Técnicas de sutura para la reconstrucción vascular en el trasplante hepático ortotópico de ratón

Resumen

Las reconstrucciones vasculares en los receptores, incluida la vena cava inferior suprahepática (SHIVC), la vena porta y la vena cava inferior infrahepática (IHIVC), son los procedimientos clave para el éxito del trasplante hepático ortotópico en ratones. En este documento proporcionamos técnicas de sutura y consejos para la reconstrucción de SHIVC e IHIVC en el modelo de trasplante de hígado de ratón.

Resumen

La investigación traslacional utilizando modelos animales es esencial para abordar los problemas clínicos en los trasplantes de órganos. Aunque el trasplante hepático ortotópico (LT) en ratones es una herramienta útil para investigar los mecanismos de regeneración hepática, lesión por isquemia-reperfusión y respuestas inmunes después de LT, los desafíos técnicos en este procedimiento restringen su viabilidad. Los aspectos clave para el éxito de la LT ortotópica en ratones son la reconstrucción vascular en los receptores, incluida la vena cava inferior suprahepática (SHIVC), la vena porta (PV) y la vena cava inferior infrahepática (IHIVC). Además de las dificultades técnicas en la reconstrucción de estos vasos, la limitación de tiempo de la fase anhepática a 20 minutos hace que este procedimiento sea más desafiante. Aunque se puede utilizar una técnica de manguito para la reconstrucción PV, se requiere una técnica de sutura segura y rápida para reconstruir el SHIVC durante la fase anhepática. Para la reconstrucción IHIVC, si bien las técnicas de manguito y sutura son aplicables, la técnica de sutura conduce a un tiempo de operación más corto en la cirugía del donante y la preparación de la mesa posterior y puede mantener una luz vascular más grande que la técnica del manguito. En este documento proporcionamos pautas para la reconstrucción de SHIVC e IHIVC utilizando una técnica de sutura para facilitar la LT ortotópica de ratón.

Introducción

Con los avances en las técnicas quirúrgicas, los medicamentos inmunosupresores y la medicina de cuidados intensivos, el trasplante de órganos se ha establecido como una terapia estándar para las enfermedades orgánicas en etapa terminal. El trasplante hepático (TH) es actualmente el único tratamiento curativo para la enfermedad hepática terminal y ciertas neoplasias hepáticas. La investigación traslacional utilizando modelos animales es esencial para abordar los problemas clínicos en el LT. Como hay varios animales modificados genéticamente disponibles en modelos de ratón, la LT ortotópica de ratón es una herramienta importante para ex....

Protocolo

Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité de Experimentación Animal de la Universidad de Kioto y realizados de acuerdo con las Pautas de Protección Animal de la Universidad de Kioto. Las cirugías de ratón se realizaron bajo anestesia general utilizando inhalación de isoflurano. El vaporizador se ajustó al 3% de isoflurano con 1 L / min de oxígeno para inducir la anestesia. Después de la laparotomía, el isoflurano se redujo al 1% para mantener la anestesia. Las herramientas microquirúrgicas utilizadas en este protocolo, incluidas las utilizadas en nuestro protocolo de reconstrucción vascular^13....

Resultados

Un receptor de ratón se recuperó de la anestesia en 30 minutos cuando se realizó una reconstrucción vascular exitosa utilizando un injerto hepático normal sin un tiempo isquémico frío prolongado. Una tasa de éxito del >90% puede considerarse experta para este procedimiento. Examinamos las curvas de aprendizaje en un cirujano para las tasas de recuperación post-LT (recuperación de la anestesia), el tiempo anhepático (desde el pinzamiento hasta la liberación del flujo PV) y el tiempo total de reperfusión (desde el pinza.......

Discusión

Este artículo documentó las técnicas detalladas para la reconstrucción del SHIVC y el IHIVC con una técnica de sutura en el TH ortotópico de ratón. La reconstrucción vascular, especialmente la anastomosis del SHIVC, que requiere una técnica de sutura durante la fase anhepática, es una habilidad crucial para el éxito del TH en ratón. Además de la técnica de sutura segura y protegida, es necesaria una sutura rápida para mantener la fase anhepática dentro de los 20 minutos para obtener resu.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
10-0 Micro sutura	AROScorporación de instrumentos quirúrgicos	T4A10N07
Catéter intravenoso de 16 G	TERUMO	SR-FF2032	Manguito IHIVC
Catéter intravenoso de 20 G	TERUMO	SR-FF1651	Manguito fotovoltaico
8-0 seda trenzada	Natsume Seisakusho	CR9-80B2	8-0 seda
Solución de almacenamiento en frío Belzer UW	Astellas		Líquido de preservación de órganos
Pinza Bulldog	B BRAUN	FB329R	Pinza Bulldog
Pinzas Bulldog	Natsume Seisakusho	C-42-S-2	Para sujeción SHIVC
Ratones C57BL/6	Servicio Bio Oriental
Fórceps	Herramientas de ciencia fina	11231-30
Solución de inhalación de isoflurano	Viatris		Anestésico
Puntas micro romas 0,1 mm x 0,06 mm	Herramientas de ciencia fina	11253-20	Micropinzas rectas
Micro tijeras	Instrumentos médicos Muranaka	451-609-13
Micro serrefina	Herramientas de ciencia fina	18055-03	Para sujeción IHIVC
Micro serrefina	Herramientas de ciencia fina	18055-04	Para sujeción fotovoltaica
Aplicador de abrazadera Micro Serrefine con bloqueo	Herramientas de ciencia fina	18056-14	Aplicador de clip para vasos
Micro Serrefines	Herramientas de ciencia fina	18055-4	Clip de recipiente
Micro sutura feepos	Aesculap	FD281R
Aplicador de pinza Micro-serrefine	Herramientas de ciencia fina	18056-14
Portaagujas	Aesculap	FD231R
No.11 Cuchillas de repuesto	Maquinilla de afeitar de seguridad FEATHER	11	Cuchillas
Tijera oftálmica, mango redondo	B BRAUN	FD103R	Microtijera
Contenedor de plástico de forma rectangular	Daiso		10 cm de largo, 15 cm de ancho y 6 cm de alto
Consejos SuperGrip	Herramientas de ciencia fina	00649-11	Micropinzas curvas
SZX7	Olimpo	SZX7	Microscopio
Tijeras Vannas	Instrumentos de precisión del mundo	501232
Clip vascular	Corporación médica BEAR	TKF-1-30	Para pinzamiento IHIVC en el injerto hepático