Tinción con rojo de Picrosirius para la evaluación histopatológica semicuantitativa del depósito de colágeno en modelos murinos de rechazo crónico del aloinjerto pulmonar

Birte Ohm; Julia Thomé; Thierry Christmann; Maike Lind; Yoshito Yamada; Andreas Spörlein; Laura Anna Schneider; Steffen U. Eisenhardt; Wolfgang Jungraithmayr

doi:10.3791/66395

Artículo de método

Tinción con rojo de Picrosirius para la evaluación histopatológica semicuantitativa del depósito de colágeno en modelos murinos de rechazo crónico del aloinjerto pulmonar

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DOI:

10.3791/66395

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21 de marzo de 2025

Birte Ohm^*¹ , Julia Thomé^*² , Thierry Christmann² , Maike Lind² , Yoshito Yamada³ , Andreas Spörlein⁴ , Laura Anna Schneider² , Steffen U. Eisenhardt² , Wolfgang Jungraithmayr¹

¹Department of Thoracic Surgery, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ²Department of Plastic and Hand Surgery, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, ³Department of Thoracic Surgery, Kyoto University Hospital, ⁴Department of Otolaryngology, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

La tinción con rojo Picrosirius es un método semicuantitativo para evaluar objetivamente la deposición de colágeno en el remodelado fibrótico pulmonar murino de una manera resuelta espacialmente. Además de evaluar la deposición total de colágeno, la tinción Picrosirius Red permite diferenciar fibras de colágeno de diferentes grosores.

Resumen

La fibrosis es el sello fisiopatológico del rechazo crónico después del trasplante de pulmón y el principal obstáculo para la supervivencia a largo plazo del receptor. Existen varios modelos de trasplante pulmonar murino para el estudio del rechazo crónico. Sin embargo, muestran resultados heterogéneos en cuanto a los cambios fibróticos del injerto, y la extensión histológica de la fibrosis se informa principalmente de forma cualitativa. Por lo tanto, un enfoque resuelto espacialmente que permita el análisis estadístico puede ayudar a evaluar la fibrosis en estos modelos. Este estudio presenta la tinción con rojo Picrosirius para una evaluación semicuantitativa de la organización del colágeno en aloinjertos pulmonares murinos y la compara con las tinciones estándar de hematoxilina y eosina, tricrómico de Masson y Herovici. La tinción se realizó en secciones de dos modelos de trasplante murino diferentes en función de las incompatibilidades menores y mayores del complejo de histocompatibilidad (MHC). Se estableció el método para el análisis semicuantitativo de la organización del colágeno en secciones pulmonares completas. Por lo tanto, puede servir como herramienta para modelos experimentales murinos de enfermedades pulmonares fibróticas.

Introducción

El trasplante de pulmón es la opción terapéutica definitiva para los pacientes que padecen enfermedad pulmonar terminal. Sin embargo, la supervivencia a largo plazo se ve obstaculizada por el rechazo crónico, afectando al 50% de los receptores en los primeros cinco años postoperatorios¹. La remodelación fibrótica de las vías respiratorias pequeñas y del parénquima pulmonar es el rasgo histológico que subyace a la pérdida progresiva de la función pulmonar en el rechazo crónico del injerto pulmonar². Experimentalmente, el rechazo crónico del injerto pulmonar se puede modelar con el traspla....