minibypass gástrico, el bypass biliopancreático, la derivación duodenal y la gastrectomía en manga DJBplus 9. En comparación con el RYGB, el DJB no requiere una anastomosis gastrointestinal, lo que reduce el tiempo operatorio y mejora la tasa de éxito del procedimiento. El DJB es similar al RYGB en la mejora del metabolismo de la glucosa, pero no afecta al peso corporal10. Después de la cirugía de DJB, la entrega rápida de alimentos al intestino delgado distal estimula la secreción del péptido similar al glucagón-1 (GLP-1), lo que resulta en un mejor metabolismo de la glucosa11,12.
El uso de modelos animales es esencial para comprender las vías metabólicas, celulares y moleculares. Los modelos animales de cirugía bariátrica han contribuido a nuestra comprensión de los posibles mecanismos subyacentes a la obesidad y la diabetes13,14. Sin embargo, debido a las diferencias fisiológicas entre las especies, es imposible replicar perfectamente las enfermedades humanas en modelos animales15. Entre los diversos modelos animales disponibles para fines de investigación, el modelo de ratón de obesidad inducida por la dieta (DIO) es el que más se parece a la obesidad y el síndrome metabólico humanos16. Se seleccionaron ratones para la cirugía DJB con el fin de determinar la viabilidad de la cirugía y proporcionar técnicas para futuras investigaciones. Este manuscrito proporciona un resumen exhaustivo de los aspectos técnicos y experimentales de la cirugía DJB.
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Todos los pasos del protocolo que se describen a continuación siguen los lineamientos del Comité de Cuidado y Uso de Animales del Hospital General del Comando del Teatro Sur bajo el número de aprobación 2020112501.
1. Preparación preoperatoria general
NOTA: Se compraron treinta ratones machos C57BL/6 de 6 semanas de edad. Los ratones se alojaron en un laboratorio libre de patógenos específicos (SPF) bajo un ciclo de luz/oscuridad de 12 h; temperatura, 22 ± 2 °C; y la humedad, 55-65%. Los ratones tuvieron acceso gratuito al agua y se les alimentó con una dieta de 60% de kcal y grasas durante 6 semanas para inducir la obesidad. Se administró una inyección intraperitoneal de 40 mg/kg de estreptozotocina durante 5 días para inducir diabetes17. Entre los treinta ratones, veintidós ratones fueron examinados para determinar si la glucosa en sangre era aleatoria > 300 mg/dL y se asignaron aleatoriamente a los grupos DJB (n = 15) y cirugía simulada (n = 7). Ocho ratones fueron excluidos del experimento debido a una glucosa en sangre por debajo de la norma.
2. Bypass duodenal yeyunal: procedimiento quirúrgico

Figura 1: Procedimiento de bypass duodenal-yeyunal. (A) Localización del yeyuno a 5 cm distal del ligamento de Treitz. (B) Ligar dos veces el yeyuno con seda 6-0, cortado por el medio de la ligadura. (C) Anastomosis yeyunal-yeyunal. (D) Hacer una incisión de 0,5-0,6 cm, y suturar la pared posterior. (E-F) Anastomosis yeyunal completa. (G) Tire del yeyunal distal hasta el duodeno 1 cm por debajo del píloro. H) Anastomosis duodenal-yeyunal. (I) Cortar la anastomosis duodenal-yeyunal con una incisión de 0,5-0,6 cm y suturar la pared posterior con una sutura continua simple. (J-K) Anastomosis duodenal-yeyunal completa. (L) A 2 mm desde la anastomosis distal hasta la duodenal-yeyunal, ligar dos veces el duodeno con seda 6-0 y cortar por la mitad de la ligadura. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
3. Cuidados postoperatorios generales

Figura 2: Diagrama de la cirugía de DJB. (A) Anastomosis duodenal-yeyunal. (B) Anastomosis yeyunal-yeyunal. (C) Miembro biliopancreático. (D) Miembro digestivo. e) Miembro común. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figura 3: Anatomía de la cirugía DJB. A) Anastomosis duodenal-yeyunal. (B) Anastomosis yeyunal-yeyunal. (C) Miembro biliopancreático. (D) Miembro digestivo. e) Miembro común. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
4. Evaluación postoperatoria de parámetros metabólicos
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Condiciones generales
El tiempo operatorio medio del procedimiento DJB fue de 84,5 ± 2,6 min. Quince ratones se sometieron a la cirugía DJB, nueve ratones sobrevivieron. Como se muestra en la Tabla 1, la mayoría de las muertes ocurrieron durante la cirugía o en los 7 días siguientes. Las causas de muerte postoperatoria fueron sangrado (n=2) en el día postoperatorio 1, fuga anastomótica (n=1) en el día 4 postoperatorio, obstrucción anastomótica (n=2) en el día 7 postoperatorio y causa ...
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En 1953, Varco et al.18 realizaron el primer bypass yeyuno-ileal como inicio de la cirugía bariátrica. Desde entonces, numerosos cirujanos han realizado numerosas cirugías bariátricas. Estas cirugías han resultado en la pérdida de peso y han mejorado las complicaciones metabólicas 4,19,20. Además, en 1967, Mason e Ito21 realizaron el primer bypass ...
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Los autores declaran no tener conflictos de intereses.
Este estudio contó con el apoyo de una subvención del Proyecto de Planificación de Ciencia y Tecnología de la provincia china de Guangdong (Nº 202002020069).
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Retractor abdominal | FST | 17000-03 | Retractor Colibri -3 cm, rango de retractor 1,5 cm / 3 cm de largo |
| solución de pentobarbital de sodio al 1% Fábrica | reactivos químicos de Guangzhou | / | Disuelto 500 mg de polvo de pentobarbital sódico en 50 ml de solución salina normal para obtener una solución de pentobarbital sódico al 1%. |
| Bencilpenicilina sódica para inyección | North China Pharmaceutical Company Ltd. | F2062121 | Penicilina |
| Buprenorfina | Guangzhou Fábrica de reactivos químicos | / | Analgesia |
| Buprenorfina | Guangzhou Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | / | Analgésico |
| Tampón de citrato de sodio y ácido cítrico | LEAGENE | R00522 | Solución tampón |
| Bastoncillos de algodón | HaoZheng Medical | 60220610 | Hisopos de algodón |
| Pasta depilatoria | Veet | AAPR-S222 | Crema depilatoria |
| Marca auricular | ZEYA | SUS304 | Ear-mark |
| Manta eléctrica | ZOSEN | ZS-CWDRT | Almohadilla térmica Báscula |
| electrónica | WETTLER TOLEDO | 20060902-6 | Medir el peso |
| Nutrición enteral en polvo | Abbott Laboratories | / | Nutrición en polvo |
| Ojo ungüento | Guangzhou Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | / | Proteger los ojos |
| Gúlcómetro | Roche | 6993788001 Evaluar la glucosa en sangre | |
| Prisma Graphpad versión 9.4.1 | Software GraphPad | versión 9.4.1 | Software para análisis estadístico |
| Dieta alta en grasas (Dieta purificada para roedores alta en grasas [60FDC]Dyets | 112252 | 60kcal% Dieta alta en grasas | |
| Micro Pinzas | Jinzhong Medical | 18-1140 | Micro pinzas |
| Micro portaagujas | Jinzhong Medical | EMT-160-Z | Portaagujas |
| Micro Tijeras | Jinzhong Medical | YBC010 | Micro tijeras |
| Cámara microscópica | LAPSUN | E 2000 | Video |
| Tijeras oftálmicas | Jinzhong Medical | Y00030 | Tijeras quirúrgicas |
| Pentobarbital | Guangzhou Fábrica de reactivos químicos | / | Narcosis |
| Inyección de cloruro de sodio | Guangzhou Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | B21L0301 | NaCl 0.9% |
| Microscopio estereoscópico | ZEISS | Stemi 305 | Microscopio estereoscópico binocular |
| Estreptozotocina | Sigma | S110910-1g | STZ |
| Línea de sutura | LINGQIAO SUTURE | ZS-LQPMRZ5/ 0 | Prolene 6/0,Prolene 10/0 |
| Pinza de tejido | Jinzhong Medical | H1701 | Pinzas quirúrgicas |
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