Extracción de sangre de gran volumen de cerdos para aplicaciones in vitro : uso de canulación intracardíaca y una bomba de vacío como procedimiento terminal

Resumen

Aquí presentamos un método para recolectar un gran volumen de sangre de cerdos utilizando canulación intracardíaca percutánea conectada a una bomba de vacío, como procedimiento terminal.

Resumen

La recolección de sangre de rutina es necesaria en muchos estudios de investigación básica y aplicada. Se describen bien múltiples métodos para la recolección de sangre porcina. Estos incluyen el uso de las venas auriculares para la recolección de pequeños volúmenes de sangre y las venas yugulares o la vena cava craneal para la recolección de volúmenes de sangre más grandes. Algunos experimentos requieren grandes volúmenes de sangre de un animal individual a la vez para su análisis o uso en cultivos celulares primarios, lo que se puede lograr mejor mediante la desangración. La sangre recolectada para cultivo celular primario debe procesarse fresca y cuidadosamente para mantener la integridad celular. Describimos un método de recolección aséptica de sangre de cerdos bajo un plano quirúrgico de anestesia, utilizando un estilete de catéter intravascular de gran calibre insertado percutáneamente en el corazón y una bomba de vacío, que es eficiente, proporciona un gran rendimiento y minimiza la lisis celular. Esta técnica se realiza una vez en un animal, en un plano quirúrgico de anestesia, como un procedimiento terminal, proporcionando un riesgo mínimo de dolor o angustia.

Introducción

Los cerdos se han utilizado en la investigación en estudios que van desde estudios cardiovasculares hasta curación de heridas y toxicología, así como investigación agrícola, inmunología y estudios de enfermedades¹. La sangre recolectada en la investigación se puede utilizar para estudiar enfermedades, farmacología, genética, investigación del sistema inmunológico y descubrimiento de biomarcadores. El cultivo celular es uno de los procedimientos más básicos que se realizan en la investigación y permite a los investigadores estudiar el comportamiento y la función celular, así como los modelos de enfermedades y el....

Protocolo

Este estudio fue aprobado por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de Midwest Veterinary Services Inc. Como el método principal de eutanasia aprobado por IACUC durante este procedimiento es la desangración, se espera que algunos cerdos sufran un paro cardíaco debido a la pérdida de sangre. Cuando esto ocurre, se realiza un método de eutanasia secundaria, como la toracotomía bilateral. Después de recolectar el volumen de sangre requerido, si hay un latido cardíaco palpable, se coloca una jeringa con solución de eutanasia en el estilete y se administra intracardíaca como método de eutanasia primario, seguido de un método físico secund....

Resultados

Antes de la extracción de sangre, las cerdas fueron preseleccionadas para Mycoplasma hyopneumoniae, adenovirus porcino, parvovirus porcino, coronavirus porcinos (gastroenteritis transmisible, diarrea epidémica porcina), encefalomielitis hemoaglutinante porcina, síndrome reproductivo y respiratorio porcino, grupo de influenza A, circovirus 1 y 2 y virus Séneca A. Hemos repetido este procedimiento varias veces en cerdas cruzadas de Yorkshire hembras que pesan entre 300 y 600 libra.......

Discusión

El procedimiento aquí describe un conjunto de catéter-estilete a bomba de vacío para recolectar un gran volumen de sangre del corazón de las cerdas. Debido al potencial de dolor y angustia, este procedimiento solo debe realizarse en animales que se encuentran en un plano quirúrgico de anestesia. La inmovilidad de la anestesia permite que los principiantes aprendan este procedimiento y lo dominen rápidamente. Se pueden usar múltiples venas para recolectar sangre de animales. Las vías más .......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Bomba de diafragma modelo de laboratorio de 1/8 HP y guiño; 115 vacío vacío, 60 psi máximo y nbsp;	Centro de Suministros de la Base	80058845
10 g x 6 pulgadas con catéter sobre aguja.	Covetrus North American Veterinary Supplies & nbsp;	024616
Jeringuilla de 50 mL, luer lock y nbsp;	Fisher Scientific & nbsp;	13-689-8
Aquasonic 100 ecografía gel azul & nbsp;	Suministro Veterinario del Medio Oeste	001.02109.2
Tubería de burbujas argyl, no conductora (¼ ")	Fisher Scientific & nbsp;	NC2282605 (Catálogo de proveedores # 8888280412)
Clorhexidina Q Scrub 2%	Suministro Veterinario del Medio Oeste	562.30804.3
Botellas desechables Corning.	Fisher Scientific & nbsp;	06-413
Corning PYREX de boca estrecha, botella de vidrio resistente Erlenmeyer o similar creando succión	Fisher Scientific & nbsp;	10-040F
Cepillo de tubos de ensayo de nylon Eisco	Fisher Scientific & nbsp;	S13962
Tapones de goma de dos agujeros Fisherbrand	Fisher Scientific & nbsp;	Dependiendo del tamaño y la séptima;
Ketamina (10 mg/mL) y nbsp;	Suministro Veterinario del Medio Oeste	275.22100.3
MLL a extremo de manguera de 6 mm (acero inoxidable) y nbsp;	Cadence Science	6547IND
MLL a extremo de manguera de 8mm (acero inoxidable) y nbsp;	Cadence Science	6549IND
Esponja de gasa MVet no tejida 4 x 4 contrachapados	Suministro Veterinario del Medio Oeste	000.30156.2
MVet alcohol isopropílico 70%	Suministro Veterinario del Medio Oeste	000.50054.3
Pinzas hemostáticas MVet Kelly rectas 5,5"	Suministro Veterinario del Medio Oeste	000.36800.2
Heparina sódica (1000 U/mL) y nbsp;	Suministro Veterinario del Medio Oeste	191.46701.3
Pentobarbital sódico (390 mg/mL) y nbsp;	Suministro Veterinario del Medio Oeste	749.20000.3
Pajitas de acero inoxidable y pajitas de acero inoxidable;	Hobby Lobby	1893635
Telazol (100 mg/mL) y nbsp;	Suministro Veterinario del Medio Oeste	275.40000.3
Xilazina (100 mg/mL) y nbsp;	Suministro Veterinario del Medio Oeste	310.01150.3