Artículo de método

Procedimiento de implante quirúrgico y configuración de cableado para la monitorización continua de EEG/ECG a largo plazo en conejos

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DOI:

10.3791/67620

24 de enero de 2025

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En este artículo

Resumen

El estudio describe un protocolo para el diseño, la fabricación y la colocación de un nuevo sistema de registro continuo de EEG/ECG en conejos. Este sistema cableado permite registros continuos de EEG/ECG desde nueve electrodos distintos en la cabeza y el tórax, lo que facilita evaluaciones completas de la actividad eléctrica en el cerebro y el corazón.

Resumen

Un enfoque multisistémico que incluye la recopilación continua de registros de electroencefalograma (EEG) y electrocardiograma (ECG) facilita una evaluación integral de la actividad eléctrica en el cerebro y el corazón, particularmente antes y alrededor de los eventos episódicos. Sobre la base de nuestro protocolo anterior que facilita la recopilación de registros intermitentes de EEG/ECG de conejos conscientes y restringidos, desarrollamos un protocolo para la recopilación de registros continuos de EEG/ECG de conejos sin restricciones. Este nuevo método permite grabaciones de alta calidad las 24 horas del día, los 7 días de la semana en la jaula de alojamiento, lo que captura el rango normal de estados fisiológicos y permite que los conejos se muevan, coman, beban y duerman libremente. Permite evaluaciones exhaustivas de la prevalencia, incidencia y susceptibilidad a anomalías en el EEG/ECG, convulsiones, arritmias y muerte súbita. Este procedimiento implica la colocación quirúrgica de electrodos subdérmicos y el diseño y fabricación de un sistema de cableado robusto que es impermeable al daño de los conejos. El procedimiento quirúrgico incluye dos incisiones y el túnel subdérmico de nueve electrodos y cables que salen a través de un puerto hecho a medida. El conector externo se conecta a un mazo de cables que incluye un eslabón giratorio eléctrico, lo que permite el libre movimiento del conejo en toda su jaula. Además, los cables están encerrados en una funda metálica suspendida por un cable retractor del techo de la jaula del conejo. A continuación, los cables se conectan a un amplificador/digitalizador para la adquisición de registros continuos de EEG/ECG de alta calidad.

Introducción

Previamente desarrollamos un protocolo para recoger grabaciones agudas (< 5 h) de vídeo/EEG/ECG de conejos. Implica el uso de nueve electrodos subdérmicos de EEG y ECG, la colocación del conejo en un sistema de retención y el seguimiento cercano del conejo por parte del investigador durante todoel tiempo que dure el registro. Si bien este sistema proporciona grabaciones de video/EEG/ECG de alta calidad, tiene varias limitaciones. Las arritmias, las convulsiones epilépticas y otras anomalías del EEG/ECG pueden ser desencadenadas por diversos sustratos fisiológicos y ambientales, por lo que estos eventos pueden p....

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Protocolo

El estudio describe un protocolo para el diseño, la fabricación y la colocación de un nuevo sistema de registro continuo de EEG/ECG en conejos. El protocolo está aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad Médica SUNY Upstate. Se siguen todos los requisitos de la IACUC para el bienestar animal, las directrices quirúrgicas y los criterios de valoración del estudio. Los investigadores y el profesorado/personal del Departamento de Investigación con Animales de Laboratorio de SUNY Upstate realizan controles regulares de bienestar y atención general. Cualquier lesión, malestar, infección o ef....

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Resultados

Con esta técnica quirúrgica no se registraron casos de mortalidad durante ni después de la cirugía. Existe el riesgo de infección y cicatrización incompleta de la herida, especialmente si el conejo se rasca o muerde en el sitio de la incisión. Los antibióticos preoperatorios y postoperatorios, cubrir la incisión con una gasa seca y estéril y colocar un chaleco en el conejo ayudan a proteger el sitio quirúrgico y permiten una mejor cicatrización. Todas las grabaciones se llevan a cabo en l.......

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Discusión

Presentamos un protocolo detallado para la generación de un mazo de cables personalizado, la fabricación interna de un implante y el procedimiento para la implantación estéril de los electrodos, cables y puertos de EEG/ECG. Esta configuración facilita la recopilación de registros continuos de EEG/ECG de alta calidad de una manera eficiente, segura y financieramente viable. Este protocolo genera un sistema en el que se pueden recoger tanto los datos de EEG como de ECG en conejos sin neces.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar. Una parte de la información contenida en este manuscrito también está presente en la tesis de maestría de la primera autora (Laura Williams) con el permiso adecuado.

Agradecimientos

Deseamos agradecer a Pradeep Dumpala, DVM PhD, Sarah Blair, MA, y al personal de cría de SUNY Upstate Medical University por su dedicación y atención al cuidado de los conejos. NIH-NINDS (1R61NS133273), Departamento de Farmacología, Universidad Médica del Norte del Estado de SUNY

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Envoltura termorretráctil 3:1 con adhesivoN/AWireflyTubo de poliolefina revestido con adhesivo diseñado para encogerse 1/3 de diámetro cuando se calienta. Aísle los electrodos al conectar cables y enchufes, conectando piezas del arnés de cables entre sí
Almohadillas absorbentes-cualquierAlmohadillas absorbentes para la recolección de fluidos
BD E-Z Scrub 116 Cepillo/esponja quirúrgica371163BD E-Z Scrub3% PCMX Cepillo/esponja para fregar Para fregar antes de operar para la técnica aséptica
Punzones de biopsia1315ARGENT, McKessonCuchilla de corte circular de 6 mm para incisión circular para puerto
Buprenorfina--0.3 mg/mL Buprenorfina Para control del dolor postoperatorio
Conectores de topeX003C7S38PSVAAREmpalme de cobre estañado Conectores de tope no aislados de 26-22 AWG Conexión de cables de fibra de carbono desde los electrodos hasta el enchufe
Pluma de cauterizaciónhttps://jorvet.com/product/cautery-kit-accessories/Laboratorios Jorgensen, Inc.Pluma de cauterización Bovie de mano Para controlar el sangrado
Buje de cable coaxial a través de la paredCOAX BUSH WHCasquillo de plástico eléctrico comercialcon abertura de 6,9 mm de diámetro interior y poste de 1 cm + puerto de alambre
Envoltura cohesivahttps://healthypets.com/vetone-cohesiant-wrap-blue-2x5yd/AmerisourceBergen4in x 5yd envoltura autoadhesiva Para protección de heridas postoperatorias
Bisturí desechable con mangohttps://www.securos.com/Securos Surgical AmerisourceBergenBisturíes desechables estériles para hacer incisiones
AnilloTaidacentAnillo colector conductor de bola de alta velocidad 12 vías 2A Anillo colector conector rotativo de junta rotativa, anillo colector eléctrico para permitir el libre movimiento del animal sin atar el arnés de cables
Lubricante para ojos prohttps://domespharma.us/eye-lube-pro-detailer-final-v6/SentrxGel lubricante Previene la sequedad/daño ocular durante la anestesia
Adhesivopara instrumentos de precisión 503763 WorldPara el cierre de sitios de incisión 
IsofluranoANADA # 200-129IsospireIsoflurano Para anestesia
Alcohol isopropílico500205VETone70% alcohol isopropílico Antiséptico tópico
Jet Liquid1403Lang Dental Mfg. Co., Inc.Líquido de resina acrílica de curado rápido Líquido de resina acrílica dental para sellar el buje y los cables para el puerto de salida del cable. También se usa para sellar el puerto a la piel.
Polvo de sombra de diente Jet1420Lang Dental Mfg. Co., Inc.Polvo de resina acrílica provisional de corona y puente de curado rápido. Polvo acrílico dental para sellar el buje y los cables para el puerto de salida del cable. También se usa para sellar el puerto a la piel.
Ketamina--100 mg/mL Ketamina Para sedación
Revestimiento de ducha de metalHOS-960MManguera de ducha de metal de repuesto ultraflexible Waterpik, extra larga para cabezales de ducha de mano, 96 pulgadas, cromo Revestimiento de metal para arnés de cables
Juego de Electrodos Condicionales/CT MR y ExtensiónMRQW32415RhythmLinkSistema de conexión rápida con enchufes macho-hembra y 8 cables. Enchufes utilizados para la conexión puerto-arnés de cables. Cables y conectores DIN utilizados para el mazo de cables
Suturas de monofilamento azul de polipropilenoP8665SECUROPRO3-0, FS-2, sutura de corte inverso de 18". Cierre cualquier incisión quirúrgica
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Juntade goma E-3603 NSF-51Saint GobainTubo de goma transparente cortado a 1,5 cm de ancho. Junta para protección/mantenimiento de un sello.
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Referencias

  1. Bosinski, C., Wagner, K., Zhou, X., Liu, L., Auerbach, D. S. Multi-system monitoring for identification of seizures, arrhythmias and apnea in conscious restrained rabbits. J Vis Exp. (169), e62256(2021).
  2. Finlay, M. C., Lambiase, P. D., Ben-Simon, R., Taggart, P.

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