Artículo de método

Trasplante ortotópico de extremidades delanteras de rata

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DOI:

10.3791/68050

22 de julio de 2025

* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

En este trabajo se presenta un protocolo para demostrar la viabilidad microquirúrgica del trasplante de extremidades anteriores de rata. Este modelo puede servir como una importante plataforma traslacional para la investigación de VCA.

Resumen

El alotrasplante compuesto vascularizado (VCA, por sus siglas en inglés) implica el trasplante de múltiples tipos de tejidos, incluidos piel, músculos, huesos y nervios, lo que ofrece una opción reconstructiva prometedora para pacientes con lesiones traumáticas graves o desfiguraciones. A pesar de su potencial transformador, la VCA se ha enfrentado a importantes desafíos, como el rechazo del injerto, las complicaciones de la inmunosupresión crónica y las complejidades de la recuperación neuromuscular.

Utilizamos un modelo de extremidad delantera de rata como una plataforma rentable y anatómicamente relevante para abordar estos desafíos. La extremidad delantera de la rata refleja de cerca la anatomía de la extremidad humana, lo que mejora el impacto traslacional de nuestros hallazgos. Estudios previos han validado este modelo para medir de forma fiable y reproducible la recuperación funcional, estableciéndolo así como una herramienta clave para evaluar la trayectoria de rechazo de los injertos de extremidades anteriores.

Además, el modelo ofrece una valiosa oportunidad para explorar enfoques terapéuticos innovadores y sirve como una buena plataforma traslacional para nuevas técnicas de preservación. A través de una mayor investigación de este modelo, nuestro objetivo es profundizar nuestra comprensión de los mecanismos detrás del rechazo del injerto y la recuperación neuromuscular. En última instancia, este trabajo se esfuerza por allanar el camino para mejorar los resultados clínicos de la VCA, abordando tanto las limitaciones actuales como los desafíos futuros en la medicina de trasplantes.

Introducción

El alotrasplante compuesto vascularizado (VCA, por sus siglas en inglés) es un procedimiento que cambia la vida para reconstruir defectos tisulares graves. VCA se refiere al trasplante de un tejido compuesto que consta de piel, músculos, huesos, tejido conectivo, vasos sanguíneos y nervios. Un mayor refinamiento y exploración de las técnicas de VCA beneficiaría profundamente a los pacientes que sufren lesiones traumáticas o desfiguraciones1. Sin embargo, su aplicación más amplia se ve desafiada por obstáculos continuos como el rechazo del injerto, las complicaciones de la inmunosupresión a largo plazo, la recup....

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Protocolo

Los procedimientos quirúrgicos se llevaron a cabo bajo los protocolos aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales (RA18M74) de la Universidad Johns Hopkins de acuerdo con las pautas establecidas por los Institutos Nacionales de Salud y la Asociación Americana para la Acreditación del Cuidado de Animales de Laboratorio.

1. Procedimiento del donante (Figura 1)

  1. Realizar la inducción de la anestesia mediante inhalación de isoflurano a una concentración del 5% y mantener al 1% durante todo el procedimiento. Comience el procedimi....

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Resultados

La supervivencia del injerto se puede monitorear y determinar a través de la observación macroscópica. En la Figura 3 se muestran imágenes representativas del seguimiento a corto plazo (POD7) y a largo plazo (POD120). El injerto pudo recuperarse sin signos aparentes de necrosis. Los datos de supervivencia se muestran en la Figura 4. Tanto las muestras de piel como las de músculo se recolectan en el punto final designado. Las imágenes histológicas representativas.......

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Discusión

El trasplante ortotópico de extremidades anteriores en ratas es un modelo comúnmente utilizado en el trasplante reconstructivo experimental, ya que no solo contiene tejidos compuestos vascularizados, sino que también permite evaluar la recuperación funcional. Una técnica de sutura convencional para la anastomosis vascular es muy compleja y exige habilidades microquirúrgicas avanzadas que requieren años de formación microquirúrgica. Para reducir en gran medida el tiempo y los costos, se a.......

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Divulgaciones

Gerald Brandacher es asesor médico de X-Therma y Ossium Health.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por Grant 1R43HL158398 (NIH), 5R44AI145782 (NIH) y Maryland stem cell 2020-MSCRFL-5414. Queremos agradecer a nuestra directora de laboratorio, Ángela Estévez, por su apoyo con este estudio.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
10-0 Micro Sutura No EstérilAROSurgicalTK-107038
4-0 Sharpoint Nylon NegroEsuturesA1667N
4-0 Sharpoint Polysyn TaperesuturesG214N
Jeringas de 5 mLMDC2045
6-0 sedaFisher ScientificNC9742105
ABB-22 V Doble Micro RecipienteSy T00480
B-1 V Abrazadera de microrecipiente simpleS & T00462
BD Quincke Esuturas de aguja espinal405073
Castroviejo Micro PortaagujasF.S.T12061-02
Medidor de fuerza Chatilon DFE IIAmetekDFE II series
Tienda de suministros JH conpunta de algodón100252
Tijeras finas - Carburo de tungstenoFST14569-09
PinzasS & TFRS-15 RM-8
Esponjas de gasaFisher Scientific22-362178
Hemostáticos Halsted-MosquitoF.S.T13009-12
HeparinaJHH PharmacyNDC 63323-540-05
Catéter intravenoso radiopaco 24 GesuturesSMTH5053
Joyeros Pinzas de coagulación bipolares, acero inoxidableASSI103000BPS03
Tijeras de resorte Vannas con mango redondoFST15400-12
Pinzas especialesS & DilatadoresFRAS-15 RM-8
- Instrumentos equilibradosF.S.T18602-15
de vasos T

Referencias

  1. Schneeberger, S., et al. First forearm transplantation: outcome at 3 years. Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).
  2. Heinzel, J. C., et al. Evaluation of functional recovery in rats after median nerve resection and aut....

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