Artículo de método

Establecimiento y evaluación de un modelo murino inducido por extracto soluble en agua de Candida albicans de arteritis coronaria asociada a la enfermedad de Kawasaki

DOI:

10.3791/69041

⸱

7 de noviembre de 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Laboratory, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 2Department of Anesthesiology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Pathology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 44Department of Pediatrics, Huai'an First People's Hospital, Huai'an Clinical College of Xuzhou Medical University, 5Department of Pediatrics, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University

En este artículo

Resumen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

El modelo de ratón inducido por CAWS simula eficazmente la progresión de la enfermedad de Kawasaki desde la inflamación aguda hasta la fibrosis crónica, revelando características patológicas e inmunopatológicas clave, y puede facilitar el desarrollo de estrategias terapéuticas dirigidas para la enfermedad de Kawasaki.

Resumen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La enfermedad de Kawasaki (EK) es una vasculitis sistémica que afecta principalmente a los niños, siendo las lesiones de las arterias coronarias su complicación más grave. En este estudio, se estableció un modelo de KD de ratón optimizado utilizando el extracto soluble en agua de Candida albicans (CAWS). La inflamación miocárdica y los cambios patológicos relacionados se evaluaron mediante tinción de HE y tinción tricrómica de Masson. La técnica de inmunofluorescencia detectó la infiltración de células inmunitarias en el tejido cardíaco. La expresión y localización de la proteína VDAC1 en el tejido miocárdico se detectó mediante inmunohistoquímica. In vitro, se estableció un modelo fagocítico mediante el cocultivo de macrófagos RAW264.7 con esporas de Candida albicans , y se evaluó la formación y función de los autofagolisosomas mediante tinción de inmunofluorescencia LC3 y una sonda Lyso-Tracker Red. A través del tamizaje de dosis, se determinó que 8 mg era la dosis de modelado óptima para inducir la inflamación de las arterias coronarias, con una tasa de mortalidad moderada a esta dosis. La tinción de HE mostró que la inyección de CAWS indujo de manera estable lesiones en las arterias coronarias consistentes con las características de la enfermedad de Kawasaki humana en ratones. La tinción de Masson confirmó que hubo una importante deposición de fibras de colágeno alrededor de las arterias coronarias y la aorta en el grupo de ratones CAWS, que coincidió estrechamente con el área inflamatoria, y se observó una diferencia estadísticamente significativa con respecto al grupo control a los 14 días (p < 0,001). La inmunofluorescencia reveló que, en el día 14 de modelado, la infiltración de múltiples células inmunes en el tejido cardíaco del grupo CAWS había aumentado significativamente (p < 0,001). Los resultados inmunohistoquímicos mostraron que, en el día 28 de modelado, la expresión de la proteína VDAC1 en el tejido miocárdico del grupo CAWS se reguló significativamente al alza (p < 0,001). Los experimentos in vitro han demostrado que en los macrófagos infectados con esporas de Candida albicans , la formación de autofagolisosomas aumenta en la etapa inicial, mientras que el flujo autofágico se bloquea en la etapa posterior, lo que sugiere un trastorno funcional.

Introducción

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La enfermedad de Kawasaki (EK), una forma de síndrome de ganglios linfáticos mucocutáneos, es una enfermedad autoinmune que ocurre en niños menores de 5 años y se acompaña de vasculitis febril 1,2,3. Los estudios indican que los cursos no tratados o de tratamiento que exceden los 10 días de EK grave son propensos a inducir complicaciones cardiovasculares graves, principalmente aneurismas coronarios y estenosis de las arterias coronarias 4,5. La ruptura de aneurismas coronarios puede conducir a un shock cardiogénico o incluso a la muerte súbita, que es la principal causa de cardiopatía adquirida en niños 6,7. A pesar de que la aplicación de inmunoglobulina intravenosa ha mejorado significativamente el pronóstico, su etiología y patogénesis siguen sin estar claras, lo que restringe el desarrollo de estrategias terapéuticas dirigidas 8,9. Por lo tanto, establecer modelos animales que puedan simular con precisión las características de las enfermedades humanas se ha convertido en una necesidad urgente para la investigación actual.

Actualmente, un obstáculo importante en la investigación de la enfermedad de Kawasaki es la ausencia de modelos animales bien caracterizados que recapitulen completamente la patología de la enfermedad humana. Entre los diversos modelos desarrollados ahora, el modelo de vasculitis inducido por extracto de pared celular de Lactobacillus casei (LCWE) es un sistema relativamente maduro y este modelo puede causar arteritis coronaria. Es ampliamente utilizado para estudiar el mecanismo de desregulación inmune y citoquinas específicas en vasculitis similares a KD10,11. El modelo de vasculitis inducido por el extracto soluble en agua de Candida albicans (CAWS) también ha atraído mucha atención debido a su alta similitud con las características patológicas de la enfermedad de Kawasaki humana12,13. Después de la optimización y mejora sistemáticas por parte de múltiples equipos de investigación, el modelo inducido por CAWS se ha convertido en una herramienta importante para la investigación de la enfermedad de Kawasaki14. Aunque el CAWS puede inducir inflamación de las arterias coronarias mediante inyección intraperitoneal, tiene limitaciones en el sentido de que no puede reproducir completamente el proceso patológico exacto de la vasculitis EK humana. Por ejemplo, no se encontraron neutrófilos en la patología tardía de la KD15 humana, pero la infiltración de neutrófilos aún ocurrió en este modelo hasta 16 semanas después de la inyección de CAWS16. Además, el mecanismo de vasculitis causada por CAWS no ha sido completamente aclarado en la actualidad, lo que limita la comprensión y aplicación profunda del modelo9. Este estudio tiene como objetivo establecer un modelo animal estandarizado de EK optimizando el protocolo de inducción de CAWS, dilucidando el mecanismo de la enfermedad y facilitando el desarrollo de terapias dirigidas.

Este estudio utilizó CAWS para establecer un modelo animal más estandarizado de la enfermedad de Kawasaki. A través de experimentos sistemáticos de optimización de dosis, se determinó que la inyección intraperitoneal de 8 mg diarios durante cinco días consecutivos era el régimen de administración óptimo. Este régimen puede inducir lesiones de las arterias coronarias de manera estable mientras mantiene una alta tasa de supervivencia en animales. Además, exploramos más a fondo el papel de la disfunción mitocondrial en la formación de fibrosis durante la fase crónica de la EK, con un enfoque en el posible mecanismo del canal aniónico dependiente de voltaje 1 (VDAC1), una proteína clave que regula la apoptosis mitocondrial, durante la transición de la inflamación a la fibrosis17. Cabe destacar que, a través del análisis de colocalización de autofagosomas/lisosomas en este estudio, se observó una función de autofagia anormal en este modelo. Este modelo optimizado proporciona una herramienta importante para estudiar sistemáticamente la patogénesis de las lesiones de las arterias coronarias en la enfermedad de Kawasaki y evaluar nuevas estrategias de tratamiento.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Todos los experimentos de investigación con datos de animales fueron aprobados por el comité de ética del Hospital Popular Afiliado Huai'an No.1 de la Universidad Médica de Nanjing (KY-2024-250-01). Los reactivos y el equipo utilizado se enumeran en la Tabla de Materiales.

1. Preparación de CAWS

  1. Inocular Candida albicans en caldo de dextrosa Sabouraud según el protocolo establecido por Duong et al.18. Luego, cultive el caldo inoculado anaeróbicamente a 37 ° C durante 48 h en una cámara anaeróbica sellada con una mezcla de gases.
    NOTA: Para garantizar la esterilidad del medio de cultivo, la condición de cultivo anaeróbico a 37 °C debe controlarse estrictamente para evitar la contaminación por bacterias diversas.
  2. Enjuague repetidamente con medio limitante de C e incube a 37 °C durante 48 h a una velocidad de rotación de 4,5 x g.
  3. Añadir un volumen igual de etanol anhidro y dejar reposar toda la noche a 4 °C.
  4. Centrifugar a 4,5 x g durante 15 min a 4 °C, retirar el sobrenadante, añadir un volumen igual de etanol anhidro al precipitado y dejar reposar toda la noche a 4 °C.
  5. Después de la centrifugación, deseche el sobrenadante, agregue 50 ml de acetona al precipitado, centrifugue y seque el precipitado. Disuelva el precipitado en solución salina normal estéril para su uso posterior.

2. Construcción de un modelo de ratón de la enfermedad de Kawasaki

  1. Seleccione ochenta ratones machos C57BL/6 de grado SPF de 4 a 6 semanas y alójelos en condiciones controladas con libre acceso a alimentos y agua.
    NOTA: Para minimizar la posible interferencia de las fluctuaciones del nivel de estrógeno en las respuestas inmunes e inflamatorias, solo se utilizaron ratones machos en este estudio preliminar de establecimiento y caracterización del modelo19.
  2. Divida los ratones en 4 grupos de manera uniforme mediante el método de tabla de números aleatorios, incluidos 3 grupos de inyección de dosis diferentes de CAWS (4 mg, 8 mg, 12 mg) y 1 grupo de control de solución salina normal, con 20 ratones en cada grupo.
  3. Prepare el polvo de CAWS en tres concentraciones de 40 mg/ml, 80 mg/ml y 120 mg/ml utilizando solución salina normal estéril (NaCl al 0,9%). Inyecte al grupo experimental 0,1 ml de CAWS por la mañana del 1º al 5º día del experimento, y administre un volumen igual de solución salina normal al grupo de control en el mismo horario.
    NOTA: La inyección intraperitoneal se realizó con una jeringa de insulina de 1 ml. Cuando opere, coloque el ratón con la cabeza más baja y la cola más alta para evitar daños en órganos como el intestino grueso y delgado cuando se inserta la jeringa.
  4. Use una balanza electrónica a las 9 a.m. todos los días para pesar simultáneamente el alimento restante en el comedero y calcular el consumo de alimentos de 24 horas para cada jaula de ratones.
  5. En los días 3, 7, 14 y 28 después de la última inyección, seleccione y sacrifique al azar 3 ratones de cada grupo en cada punto de tiempo.
  6. Coloque a los ratones en una cámara cerrada precargada con aire ambiente. Introducir CO2 comprimido a un caudal del 30% del volumen de la cámara por minuto. Después de 5 min, se realizó una luxación cervical para confirmar la muerte.
  7. Recolecte y pese muestras de corazón. Observe las lesiones inflamatorias del corazón y los vasos sanguíneos mediante tinción de HE.

3. Estándares de tinción y clasificación de HE

  1. El corazón y el arco aórtico (alrededor de 3 mm × 3 mm) se aislaron rápidamente. Realizar una esternotomía mediana de acuerdo con el método descrito20. Separe rápidamente el corazón del arco aórtico (aproximadamente 3 mm × 3 mm). Los tejidos recolectados se fijaron en formalina tamponada neutra al 10% durante 24 h.
  2. Después de la fijación, deshidrate los tejidos a través de una serie de etanol graduado (etanol al 70% durante 1 h, etanol al 80% durante 1 h, etanol al 95% durante 1 h y etanol al 100% durante 1 h), limpie en xileno e incruste en parafina. Finalmente, secciona los bloques en rodajas continuas de 5 μm.
  3. Para la tinción de H&E, tiñe las secciones con hematoxilina durante 5 min, enjuague con agua corriente durante 10 min, contratiñe con eosina durante 2 min y luego proceda con la deshidratación y el montaje21.
    NOTA: Según el grado de lesión de la íntima vascular, se clasifica en tres grados: El grado I se caracteriza principalmente por hinchazón endotelial y agregación de neutrófilos; El grado II se manifiesta como degeneración del músculo liso, infiltración de células inflamatorias y daño a los orgánulos; El grado III se presenta con lesiones graves como necrosis y desprendimiento endotelial, y depósito de fibrina.

4. Tinción tricrómica Masson

  1. Después de la fijación, deshidrate las muestras de tejido a través de una serie de etanol graduado, claro en xileno e incrustado en parafina.
  2. Después del desparafinado, hidrate las secciones a través de una serie de etanol graduado a agua destilada en preparación para la tinción.
  3. Tiña los núcleos con hematoxilina de hierro de Weigert durante 5 min, enjuaga bien con agua corriente y luego tiñe el citoplasma con fucsina ácida roja de Lichun durante 5 min.
  4. Diferenciar con ácido fosfomolíbdico al 1% durante 1 min, luego teñir directamente las fibras de colágeno con azul de anilina durante 3 min. Enjuague rápidamente con ácido acético glacial al 1%.
    NOTA: Controle estrictamente el tiempo del paso de diferenciación para garantizar la especificidad de la tinción.
  5. Después de la deshidratación con etanol y xileno, volviéndose transparente, selle la película neutra.
  6. Enjuague las secciones manchadas con agua corriente para eliminar el exceso de tinte.
  7. Deshidrate las secciones a través de una serie de etanol graduado, transparente en xileno y montado con goma neutra.
  8. Observe las secciones bajo un microscopio óptico con un aumento constante. Las fibras de colágeno deben aparecer azules, las fibras musculares y el citoplasma rojos, y los núcleos de color azul profundo.

5. Tinción de inmunofluorescencia

  1. Fije las secciones de células o tejidos y bloquee con BSA al 5% durante 1 h para reducir la unión inespecífica.
  2. Use suero normal del mismo origen de la especie que el anticuerpo secundario, dilúyalo con PBS en una proporción de 1:10 y colóquelo sobre la muestra. Séllalo a temperatura ambiente durante 30 min. Después de sellar, enjuague suavemente dos veces con PBS.
  3. Incubar las secciones con el anticuerpo primario durante la noche a 4 °C. Después del lavado con PBS, agregue el anticuerpo secundario fluorescente e incube en la oscuridad durante 1 h.
  4. Tinción del núcleo con DAPI, sellado con agente de montaje antienfriamiento y observación bajo microscopía confocal.

6. Inmunohistoquímica

  1. Después del desparafinado y la hidratación de las secciones de parafina, realice la reparación de antígenos y bloquee la peroxidasa endógena.
  2. Incubación de anticuerpos y desarrollo del color: Primero, bloquee con suero normal, luego incube el anticuerpo primario y el anticuerpo secundario marcado con HRP en secuencia y, finalmente, el desarrollo del color DAB. Controle el grado de reacción bajo un microscopio.
  3. Vuelva a teñir los núcleos celulares con hematoxilina. Después de la deshidratación y la transparencia, selle las placas y observe la señal positiva de color amarillo parduzco bajo un microscopio.
    NOTA: El experimento debe establecer controles y controlar estrictamente las condiciones para la restauración y el desarrollo del color.

7. Detección de autolisosomas

  1. Cocultivar macrófagos RAW264.7 con esporas de Candida albicans en una proporción adecuada (10:1), e incubar a 37 °C y 5% de CO2 durante 4 h, 8 h, 12 h, 16 h, 20 h, 24 h, 28 h, 32 h, 36 h, 40 h, 44 h y 48 h para establecer un modelo fagocítico.
  2. Lavar tres veces con PBS preenfriado para eliminar las esporas no fagocíticas.
  3. Primero, bloquee las muestras con BSA al 5% durante 30 min. A continuación, incubar sucesivamente con el anticuerpo primario contra LC3 (dilución 1:200) a temperatura ambiente durante 1 h, seguido del anticuerpo secundario marcado con Alexa Fluor 488 a temperatura ambiente durante 30 min.
  4. Agregue la sonda de lisosoma Lyso-Tracker Red directamente a las células para visualizar la localización lisosomal. Finalmente, contratiña los núcleos con DAPI (1 μg/mL) durante 5 min.
    NOTA: Todo el proceso de operación debe llevarse a cabo en la oscuridad para garantizar que el tiempo de incubación y la concentración del anticuerpo se controlen con precisión.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Inicialmente, evaluamos sistemáticamente los cambios patológicos miocárdicos inducidos por diferentes dosis de CAWS en ratones. No se observaron muertes en el grupo de control de PBS, el grupo de CAWS de 4 mg y el grupo de CAWS de 8 mg (n = 20 en cada grupo). Por el contrario, la respuesta inflamatoria en el grupo de 4 mg fue leve y no cumplió con los requisitos de modelado. La tasa de mortalidad fue mayor en el grupo de CAWS de 12 mg (9/20, 45%), y las m...

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Los aneurismas de las arterias coronarias (AAC) y la fibrosis miocárdica en la EK son las principales causas de eventos cardiovasculares a largo plazo. A pesar de los avances realizados en el tratamiento de la fase aguda, aproximadamente el 5% de los pacientes aún desarrollan AAC persistente28,29. El mecanismo de este cambio patológico tardío aún no está claro, y existe una necesidad urgente de que los modelos animales revelen su...

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gracias a los miembros del equipo por su apoyo y contribución a este experimento. La investigación fue apoyada por los siguientes proyectos: Proyecto general del Fondo de Desarrollo del Hospital Afiliado a la Universidad Médica de Xuzhou (XYFM202234) y Proyecto Blando Especializado en Ciencias Naturales sobre la Vida y la Salud de la Ciudad de Huai'an (2023KX0006).

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
un anticuerpo secundario de cabra contra IgG Alexa Fluor 488 de conejoABCAMab15081un anticuerpo secundario de cabra contra IgG Alexa Fluor 488 de conejo
Cámara anaeróbicaTermo CientíficaTermo CientíficaCámara anaeróbica
Azul anilinaSolarbioG3668Azul anilina
anti-LC3ABCAMab192890el anticuerpo primario contra LC3
Gabinete de seguridad biológicaTermo Científica1500Gabinete de seguridad biológica
BSASolarbioA8020BSA
Candida albicans (cepa)NBRC1385Candida albicans (cepa)
CD3eBD Biociencias561827FITC Hamster Anti-Ratón CD3e(145-2C11)
CD86BD Biociencias105013CD86
CD8aBD Biociencias100713CD8a
Incubadora de cultivos celularesTermo Científica311Incubadora de cultivos celulares
CentrífugaTermo CientíficaST4R PlusCentrífuga
Microscopio confocalOlimpoIX73Microscopio confocal
DAPIBeyotime Biotechnology & nbsp;P0131-25mlDAPI
DMEMGibco11965126DMEM
Máquina de incrustaciónP.D.J MÉDICOBM450AMáquina de incrustación
EosinaSolarbio  G1100Eosina
F4/80BD Biociencias123109F4/80
FBSGibco16000044FBS
FormaldehídoSolarbio  P1110Formaldehído
Deshidratador de tejidos totalmente automáticoLeica BiosystemsASP3005Deshidratador de tejidos totalmente automático
Láminas de microscopio de vidrioCitotest250124A1Láminas de microscopio de vidrio
H& Colorante EBeyotime Biotechnology & nbsp;C0105MH& Colorante E
IHC KitBiotecnología de Absentaabs996-5mlIHC Kit
Sonda LC3Beyotime Biotechnology & nbsp;C3018MSonda LC3
Cuchillas de Microtomo de perfil bajoThermo Fisher3052835Cuchillas de Microtomo de perfil bajo
Sonda de lisosomaBeyotime Biotechnology & nbsp;C1046Sonda de lisosoma
RotuladorDeliSK109Rotulador
Tinte MassonBeyotime Biotechnology & nbsp;C0189MTinte Masson
MicrotomoLeica BiosystemsHistoCore BIOCUTMicrotomo
Goma neutraSolarbi  G8590Goma neutra
NK1.1BD Biociencias561117NK1.1
Microscopio ópticoNikonNikonMicroscopio óptico
ParafinaSolarbio  YA0012Parafina
ParafinaSolarbioYA0012Parafina
PBSSolarbioP1020PBS
Ácido fosfomolíbdicoSolarbioG3472Ácido fosfomolíbdico
VDAC1Abcamab34726Anti-VDAC1

Referencias

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jone, P. -N., et al. Update on diagnosis and management of Kawasaki disease: A scientific statement from the American Heart Association. Circulation. 150 (23), e481-e500 (2024).
  2. Goel, A. R., Yalcindag, A. An update on Kawasaki disease. Curr Rheumatol Rep. 27 (1), 4(2024).
  3. Sapountzi, E., et al. disease: An update on genetics and pathophysiology. Genet Test Mol Biomarkers. 28 (9), 373-383 (2024).
  4. Beltran, J. V. B., Lin, F. -P., Chang, C. -L., Ko, T. -M. Single-cell meta-analysis of neutrophil activation in Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children reveals potential shared immunological drivers. Circulation. 148 (22), 1778-1796 (2023).
  5. Assempoor, R., et al. Different antithrombotic strategies to prevent cardiovascular complications in Kawasaki patients: A systematic review and meta-analysis. BMC Pediatr. 24 (1), 738(2024).
  6. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children: Common inflammatory pathways of two distinct diseases. Rheum Dis Clin North Am. 49 (3), 647-659 (2023).
  7. Li, W., et al. Impact of platelet glycoprotein Ia/IIa C807T gene polymorphisms on coronary artery aneurysms of KD patients. Cardiol Res Pract. 2021, 4895793(2021).
  8. Gorelik, M., et al. American College of Rheumatology/Vasculitis Foundation guideline for the management of Kawasaki disease. Arthritis Care Res (Hoboken). 74 (4), 538-548 (2022).
  9. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease: Pathophysiology and insights from mouse models. Nat Rev Rheumatol. 16 (7), 391-405 (2020).
  10. Li, R., et al. Lactobacillus casei cell wall extract and production of galactose-deficient IgA1 in a humanized IGHA1 mouse model. J Am Soc Nephrol. 36 (1), 60-72 (2025).
  11. Wei, K., et al. Mitochondrial DNA release via the mitochondrial permeability transition pore activates the cGAS-STING pathway, exacerbating inflammation in acute Kawasaki disease. Cell Commun Signal. 22 (1), 328(2024).
  12. Xu, H., et al. Characterization of inflammatory factors and T cell subpopulations in a murine model of Kawasaki disease induced by Candida albicans cell wall extracts (CAWS). Med Sci Monit. 28, e936355(2022).
  13. Miyabe, C., Miyabe, Y., Miyata, R., Ishiguro, N. Pathogens in vasculitis: Is it really idiopathic. JMA J. 4 (3), 216-224 (2021).
  14. Sato, W., Ishibashi, K. -I., Yamanaka, D., Adachi, Y., Ohno, N. Effects of natural and chemically defined nutrients on Candida albicans water-soluble fraction (CAWS) vasculitis in mice. Med Mycol J. 58 (2), E47-E62 (2017).
  15. Takahashi, K., Oharaseki, T., Yokouchi, Y. Histopathological aspects of cardiovascular lesions in Kawasaki disease. Int J Rheum Dis. 21 (1), 31-35 (2018).
  16. Lombardi Pereira, A. P., et al. Long-term cardiovascular inflammation and fibrosis in a murine model of vasculitis induced by Lactobacillus casei cell wall extract. Front Immunol. 15, 1411979(2024).
  17. Tian, G., et al. Voltage-dependent anion channel 1 (VDAC1) overexpression alleviates cardiac fibroblast activation in cardiac fibrosis via regulating fatty acid metabolism. Redox Biol. 67, 102907(2023).
  18. Duong, T. T., Silverman, E. D., Bissessar, M. V., Yeung, R. S. M. Superantigenic activity is responsible for induction of coronary arteritis in mice: An animal model of Kawasaki disease. Int Immunol. 15 (1), 79-89 (2003).
  19. Miller, L. R., et al. Considering sex as a biological variable in preclinical research. FASEB J. 31 (1), 29-34 (2017).
  20. Miyamoto, H. D., et al. Iron overload via heme degradation in the endoplasmic reticulum triggers ferroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury. JACC Basic Transl Sci. 7 (8), 800-819 (2022).
  21. Ding, J., et al. Myeloid-specific blockade of Notch signaling ameliorates nonalcoholic fatty liver disease in mice. Int J Biol Sci. 19 (6), 1941-1954 (2023).
  22. Xie, Z., et al. Atlas of circulating immune cells in Kawasaki disease. Int Immunopharmacol. 102, 108396(2022).
  23. Menikou, S., Langford, P. R., Levin, M. Kawasaki disease: The role of immune complexes revisited. Front Immunol. 10, 1156(2019).
  24. Xu, S., et al. Ketogenic diets inhibit mitochondrial biogenesis and induce cardiac fibrosis. Signal Transduct Target Ther. 6 (1), 54(2021).
  25. Peng, F., et al. 2-APQC, a small-molecule activator of Sirtuin-3 (SIRT3), alleviates myocardial hypertrophy and fibrosis by regulating mitochondrial homeostasis. Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 133(2024).
  26. Lin, L. -C., et al. Mitochondrial quality control in cardiac fibrosis: Epigenetic mechanisms and therapeutic strategies. Metabolism. 145, 155626(2023).
  27. Yuan, M., et al. IP3R1/GRP75/VDAC1 complex mediates endoplasmic reticulum stress-mitochondrial oxidative stress in diabetic atrial remodeling. Redox Biol. 52, 102289(2022).
  28. Kim, J. -J., et al. Sex-specific susceptibility loci associated with coronary artery aneurysms in patients with Kawasaki disease. Korean Circ J. 54 (9), 577-586 (2024).
  29. Anzai, F., et al. Crucial role of NLRP3 inflammasome in a murine model of Kawasaki disease. J Mol Cell Cardiol. 138, 185-196 (2020).
  30. Ohashi, R., et al. Characterization of a murine model with arteritis induced by Nod1 ligand, FK565: A comparative study with a CAWS-induced model. Mod Rheumatol. 27 (6), 1024-1030 (2017).
  31. Wang, Z., et al. Single-cell RNA sequencing of peripheral blood mononuclear cells from acute Kawasaki disease patients. Nat Commun. 12 (1), 5444(2021).
  32. Yang, J., et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 16 (1), 1160(2025).
  33. Niu, B., et al. Protecting mitochondria via inhibiting VDAC1 oligomerization alleviates ferroptosis in acetaminophen-induced acute liver injury. Cell Biol Toxicol. 38 (3), 505-530 (2022).
  34. Shoshan-Barmatz, V., Krelin, Y., Chen, Q. VDAC1 as a player in mitochondria-mediated apoptosis and target for modulating apoptosis. Curr Med Chem. 24 (40), 4435-4446 (2017).
  35. Ham, S. J., et al. Decision between mitophagy and apoptosis by Parkin via VDAC1 ubiquitination. Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (8), 4281-4291 (2020).
  36. Prabhu, S. D., Frangogiannis, N. G. The biological basis for cardiac repair after myocardial infarction: From inflammation to fibrosis. Circ Res. 119 (1), 91-112 (2016).
  37. Lin, M., et al. MCM8-mediated mitophagy protects vascular health in response to nitric oxide signaling in a mouse model of Kawasaki disease. Nat Cardiovasc Res. 2 (8), 778-792 (2023).

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Solicitar permiso para reutilizar el texto o las figuras de este artículo de JoVE

Solicitar permiso

Etiquetas

Extracto de Candida albicansLesiones de las Arterias CoronariasInflamaci n Mioc rdicaTinci n con HETinci n Tricr mica de MassonTinci n por InmunofluorescenciaExpresi n de VDAC1

Artículos relacionados