En este trabajo se presenta un protocolo basado en un sistema de visión artificial (CVS) para determinar el comportamiento de fusión de sistemas alimentarios multifásicos.
Artículo de método
En este trabajo se presenta un protocolo basado en un sistema de visión artificial (CVS) para determinar el comportamiento de fusión de sistemas alimentarios multifásicos.
El comportamiento de fusión es uno de los índices de calidad más importantes del helado. Por lo general, se evalúa mediante métodos gravimétricos y se expresa en términos de tiempo de inicio y tasa de fusión. Sin embargo, el aspecto del helado durante la fusión también es importante porque la retención de la forma está relacionada con una buena estructura del producto. El protocolo propuesto aquí ilustra un sistema de visión por computadora (CVS) que se puede utilizar para respaldar la metodología gravitacional ya existente para calcular dos nuevos índices de fusión relacionados con la retención de la forma y la tasa de fusión. Las imágenes del helado durante el derretimiento se toman cada 15 minutos durante un total de 90 minutos. A continuación, las imágenes digitales se elaboran utilizando un método de procesamiento de imágenes desarrollado a propósito para calcular el área, la altura y la anchura del helado. La relación entre la altura y la anchura en cada momento de fusión, referida a la relación en el tiempo 0 (Rt/R0), es un índice de la retención de la forma del helado, mientras que el área en los diferentes tiempos de fusión referida al área en el tiempo 0 (At/A0) está relacionada con la velocidad de fusión. Este sistema de visión artificial permite la obtención de resultados altamente sensibles y fiables, y se puede aplicar no solo a helados sino también a diferentes matrices de alimentos, como la crema de leche batida o la albúmina de huevo.
El helado es un sistema multifásico en el que las fases líquida, sólida y gaseosa están estrictamente conectadas. La fase líquida continua envuelve burbujas de aire y cristales de hielo, y contiene grasas parcialmente cristalizadas, proteínas coloidales, sales, azúcares (eventualmente cristalizados) y estabilizadores. La composición del helado varía en función de las solicitudes del mercado local y de las posibles normativas. Aunque la tecnología de procesamiento afecta las características del helado final, cada componente juega un papel importante en la definición de la calidad del producto1. El comportamiento de fusión es uno de los índices de calidad más importantes del helado, considerando los fenómenos que ocurren tanto durante el consumo como en la boca. Con la penetración del calor en el helado, los cristales de hielo se derriten y el agua se difunde y se mezcla con la fase sérica, que puede drenar a través de la estructura restante2. Un producto de fusión rápida no es deseable para comer cómodamente, pero también para garantizar una mayor resistencia al choque térmico. Sin embargo, los productos de fusión lenta también indican algunos defectos en la formulación1. Se sabe que la microestructura del helado es responsable de las propiedades de fusión3, pero hasta ahora se han publicado resultados contrastantes, que muestran que el conocimiento sobre la influencia de los factores microestructurales en la fusión es aún limitado4. Por lo tanto, se necesitan más estudios para dilucidar el mecanismo de fusión, que también es crucial en el diseño de nuevas formulaciones3.
El comportamiento de fusión generalmente se evalúa por métodos gravimétricos y se expresa en términos de tiempo de inicio y tasa de fusión5. Una porción determinada de helado se coloca sobre una malla de alambre en un gabinete de temperatura controlada y se registra el peso del producto derretido. De la curva peso-tiempo, se pueden destacar tres fases: la fase de retraso durante la cual se produce la penetración del calor, la fase de fusión rápida con la fase de suero diluido que fluye a través de la estructura del helado a la velocidad máxima, y la fase estacionaria, donde la mayor parte del producto ha goteado2.
Con el método gravimétrico, se pueden reconocer productos de fusión lenta y rápida; Sin embargo, el aspecto del helado durante el derretimiento también es importante, porque la retención de la forma está relacionada con una buena composición y estructura del producto6. Así, un procedimiento basado en un sistema de visión artificial (CVS) puede apoyar la metodología gravitacional ya existente al permitir el estudio de la apariencia del producto durante la fusión. Los CVS pueden adquirir numerosos atributos alimenticios3 (por ejemplo, tamaño, peso, forma, textura y color) con detalles precisos que no pueden ser observados por el ojo humano. Estos sistemas suelen estar formados por cámaras digitales y programas informáticos de procesamiento de imágenes7. De hecho, un protocolo basado en CVS incluye dos pasos principales: 1) adquisición de imágenes y 2) procesamiento de imágenes. Se pueden aplicar varios niveles de procesamiento de imágenes7, desde los más simples hasta los más complejos, como los métodos de aprendizaje profundo para el desarrollo de Inteligencia Artificial 8,9. Recientemente se ha prestado gran atención a los CVS en el sector alimentario y se ha desarrollado un gran número de aplicaciones para la inspección de seguridad alimentaria, el control del procesamiento de alimentos, la detección de objetos extraños y otros campos. Son rápidos, eficientes y no destructivos, por lo que representan herramientas válidas para proporcionar a los consumidores alimentos inocuos y de alta calidad10.
En el campo del helado, se sugirió un método de análisis de imágenes para estudiar la recristalización del hielo mediante microscopía óptica11. Más recientemente, se procesaron imágenes de tomografía computarizada de rayos X para analizar la microestructura 3D de materias blandas-porosas, incluido el helado3. Sin embargo, la elaboración de imágenes digitales simples de dispositivos de carga acoplada (CCD) puede presentar varias ventajas en términos de facilidad de adquisición y representación del aspecto del helado tal como lo perciben los consumidores. Algunos autores muestran imágenes de helado durante la fusión12, pero, hasta donde sabemos, la extracción de índices numéricos de las imágenes fue reportada por primera vez por Moriano y Alamprese13.
Por lo tanto, el protocolo aquí propuesto, basado en el trabajo de Moriano y Alamprese13, ilustra un CVS simple que se puede aplicar para apoyar la metodología gravitacional ya existente para el estudio del comportamiento de fusión del helado. En la Figura 1 se ilustra un diagrama de bloques del método propuesto. El uso de este sistema permite el cálculo de dos índices de fusión relacionados con la retención de la forma y la tasa de fusión. En particular, el artículo describe por primera vez la configuración experimental detallada y el procedimiento para la adquisición de imágenes digitales durante el derretimiento del helado y los pasos de procesamiento de imágenes. Además, se informa que los resultados obtenidos de los helados producidos con diferentes edulcorantes (es decir, sacarosa, sucrotmalt y eritritol) muestran el potencial del método.

Figura 1: Diagrama de bloques de las metodologías propuestas. Resumen de los pasos generales para el Sistema de Visión por Computador propuesto y el método gravimétrico para estudiar el comportamiento de fusión del helado. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
1. Configuración experimental y procedimientos para los ensayos de fusión

Figura 2: Configuración de la prueba de fusión. La figura muestra cómo configurar la prueba de fusión en el gabinete termostático: coloque un cilindro de vidrio graduado en una báscula digital para recoger y pesar el helado derretido. La muestra de helado se coloca en una pantalla de malla de alambre metálico en un embudo suspendido sobre el cilindro. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
2. Procesamiento de imágenes para el cálculo de índices de fusión
(1)
(2)
(3)Figura complementaria 1: Calibración espacial de la imagen. (A) Vaya a la ventana Medir > Calibración > Espacial del software de análisis de imágenes. Seleccione Nuevo y, a continuación, marque Imagen para abrir la ventana Escalado . Se indica la longitud de referencia en la unidad para convertir píxeles (por ejemplo, milímetros). (B) Superponga con cuidado la barra verde con la parte de referencia correspondiente a la longitud indicada y haga clic en Aceptar. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Figura complementaria 2: Recorte de AOI y conversión en una escala de grises. (A) Conversión del área de interés (AOI) en escala de grises y (B) la imagen resultante. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Figura complementaria 3: Selección de los parámetros a medir. En la ventana Seleccionar medición , se pueden seleccionar los parámetros a medir; Para la evaluación de Ice Cream Meltdown, se debe seleccionar el área, el ancho de la caja y la altura de la caja. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Figura complementaria 4: Segmentación de la muestra de helado. En la ventana "Segmentación" es posible seleccionar los rangos de histograma a considerar para cubrir exactamente el área de la forma del helado. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Figura complementaria 5: Filtrado de objetos y la función Count. Las líneas rojas resaltan los objetos brillantes reconocidos. Al aplicar la función de recuento y abrir la ventana "Ver, Datos de medición", se mostrarán los resultados de los parámetros seleccionados (A). Para filtrar solo la forma del helado, es posible seleccionar un rango de área mínima y máxima en la ventana "Seleccionar medición", contando así solo los parámetros de un objeto (B). Haga clic aquí para descargar este archivo.
Figura suplementaria 6: Índice de retención de forma (R). Se muestran la altura de la caja (Ht, línea punteada roja) y el ancho de la caja (Wt, línea continua negra) utilizados para el cálculo del índice de retención de forma (R). Haga clic aquí para descargar este archivo.

Figura 3: Curvas de retención de forma y área. Ejemplo de una curva de retención de forma (A) y (B) área, en la que se trazan los valores medios de Rt/R0 y At/A0 a lo largo del tiempo; Las barras de error corresponden a los valores de desviación estándar obtenidos por las réplicas de análisis. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
3. Elaboración de datos gravimétricos
(4)
(5)
Figura 4: Curva gravimétrica. Ejemplo de una curva de fusión de un helado obtenida por el método gravimétrico. La curva original se muestra en rojo; Las series de datos seleccionadas en la parte lineal se muestran en verde; La línea de regresión calculada se muestra en puntos negros. También se muestra la ecuación y el coeficiente de determinación (R2) de la línea de regresión. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
NOTA: Para tener resultados confiables que se analizarán estadísticamente, repita todo el procedimiento de prueba de fusión y procesamiento de imágenes al menos tres veces para cada muestra.
Como ejemplo de los resultados propuestos de CVS, se muestran los resultados de los análisis de fusión para tres formulaciones diferentes de helado, en comparación con los datos obtenidos del método gravimétrico. En particular, se estudió el comportamiento de fusión de helados elaborados con diferentes edulcorantes (es decir, sacarosa, sucrosal y eritritol).
La Tabla 1 y la Figura 5A muestran los resultados del índice de retención de forma (Rt/R0) para las tres muestras de helado durante la fusión. Se observó una retención de forma similar para todas las muestras hasta 45 min; luego, la muestra elaborada con sacarosa perdió su forma más rápido que los otros productos, resultando en un Rt/R0 significativamente menor según el análisis de varianza de una vía (ANOVA), seguido de la prueba de Diferencia Mínima Significativa (LSD) (p < 0.05). Solo la muestra que contenía eritritol mantuvo su forma hasta el final del ensayo, dando valores medibles de Rt/R0.
| SACAROSA | SUCROMALT | ERITRITOL | ||||
| Tiempo (min) | At/A0 | S.D. | At/A0 | S.D. | At/A0 | S.D. |
| 0 | 1.00 | - | 1.00 | - | 1.00 | - |
| 15 | 0,91A | 0.01 | 0,93A | 0.02 | 0,92A | 0.04 |
| 30 | 0,76A | 0.04 | 0,82A | 0.02 | 0,84A | 0.04 |
| 45 | 0,56A | 0.04 | 0.66AB | 0.02 | 0,74b | 0.03 |
| 60 | 0,32A | 0.01 | 0,46b | 0.02 | 0,62C | 0.01 |
| 75 | 0,13A | 0.01 | 0,24b | 0.02 | 0,52C | 0.02 |
| 90 | s.f. | - | s.f. | - | 0.40 | 0.01 |
| s.f., no detectable | ||||||
Tabla 1: Valores medios y de desviación estándar de los índices de retención de forma para las tres muestras de helado producidas con diferentes edulcorantes. Diferentes letras minúsculas en la misma fila indican valores medios significativamente diferentes (p < 0,05).

Figura 5: Curvas de retención de forma y área para las tres muestras de helado producidas con diferentes edulcorantes. (A) Curva de retención de forma y (B) curvas de retención de área. La línea rosa representa la muestra de sacarosa, considerada como referencia; La línea amarilla representa la muestra de Sucromalt y la línea azul representa la muestra de eritritol. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
La muestra con eritritol también mostró una menor tasa de fusión, como lo demuestran los índices de fusión At/A0 (Tabla 2 y Figura 5B). A partir de los 45 min, la muestra de eritritol presentó la retención de área significativamente (p < 0,05), seguida de los helados que contenían sucromalt y sacarosa, respectivamente.
| SACAROSA | SUCROMALT | ERITRITOL | ||||
| Tiempo (min) | Rt/R0 | S.D. | Rt/R0 | S.D. | Rt/R0 | S.D. |
| 0 | 1.00 | - | 1.00 | - | 1.00 | - |
| 15 | 0,98A | 0.04 | 0,97A | 0.01 | 0,93A | 0.02 |
| 30 | 0,94A | 0.05 | 0,94A | 0.02 | 0,89A | 0.02 |
| 45 | 0,80A | 0.03 | 0,89A | 0.02 | 0,84A | 0.02 |
| 60 | 0,64A | 0.04 | 0,78b | 0.01 | 0,76b | 0.03 |
| 75 | 0,54A | 0.03 | 0,65A | 0.01 | 0,60A | 0.07 |
| 90 | s.f. | - | s.f. | - | 0.45 | 0.06 |
| s.f., no detectable | ||||||
Tabla 2: Valores medios y de desviación estándar de los índices de retención de área para las tres muestras de helado producidas con diferentes edulcorantes. Diferentes letras minúsculas en la misma fila indican valores medios significativamente diferentes (p < 0,05).
Los resultados también fueron confirmados por el análisis gravimétrico, cuyos datos se reportan en la Tabla 3 en términos de tiempo de inicio de fusión (tS) y velocidad de fusión (gramos/minuto). Sin embargo, en este caso no se encontraron diferencias significativas al aplicar el ANOVA (p > 0,05).
| SACAROSA | SUCROMALT | ERITRITOL | ||||
| significar | S.D. | significar | S.D. | significar | S.D. | |
| ts (mín.) | 15.3A | 1.4 | 16.4A | 1.4 | 17.2A | 2.6 |
| Velocidad de fusión (g/min) | 2.67A | 0.26 | 2.29A | 0.09 | 1,96A | 0.41 |
Tabla 3: Valores medios y de desviación estándar de los índices de fusión calculados por los métodos gravimétricos para las tres muestras de helado producidas con diferentes edulcorantes. ts, hora de inicio de la fusión. Diferentes letras minúsculas en la misma fila indican valores medios significativamente diferentes (p < 0,05).
La Figura 6 muestra algunas imágenes procesadas (paso 2.1) adquiridas durante las pruebas de fusión (paso 1.3) de las tres muestras de helado; Es posible notar la buena retención de la forma de todas las muestras y la tasa de fusión más baja del helado hecho con eritritol, que no se derritió por completo después de 90 min.

Figura 6: Fusión de las tres muestras de helado. Imágenes adquiridas cada 15 minutos durante la fusión de las tres muestras de helado producidas con diferentes edulcorantes. Imágenes procesadas de las tres muestras de helado durante la fusión. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
El CVS propuesto permite calcular los índices de retención de forma y área de las muestras de helado durante la fusión, además de visualizar el proceso de fusión. Se puede acoplar con el método gravimétrico tradicional aplicado para evaluar el comportamiento de fusión del helado5, para obtener resultados relacionados con el aspecto del helado. Esto es muy importante porque los consumidores evalúan su calidad también en función de la apariencia visual del producto, y la capacidad de mantener la forma durante el derretimiento está relacionada con la composición y la estructura del helado 1,3. La aplicación de este sistema en las industrias alimentarias puede mejorar el control de calidad, así como la investigación y el desarrollo de nuevas formulaciones.
El ejemplo de los resultados obtenidos para la fusión de tres muestras de helado diferentes para los edulcorantes utilizados demostró que el CVS propuesto es sensible a las diferentes composiciones (Tabla 1 y Tabla 2), incluso más que el método gravimétrico, que no fue capaz de resaltar diferencias significativas entre muestras (Tabla 3). La sensibilidad del índice de retención de forma a la formulación de helados también fue demostrada en nuestros trabajos previos 13,14,15,16. Debido a la alta sensibilidad del método propuesto, puede incluso sustituir al procedimiento gravimétrico.
Aparte de la preparación de la muestra de helado, los pasos más críticos en el CVS desarrollado están relacionados con una buena captura de imagen y segmentación7. Referir los datos de Rt y At a los valores iniciales calculados en el tiempo 0 evita posibles resultados engañosos debido a los diferentes experimentos establecidos entre réplicas. Sin embargo, los errores de paralaje durante la adquisición de imágenes podrían dar lugar a una sobreestimación del área de la muestra durante la fusión, especialmente si las imágenes recogidas en un solo ensayo no son consistentes debido a un cambio de posición de la cámara de una adquisición a otra. Por lo tanto, se debe prestar gran atención a la configuración del procedimiento de adquisición de imágenes, asegurándose de que la pantalla de malla de alambre metálico con la muestra en la parte superior esté perfectamente alineada con el objetivo de la cámara, y definiendo y asegurando cuidadosamente la posición de la cámara frente al gabinete termostático. Del mismo modo, una mala segmentación de la imagen puede llevar a una sobreestimación o subestimación del área del helado, pero también de H y W, lo que resulta en índices de retención de forma sin sentido. En este caso, la mayor fuente de error está representada por posibles picos en el borde de la porción de helado colocados en la malla de alambre, o burbujas que aparecen en la superficie del helado durante el derretimiento (Figura 7), que deben eliminarse de la forma brillante antes de medir el área de la caja y la caja W y H. Esto se puede solucionar mediante el uso de la función Dividir objeto del software de análisis de imágenes. Un fondo de alto contraste también es útil para una mejor segmentación de la imagen7. El color de fondo debe elegirse en función del color de la muestra de helado, y es deseable una alta saturación de color para un mejor contraste.

Figura 7: Posibles fuentes de error en la segmentación de la forma del helado. Las flechas rojas indican posibles picos y burbujas en la forma del helado que pueden llevar a un cálculo incorrecto del área, la altura y el ancho. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Si las imágenes están bien recogidas y procesadas, el CVS es aún más sensible y preciso que la metodología gravimétrica. De hecho, en los ejemplos mostrados, los coeficientes de variación para los análisis gravimétricos oscilaron entre el 4% y el 20%, por lo que todos los datos promedio no fueron significativamente diferentes (ANOVA, p > 0,05). Por el contrario, para los índices CVS, los valores del coeficiente de variación oscilaron entre 0,1% y 13%, revelando diferencias significativas entre las tres muestras de helado durante la fusión (Tabla 1 y Tabla 2). La reducción en la velocidad de fusión causada por el eritritol probablemente esté relacionada con la formación de cristales de azúcar amorfos durante la congelación del helado y la menor solubilidad de este edulcorante en comparación con la sacarosa y el sucromalt, lo que representa una mayor cantidad de agua congelada en el producto final13. Otras aplicaciones exitosas del CVS propuestas aquí se pueden encontrar en nuestros estudios previos 13,14,15,16.
Cuando se logra una buena estandarización del procedimiento de procesamiento de imágenes, el procesamiento automático de imágenes se puede configurar utilizando la función de grabación de macros del software de análisis de imágenes, lo que hace que el proceso de elaboración sea mucho más rápido. Por supuesto, siempre es necesaria una revisión precisa de los datos por parte del operador para evitar artefactos y datos erróneos. Además, se pueden realizar la elaboración de las curvas de retención de forma y área para calcular los parámetros cinéticos y sustituir el método gravimétrico.
El protocolo también se puede aplicar a otros productos alimenticios para los que la tasa de fusión y el índice de retención de la forma son importantes, como mousses y espumas (por ejemplo, crema de leche batida y albúmina de huevo). El punto más importante es la autosuficiencia de los productos, mientras que la temperatura durante las pruebas de fusión se puede adaptar al producto específico.
Los autores no tienen nada que revelar.
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Gabinete | Cavallo s.r.l. | FTX700 | Ubicación para la prueba de fusión |
| Cámara digital | Sony Group Corp | DSC-S650 | |
| Báscula digital | Gibertini Elettronica | EU-C 4002 LCD | |
| ImagePro Plus 7.0 | Media Cybernetics, Inc N | /A | Software de elaboración de análisis de imágenes |
| Microsoft Excel | Microsoft | N/A | Elaboración de datos y gráficos |
| Scalecom | Gibertini Elettronica | N/A Adquisición | software de báscula digital |
| Trípode | Manfratto | #055 |
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