La estimulación del ambiente frío se ha implicado en el desarrollo de diversas enfermedades crónicas. Por lo tanto, es crucial establecer modelos animales para la investigación preclínica. Este sistema responde a esta necesidad ofreciendo un dispositivo que crea un modelo de estímulo, cumpliendo con los requisitos de la investigación básica sobre mecanismos patogénicos.
Artículo de método
Establecimiento de un modelo de ratón para la inhalación de aire a temperatura extremadamente baja del tracto respiratorio
En este artículo
Resumen
Resumen
Actualmente, la construcción de un modelo de ratón para la estimulación ambiental fría emplea placas de frío-calor y dispositivos de enfriamiento portátiles. Estos métodos pueden cumplir parcialmente los requisitos para estudiar las respuestas y los efectos reguladores de la piel o los circuitos neuronales del ratón a la estimulación con frío. Numerosos estudios clínicos han corroborado la correlación entre la exposición a ambientes de baja temperatura y el desarrollo de diversas enfermedades. Recientemente, ha habido un énfasis creciente en el intercambio continuo de información entre órganos y tejidos, proporcionando una perspectiva novedosa para abordar problemas de larga data dentro del cuerpo humano. Sin embargo, las instalaciones existentes no pueden construir un modelo para ratones que inhalan aire frío.
Aunque colocar ratones en un ambiente frío parece atractivo, tiene limitaciones considerables. Mientras los ratones inhalan aire frío, su piel también está siendo estimulada por el ambiente frío, por lo que no está claro si los cambios patológicos resultantes se deben a la estimulación pulmonar a través de la interacción de órganos distantes o a los receptores de la piel y la transmisión de señales neuronales. Esto crea una confusión considerable en la investigación relacionada. Este esquema presenta un nuevo enfoque para la construcción de un modelo de ratón para la estimulación de la inhalación de aire frío extremo. Este dispositivo permite a los ratones inhalar gases a temperaturas extremadamente bajas mientras sus cuerpos permanecen a una temperatura normal. Maximiza la simulación de los efectos estimulantes de las temperaturas ambientales extremas en ratones y satisface las necesidades de investigación para estudiar la relación entre las temperaturas ambientales extremas y las enfermedades relacionadas.
Introducción
Este método proporciona principalmente un modelo de estimulación del aire a temperatura extremadamente baja en ratones que utilizan un dispositivo de retroalimentación de temperatura de refrigeración de semiconductores no invasivo, estandarizado, estable y por lotes. Los experimentos clínicos relacionados con las bajas temperaturas han confirmado una estrecha relación con la incidencia y el pronóstico de diversas enfermedades. Un estudio de series temporales en el que participaron 272 ciudades importantes de China obtuvo un total de 1.826.186 casos de muertes no accidentales. La relación entre la temperatura y la mortalidad indica consistentemente una curva en forma de J invertida, con la fase de altas tasas de mortalidad debido al frío siendo significativamente más larga que otras temperaturas. Esto sugiere que el impacto de las bajas temperaturas en el ictus y las enfermedades cardiovasculares es ilimitado a la fase fría; Hay una influencia continua durante un período después de que la fase fría ha disminuido.
Entre las muertes no accidentales, el 14,33% se puede atribuir a factores de temperatura ambiental, con el frío moderado (-1,4 a 22,8 °C) y el frío extremo (-6,4 a -1,4 °C) que representaron el 10,49% y el 1,14%, respectivamente. Las causas de muerte incluyen enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares con un 17,48%, enfermedad coronaria con un 18,76%, accidente cerebrovascular isquémico con un 14,09%, accidente cerebrovascular hemorrágico con un 18,10%, enfermedades del sistema respiratorio con un 10,57% y enfermedad pulmonar obstructiva crónica con un 12,57%1. En China, los estudios epidemiológicos del ictus sugieren un claro gradiente de norte a sur2. En el clima gélido del noreste de China, la prevalencia de accidente cerebrovascular es 2,36 veces mayor en comparación con la región sur3. Numerosas investigaciones han confirmado el impacto directo de los ambientes de baja temperatura en las tasas de mortalidad y la incidencia de accidentes cerebrovasculares 4,5,6. En consecuencia, las diferencias significativas de temperatura climática representan un factor ambiental que no puede ser ignorado.
La falta de un razonamiento científico eficaz que explique la correlación entre los entornos de baja temperatura y el aumento de las tasas de accidentes cerebrovasculares y problemas cardíacos sigue siendo un tema de investigación. Si bien la sabiduría convencional sugiere que las temperaturas frías pueden aumentar la presión arterial a través de la irritación de la piel y la excitación simpática7, las personas generalmente toman medidas para aislarse y mantener el equilibrio de la temperatura corporal en respuesta a las condiciones frías. Cuando se exponen a temperaturas frías, los humanos modernos confían en su sistema respiratorio en lugar de la piel como principal mecanismo de defensa. Si bien la ropa gruesa puede proteger la piel del frío externo, no puede evitar inhalar aire frío en el tracto respiratorio, exponiendo la tráquea y los alvéolos a una intensa estimulación por frío. Los métodos actuales para construir modelos animales para la estimulación a baja temperatura se dividen principalmente en dos aspectos. En primer lugar, numerosos estudios se han centrado en explorar la respuesta y los mecanismos reguladores de la piel del ratón a la estimulación a baja temperatura. Un método consiste en colocar ratones en un plato que pueda controlar los cambios de temperatura (4-25 °C) para investigar los mecanismos reguladores específicos de la regulación de la temperatura corporal y el comportamiento de evitación en respuesta a estímulos fríos 8,9. Otros estudios han colocado dispositivos de enfriamiento en la espalda de ratones para explorar el papel de los circuitos neuronales enla regulación de la temperatura corporal.
Por el contrario, varios estudios han colocado ratones en cámaras pequeñas con temperaturas variables (4-30 °C). La investigación de Lal y sus colegas y Qian et al. utilizó este método para construir un modelo de ratón de estimulación con frío para explorar los circuitos neuronales que regulan el control neuroendocrino del comportamiento de alimentación inducido por el frío11,12. Sin embargo, los dos métodos mencionados tienen sus limitaciones. En primer lugar, la temperatura más baja es de 4 °C, lo que es insuficiente para simular la estimulación del aire a temperaturas extremadamente bajas. Este método no puede excluir los efectos reguladores de la piel y los circuitos neuronales en el ambiente frío. Como sitio primario de intercambio de aire, los pulmones también son órganos donde se concentran las neuronas sensibles al frío13,14. El papel regulador de las neuronas sensibles al frío en diversas enfermedades también ha sido confirmado por varios investigadores 15,16,17. Como resultado, se necesita urgentemente un método para construir de manera estable, masiva y normativa un modelo animal de baja temperatura del tracto respiratorio. Comprender el papel regulador de los pulmones y las neuronas sensibles al frío en diversas enfermedades crónicas bajo estimulación de aire a temperatura extremadamente baja es esencial para proporcionar una base teórica para prevenir y tratar el accidente cerebrovascular, la enfermedad coronaria y las enfermedades del sistema respiratorio en regiones frías. Nuestro equipo abordó esta brecha crítica mediante la construcción de un dispositivo de baja temperatura en los últimos dos años. Este dispositivo se caracteriza por su repetibilidad, practicidad, estructura simple y bajo costo, lo que lo hace adecuado para tales estudios.
Protocolo
El Comité de Ética de Animales Experimentales ha aprobado todos los procedimientos que involucran animales en el Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Harbin.
1. Montaje del dispositivo
NOTA: Consulte la Figura 1 para ver los componentes del dispositivo.
- Utilice conectores metálicos para asegurar dos juegos de carcasas de latón a dos conjuntos de chips de refrigeración de semiconductores. Aplique grasa de silicona térmicamente conductora entre la carcasa de latón y el chip de enfriamiento del semiconductor.
- Aplique grasa térmica entre la carcasa de latón y el chip de enfriamiento del semiconductor.
- Conecte dos grupos de ventiladores en cada pieza de refrigeración de semiconductores a continuación. Asegúrese de que la carcasa de latón, el ventilador, el chip de enfriamiento del semiconductor y la grasa de silicona térmicamente conductora estén conectados de forma segura como una unidad completa.
- Coloque el dispositivo en su conjunto en el frasco colector de gas y las dos placas de cubierta de las ranuras.
- Instale las placas por encima y por debajo del frasco colector de gas.
- Conecte la tubería de entrada de agua y las tuberías de salida de agua a la entrada y salida de agua de la carcasa de latón, respectivamente.
- Conecte cuatro grupos de carcasas de latón a la parte superior e inferior del frasco de recolección de gas con tuberías.
- Conecte la bomba de agua a la tubería de entrada de agua.
- Coloque la tubería de salida de agua en la cisterna.
- Conecte cuatro juegos de enfriadores de semiconductores y bombas de agua a dos juegos de fuentes de alimentación (12 V y 40 A).
2. Preparación del animal para el experimento
NOTA: Utilizamos un ratón macho C57Bl/6 de 4 semanas de edad para estos experimentos. Se recomienda dejar que el ratón se adapte al fijador durante 3-5 días antes de la preparación del modelo. El entorno experimental debe estar a temperatura ambiente y mantenerse en silencio para evitar ruidos durante todo el experimento.
- Asegure el mouse en el fijador: Coloque el mouse en el fijador, colocando la parte delantera de la nariz del mouse en la apertura del fijador. Use un tapón de esponja a juego para llenar y asegurar la parte trasera del fijador, asegurándose de que tenga orificios de ventilación. A continuación, coloque el fijador del ratón en la ranura cilíndrica del frasco de recolección de gas (Figura 1D).
3. Flujo de operación experimental
- Prepare una mezcla de agua helada y colóquela en la cisterna.
NOTA: Para este paso, asegúrese de que el nivel del agua de la mezcla de hielo y agua sea más alto que el de la bomba para garantizar que la mezcla se agregue a tiempo durante todo el experimento. No se recomienda usar agua a temperatura ambiente - Coloque la bomba de agua dentro de la mezcla de agua helada y asegúrese de que la manguera de salida esté sumergida.
- Coloque la sonda del sensor de temperatura dentro del orificio de medición de temperatura del frasco de recolección de gas.
- Conecte la bomba de agua a su fuente de alimentación y enciéndala.
- Conecte la fuente de alimentación al controlador de temperatura, conecte el adaptador de corriente de la unidad de refrigeración a la toma de corriente del controlador de temperatura y establezca el rango de temperatura deseado en el controlador.
- Configure el rango de temperatura del controlador de temperatura.
- Después del experimento, retire el mouse y vuelva a colocarlo en su entorno de vivienda.
- Apague la fuente de alimentación del controlador de temperatura.
- Apague la bomba de agua.
4. Imágenes térmicas
NOTA: Para demostrar y verificar que los ratones pueden inhalar aire a una temperatura extremadamente baja mientras mantienen la temperatura corporal normal dentro de este aparato, se midió la temperatura en el frasco de recolección de gas utilizando una cámara termográfica (Figura 2).
- Utilice una cámara termográfica de mano para determinar las temperaturas tanto del orificio de aire como del orificio de medición de temperatura del frasco de recolección de gas desde una distancia óptima.
- Coloque el punto láser rojo, que indica la ubicación de medición, con precisión en el centro del área de medición de temperatura designada.
- Empleando la misma metodología, se vuelve a medir la temperatura corporal de los ratones.
Resultados
Podemos observar la construcción general de este dispositivo, que incluye un chip de refrigeración semiconductor, grasa de silicona térmicamente conductora, un frasco de recolección de gas, un controlador de temperatura, un ventilador, un sistema de circulación de enfriamiento por agua, un fijador de mouse y un adaptador de corriente. Una sola unidad puede acomodar simultáneamente las necesidades de modelado de hasta 16 ratones (Figura 1A,B). El frasco de recolección de gas, el sistema de circulación de enfriamiento de agua, el chip de refrigeración de semiconductores, el ventilador y el fijador del mouse constituyen el cuerpo principal del dispositivo (Figura 1C). Dentro del cuerpo principal del dispositivo, el extremo frontal del fijador del ratón se puede insertar en el frasco de recolección de gas, asegurando que la nariz del ratón inhale directamente el gas a baja temperatura (Figura 1D). Se pueden observar cuatro conjuntos de ventiladores en la parte superior interna del cuerpo principal del dispositivo, con la parte posterior de los ventiladores conectados al chip de refrigeración semiconductor a través de grasa de silicona térmicamente conductora (Figura 1E). El fijador del ratón, utilizado junto con el dispositivo, es cilíndrico, con la parte delantera extensible en el frasco de recolección de gas. El fijador tiene orificios de ventilación en el medio y un tapón en la parte trasera para asegurarlo, cumpliendo con los requisitos de fijación para ratones de diferentes tamaños (Figura 1F).
Durante el experimento, generalmente se emplea una sonda de sensor de temperatura para monitorear continuamente la temperatura dentro del frasco de recolección de gas en tiempo real, como se detalla en el paso del protocolo 3.3. Para demostrar y verificar que los ratones pueden inhalar aire a temperatura extremadamente baja mientras mantienen la temperatura corporal normal dentro de este aparato, se midió la temperatura en el frasco de recolección de gas utilizando una cámara termográfica (Figura 2). Se observó que la temperatura dentro del frasco de recolección de gas era de aproximadamente -20 °C. Los resultados indicaron claramente que la temperatura corporal de los ratones dentro del dispositivo de restricción no se vio afectada. Los resultados confirman que este dispositivo puede permitir a los ratones inhalar gases a temperaturas extremadamente bajas mientras mantienen la temperatura corporal en un estado normal. En la actualidad, varios investigadores se están centrando en el impacto y los mecanismos patológicos de las enfermedades crónicas en condiciones extremas de baja temperatura. Este dispositivo puede satisfacer las necesidades de dicha investigación. Mediante la aplicación de este dispositivo, se puede construir un lote estable de modelos animales, sentando una base sólida para estudios posteriores.
Figura 1: La estructura general del dispositivo y el diagrama de descomposición de cada parte. (A) La visualización general del dispositivo en estado experimental. (B) La vista hacia arriba del dispositivo general indica dos juegos de láminas de refrigeración de semiconductores y carcasas de latón en el fondo del frasco de recolección de gas. (C) Imagen parcialmente ampliada de la jarra colectora de gas. (D) Después de eliminar la imagen ampliada localmente del dispositivo superior del tanque, se puede observar que el extremo de la cabeza del fijador del ratón se puede extender en el frasco durante el experimento, asegurando que solo la nariz del ratón esté expuesta al ambiente de baja temperatura. (E) Imagen ampliada del ventilador. (F) La imagen del dispositivo de fijación del mouse indica el extremo de la cabeza del dispositivo, el orificio de ventilación y el tapón de pegamento en la cola. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2: El diagrama de monitoreo del efecto de enfriamiento durante el funcionamiento del dispositivo. (A) Bajo el monitoreo de un termómetro de infrarrojo lejano, todo el dispositivo se puede observar en un estado de baja temperatura. El material aislante unido al exterior del dispositivo indica una temperatura de 13 °C. (B) Utilizando un termómetro de infrarrojo lejano para medir la temperatura del puerto de ventilación donde se coloca el soporte del ratón durante el experimento, se puede observar que la temperatura dentro del recipiente de recolección de gas es de -21,1 °C. El dispositivo ha cumplido con nuestros requisitos de diseño. (C) En el experimento, se sacó a los ratones del dispositivo y se utilizó el termómetro de infrarrojo lejano para medir la temperatura de la nariz y el cuerpo de los ratones. Los resultados demostraron que la temperatura de la nariz de los ratones era significativamente más baja, mientras que la temperatura del cuerpo se mantenía normal. (D) Se diseña un orificio de medición de temperatura en la parte superior del dispositivo experimental. Se utilizó un termómetro de infrarrojo lejano para medir la temperatura dentro del frasco colector de gas a través del orificio de medición de temperatura, lo que indica que la temperatura interna del frasco colector de gas es de -21 °C, lo que demuestra que el dispositivo se puede utilizar para estudios de temperatura fría. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Discusión
Al construir un modelo de estimulación a baja temperatura, son necesarios varios pasos y precauciones clave para garantizar la precisión del experimento y el bienestar de los animales. Utilice una mezcla de agua helada en lugar de agua a temperatura ambiente para mantener un estado de baja temperatura del agua de refrigeración durante todo el experimento, lo que ayuda a simular entornos de temperatura extremadamente baja. Asegúrese de que el sistema de recirculación de agua de enfriamiento no esté obstruido para garantizar el funcionamiento eficiente del sistema de refrigeración. Al preparar una mezcla de agua y hielo, tenga en cuenta los siguientes puntos: (1) Una mezcla de agua y hielo significa hielo sólido debajo y agua por encima del hielo sólido; (2) Observe cuidadosamente el proceso de derretimiento del hielo sólido durante el experimento, ya que esto puede hacer que el hielo flote. Este tipo de hielo flotante podría obstruir la superficie de la bomba, dificultando así la disipación efectiva del calor. Al final del experimento, apague la fuente de alimentación de la unidad de refrigeración antes de la bomba de agua. Esto asegura que el sistema de recirculación de agua pueda continuar disipando el calor del semiconductor de refrigeración después del apagado, evitando aumentos bruscos de temperatura que podrían afectar los resultados. Para el control de la temperatura, este dispositivo utiliza un controlador de temperatura inteligente. La fuente de alimentación del dispositivo está conectada al controlador de temperatura inteligente y el controlador se utiliza para establecer el rango de temperatura. Durante el experimento, la sonda de temperatura se coloca en el frasco colector de gas para monitorear el cambio de temperatura continuamente. Una vez que la temperatura supera el rango establecido, el controlador desconecta automáticamente la fuente de alimentación del dispositivo para mantener la temperatura dentro del rango establecido.
Si la eficiencia de la refrigeración se reduce significativamente o el dispositivo de refrigeración falla durante el experimento, considere las siguientes posibilidades: (1) Asegúrese de que la bomba esté en la mezcla de agua helada; (2) compruebe si la temperatura del agua es extremadamente alta; (3) inspeccione la hoja de refrigeración del semiconductor en busca de daños; (4) Verifique que la línea de conexión de alimentación de la lámina de refrigeración del semiconductor esté rota.
Este dispositivo tiene limitaciones. Durante el experimento, se necesita una gran cantidad de mezcla de agua helada para enfriar la lámina de refrigeración del semiconductor, y la eficiencia de enfriamiento del dispositivo se ve afectada por la eficiencia de enfriamiento del chip de enfriamiento del semiconductor. Las mejoras futuras pueden incluir el diseño del dispositivo de refrigeración del ciclo del agua como un dispositivo de circuito cerrado y el uso de líquido de refrigeración o anticongelante como medio de enfriamiento. Al mismo tiempo, la optimización de la apariencia del equipo y el tratamiento de las fugas desnudas de las tuberías y las líneas de conexión eléctrica mejorarán la comodidad de transportar y popularizarán el dispositivo. Además, para mantener una inhalación constante y estable de gas a baja temperatura por parte de los ratones, se empleó un dispositivo de fijación para ratones y un tapón de goma para inmovilizar a los ratones. Debido a la inhalación de gas extremadamente frío, el proceso de estimulación tuvo una duración limitada para salvaguardar el bienestar de los ratones y prevenir la congelación y los problemas psicológicos. Los esfuerzos futuros se centrarán en mejorar el accesorio para minimizar el daño adicional durante la fase de estimulación en ratones.
Esta tecnología no solo es importante para la investigación científica básica sobre los efectos de los ambientes de baja temperatura en los organismos biológicos, sino que también tiene aplicaciones potenciales en el estudio de la patogénesis de enfermedades crónicas en poblaciones que viven en regiones frías. La definición de aire extremadamente frío varía según las diferentes regiones y entornos. Sin embargo, al configurar el sistema de control de temperatura, el dispositivo se puede ajustar para cumplir con los requisitos de investigación para cualquier temperatura que oscile entre la temperatura ambiente y los -20 °C. Esta flexibilidad garantiza que el dispositivo pueda adaptarse a las diversas necesidades de temperatura de los investigadores. Además, contribuye a explorar el papel de los pulmones en la comunicación interorgánica en condiciones de baja temperatura, proporcionando una base sólida para la prevención y el tratamiento de accidentes cerebrovasculares, enfermedades coronarias y enfermedades del sistema respiratorio en regiones frías. Siguiendo estos pasos y precauciones, los investigadores pueden construir un modelo animal estable y estandarizado para estudiar los efectos de los ambientes de temperaturas extremadamente bajas en los organismos biológicos, proporcionando una base científica para prevenir y tratar enfermedades relacionadas.
Divulgaciones
Los autores no tienen conflictos de intereses que revelar.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| carcasa de latón | Shenzhen Haida cisterna de la empresa | ||
| Shenzhen Gongdecheng | |||
| ChaoJingYin electoronic.,LTD | 4010 | 12 V | |
| Jarra de recolección de gas | Shenzhen Gongdecheng tubo | ||
| Shanghai Shenchen caucho y plástico Fijador de ratón de fábrica | |||
| de productos | Tecnología Lanjieke | ||
| energía | Shenzhen Haida empresa | 12 V 40 A | |
| Chip de enfriamiento de semiconductores | Shenzhen Haida empresa de equipos electrónicos de alta tecnología | TEC2-19006 | Refrigeración de doble capa |
| Tapón de esponja | Shenzhen Gongdecheng industria | ||
| Sujetador de acero inoxidable | Shenzhen Haida equipo electrónico de alta tecnología empresa | ||
| grasa de silicona termoconductora | Shenzhen Haida empresa de equipos electrónicos de alta tecnología | DRG102 | |
| bomba de agua | Shenzhen Jutai pump Co.,LTD | DC005 | 12 V |
| Adaptador de corriente de la bomba de | agua Chaoke fábrica de adaptadores de corriente | 1210 | 100-240 V 50-60 HZ 12 V |
Referencias
- GBD 2016 Neurology Collaborators. Global, regional, and national burden of neurological disorders, 1990-2016: A systematic analysis for the global burden of disease study 2016. Lancet Neurol. 18 (5), 459-480 (2016).
- Wang, W., et al. Prevalence, incidence, and mortality of stroke in china: Results from a nationwide population-based survey of 480 687 adults. Circulation. 135 (8), 759-771 (2017).
- Report on Stroke Prevention and Treatment in China Writing Group. The Chinese stroke prevention report 2019 profile. Chinese Journal of Cerebrovascular Disease. 17 (05), 272-281 (2020).
- Gasparrini, A., et al. Mortality risk attributable to high and low ambient temperature: A multicountry observational study. Lancet. 386 (9991), 369-375 (2015).
- Yang, J., et al. The burden of stroke mortality attributable to cold and hot ambient temperatures: Epidemiological evidence from China. Environ Int. 93, 232-238 (2016).
- Guo, Y., et al. Global variation in the effects of ambient temperature on mortality: A systematic evaluation. Epidemiology. 25 (6), 781-789 (2014).
- Bai, L., et al. Increased coronary heart disease and stroke hospitalisations from ambient temperatures in Ontario. Heart. 104 (8), 673-679 (2018).
- Jung, S., et al. A forebrain neural substrate for behavioral thermoregulation. Neuron. 110 (2), 266-279 (2022).
- Liu, R., et al. Lateral habenula neurons signal cold aversion and participate in cold aversion. Neurochem Res. 49 (3), 771-784 (2024).
- Feng, C., et al. Cold-sensitive ventromedial hypothalamic neurons control homeostatic thermogenesis and social interaction-associated hyperthermia. Cell Metab. 34 (6), 888-901 (2022).
- Lal, N. K., et al. Xiphoid nucleus of the midline thalamus controls cold-induced food seeking. Nature. 621 (7977), 138-145 (2023).
- Qian, S., et al. A temperature-regulated circuit for feeding behavior. Nat Commun. 13 (1), 4229(2022).
- Zhao, J., Lin King, J. V., Paulsen, C. E., Cheng, Y., Julius, D. Irritant-evoked activation and calcium modulation of the trpa1 receptor. Nature. 585 (7823), 141-145 (2020).
- Balestrini, A., et al. A trpa1 inhibitor suppresses neurogenic inflammation and airway contraction for asthma treatment. J Exp Med. 218 (4), e20201637(2021).
- Hoebart, C., et al. Trpa1 as target in myocardial infarction. Int J Mol Sci. 24 (3), 2516-2536 (2023).
- De Almeida, A. S., et al. Role of trpa1 expressed in bone tissue and the antinociceptive effect of the trpa1 antagonist repeated administration in a breast cancer pain model. Life Sci. 276, 119469(2021).
- Wang, Q., et al. Trpa1 regulates macrophages phenotype plasticity and atherosclerosis progression. Atherosclerosis. 301, 44-53 (2020).
Reimpresiones y permisos
