Artículo de método

Evaluación Doppler por onda pulsada de la disfunción diastólica en el modelo ZSF-1 de rata de hipertensión pulmonar debida a enfermedad cardíaca izquierda

DOI:

10.3791/69341

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22 de mayo de 2026

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1Department of Anesthesiology and Critical Care Medicine, Johns Hopkins University, 2Department of Anesthesiology and Critical Care Medicine, Department of Biomedical Engineering, Department of Chemical and Biomolecular Engineering, Johns Hopkins University

En este artículo

Resumen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Se presenta un protocolo para la evaluación de la función diastólica mediante ecografía Doppler en un modelo preclínico de hipertensión pulmonar debida a enfermedad cardíaca izquierda.

Resumen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La disfunción diastólica y la insuficiencia cardíaca con fracción de eyección preservada (HFpEF) son factores significativos que contribuyen a la hipertensión pulmonar (HP) debida a la enfermedad cardíaca izquierda. La evaluación estándar in vivo de anomalías de relajación en modelos preclínicos incluye la ecocardiografía bidimensional (2D) con evaluación Doppler del flujo transmisor y la relajación tisular, que es compleja, costosa y requiere equipos ecocardiográficos sofisticados. Aquí, se demuestra un valioso método sustituto para evaluar la disfunción diastólica en la HP debida a una enfermedad cardíaca izquierda en un modelo de roedor bien establecido que utiliza ecografía Doppler de onda pulsada sin ecocardiografía 2D. El patrón de flujo transmisral diastólico se identifica a partir de la ventana apical y se correlaciona con un trazado ECG registrado simultáneamente. Se recopilan índices de función diastólica y la identificación de estos índices se describe en este protocolo. Esta técnica de bajo coste y fácil implementación identifica marcadores relevantes de disfunción diastólica asociada con la HP, enfermedades cardiovasculares y HFpEF. Además, detecta reproducidiblemente su progresión a lo largo del tiempo cuando la ecocardiografía 2D no es preferida o no está disponible. Las principales limitaciones de este método están relacionadas con la ausencia de visualización de las estructuras cardíacas, el potencial de inexactitudes debido a la dependencia angular de la señal Doppler, así como el hábito corporal del animal, que puede mitigarse ajustando la ubicación de la sonda y optimizando su alineación con el flujo sanguíneo.

Introducción

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La hipertensión pulmonar (HP) es una enfermedad mortal sin cura que se caracteriza por un aumento de la presión arterialpulmonar 1. La enfermedad del corazón izquierdo (LHD) es, con diferencia, la causa más común de HP en todo el mundo y se asocia con un alto coste y una morbilidadsignificativa 2,3. Los culpables cardíacos de la PH-LHD incluyen múltiples entidades diferentes que provocan disfunción sistólica o diastólica, como la insuficiencia cardíaca, que es un síndrome clínico multifacético que sigue siendo una de las principales causas de mortalidad a nivelmundial. Entre los pacientes con insuficiencia cardíaca, la HFpEF representa más de la mitad de las hospitalizaciones basadas enincidentes 4,5. La disfunción diastólica ha sido identificada como uno de los precursores más importantes y una característica fundamental en la interacción entre HFpEF y HP debido a la LHD (PH-LHD)6,7. Debido a la falta de modelos preclínicos adecuados que recapitulen la mayoría de las características clínicas y subclínicas de la HP y la HFpEF, la comprensión de los mecanismos subyacentes a estas enfermedades esincompleta 7.

La disfunción diastólica es una característica distintiva de la PH-LHD y puede evaluarse mediante ecocardiografía 2D yDoppler 8. Los métodos bidimensionales y Doppler para la evaluación de la función diastólica ventricular izquierda incluyen, entre otros parámetros, la velocidad máxima de la onda E diastólica temprana, la onda A diastólica tardía pico, la duración de la válvula mitral A (intervalo de tiempo desde el inicio de la onda A hasta el final de la onda A en la línea base cero), la relación E/A de la válvula mitral, el tiempo de desaceleración de la onda E (DT, intervalo de tiempo desde el pico de la onda E extrapolada hasta la línea base de velocidad cero). imagen Doppler tisular (TDI) del anillo de la válvula mitral septal (E', parámetro ecocardiográfico de relajación tisular del anillo de la válvula mitral), y TRVEI (tiempo de relajación isovolumétrica), tiempo entre el cierre de la válvula aórtica y la apertura de la válvula mitral). Los marcadores ecocardiográficos de relajación alterada incluyen una combinación de reducción o inversión de la relación E/A en el contexto de aumento y reducción de la onda A, IVT prolongado, reducción del tiempo de desaceleración de la onda E, índices Doppler tisulares retardados (velocidad prolongada de e', aumento promedio de E/e' del tabique septal) y un valor absoluto más bajo de la deformación longitudinal global (GLS)9. Los estudios que comparan mediciones ecocardiográficas y hemodinámicas invasivas han demostrado que las mediciones ecocardiográficas y las medidas invasivas son comparables y constituyen un método fiable para evaluar la hemodinámicacardíaca 10. Sin embargo, la ecocardiografía 2D es compleja, costosa y requiere equipos y personal ecoscardiográficos sofisticados. Estos factores suponen una limitación importante para seguir la progresión de la enfermedad en animales. En consecuencia, los investigadores se basan en dos medidas (inicio y final del estudio) para los estudios longitudinales o en mediciones individuales en un diseño transversal.

Entre estos parámetros de disfunción diastólica, E, A, E/A, duración A, DT y IVRT pueden evaluarse mediante ecocardiografía Doppler de onda pulsada, evitando la necesidad de la ecocardiografía 2D. En este artículo, se demuestra un protocolo para la evaluación Doppler de la función diastólica en el bien establecido modelo de rata ZSF-1 dePH-LHD 11. Un total de 25 ratas ZSF1 machos (10 con obesidad genética y 15 genéticamente delgados) fueron seguidos longitudinalmente y evaluados por ecografía para detectar el desarrollo de disfunción diastólica durante dieciséis semanas entre las 8 y las 24 semanas de edad. Se evaluaron los mismos parámetros ecocardiográficos en las dos cohortes. Todos los animales fueron evaluados al inicio (8 semanas de edad). La evidencia Doppler de disfunción diastólica se manifestó a las 16 semanas de edad, cuando se tomaron las mediciones intermedias. Las mediciones finales se tomaron a las 24 semanas de edad. Aunque el investigador que realizaba la recogida de datos no podía ser cegado debido al evidente aumento de peso en la cohorte obesa, el investigador que realizaba el análisis de datos estaba cegado ante el fenotipo de los animales. Aunque este método fácilmente implementable ofrece una vía para la evaluación longitudinal de la progresión de la enfermedad en roedores, las limitaciones de esta técnica incluyen la dependencia del ángulo de una señal Doppler de buena calidad, que puede ser difícil de obtener dependiendo de la alineación de la sonda y el tamaño del animal.

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Protocolo

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Todos los procedimientos se llevaron a cabo de acuerdo con la aprobación del Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Johns Hopkins (ACUC) para el protocolo RA21M273. No se expuso a ningún animal a molestias para la recogida de datos ni para los fines de las mediciones. Los reactivos y el equipo utilizado se enumeran en la Tabla de Materiales.

1. Preparación del equipo y del animal

  1. Limpia la cámara de anestesia con alcohol etílico al 70% y limpia todas las superficies.
  2. Acolcha la cámara con un cambiador desechable y papel de cocina. Asegúrate de que los orificios de entrada y salida de gas no estén obstruidos.
  3. Toma las siguientes precauciones de seguridad y manejo de la anestesia:
    1. Asegúrate de que la estación de anestesia esté instalada en un área bien ventilada.
    2. Inspecciona el equipo de anestesia en busca de fugas y fallos.
    3. Evita encender el vaporizador hasta que el circuito esté conectado al animal.
    4. Mantener un flujo continuo de oxígeno durante todo el experimento.
    5. Asegúrate de que el sistema de limpieza sea continuo con el sistema de circuito anestésico.
    6. Tapa el hueco entre el cono nasale y la nariz del animal con un trozo de cinta para reducir el derrame de anestesia y evitar la fuga de contaminantes al aire.
    7. Reducir los caudales de gas fresco en el sistema de circuito anestésico durante la fase de mantenimiento de la anestesia. Se recomienda el uso del menor caudal posible de gas fresco.
    8. Al concluir el experimento, continúa administrando oxígeno a un alto caudal para eliminar cualquier agente anestésico residual y el sistema respiratorio.
  4. Abre el tanque de oxígeno (100%) y permite el libre flujo de oxígeno hacia la cámara de anestesia.
  5. Abre la jaula y coloca al animal en la cámara de anestesia.
  6. Cierra bien la cámara.
  7. Abre el vaporizador de isoflurano y deja que el flujo libre de isoflurano entre el 2% y el 3% entre la cámara de anestesiación, mezclado con oxígeno (2 L/min).
  8. Permite que el animal inhale la mezcla de gas oxígeno-isoflurano durante hasta 3 minutos, o hasta alcanzar una profundidad adecuada de anestesia general.
    NOTA: La anestesia se considera adecuada cuando el animal no responde a estímulos no nocivos o nocivos antes del inicio del experimento, mientras continúa respirando espontáneamente y sin dificultad.

2. Obtención de un trazado por ECG

  1. Enciende la tableta conectada a la almohadilla de trazado ECG. Selecciona RSMonitor entre las aplicaciones disponibles. Enciende la almohadilla del ECG pulsando el botón redondo delante.
    NOTA: Una luz verde intermitente indica que el ECG Pad se está emparejando con la tableta. Una luz verde fija indica la finalización del emparejamiento.
  2. Toca CONFIGURACIÓN en la esquina inferior derecha de la interfaz de usuario.
  3. Selecciona PRESETS en el menú desplegable de ajustes experimentales.
  4. Toca el menú desplegable bajo Presets guardados.
  5. Selecciona Rat CV y pulsa OK en la esquina inferior derecha.
    NOTA: La almohadilla debe estar en modo "Rata" para permitir la detección del ECG a través de las patas.
  6. Limpia la almohadilla del ECG con alcohol etílico al 70% para eliminar cualquier residuo de gel de ECG.
  7. Consigue gel electrodo altamente conductor para el ECG y gel hipoalergénico soluble en agua para el Doppler.
  8. Abre el flujo de mezcla de gases hasta el cono de nariz.
  9. Coloca el animal anestesiado en decúmino sobre la almohadilla no invasiva de ECG, con la nariz en el cono nariz del tamaño adecuado. Ajusta la salida del vaporizador entre el 1,5% y el 2% (flujo de oxígeno a 1 L/min). Asegura el libre flujo de isoflurano hacia el cono nasal.
  10. Cierra el flujo de gas hacia la cámara de anestesia.
  11. Aplica una pequeña cantidad de gel de electrodos en la superficie dorsal de las patas delanteras usando un aplicador con punta de algodón y en el lado plantar de las patas traseras. Asegura las patas con cinta adhesiva en la superficie de contacto del electrodo de la almohadilla de ECG y asegúrate de que el gel de electrodos tenga suficiente contacto con la almohadilla.
    NOTA: Los ratones necesitan un cono nariz más pequeño en comparación con las ratas.
  12. Elimina el vello del pecho y abdominal del animal usando una crema depiladora suave para facilitar un mejor contacto con la sonda cutánea. Elimina cualquier crema depiladora residual para evitar irritación de la piel.
  13. Asegúrese de que la línea base isoeléctrica y la forma de onda P-QRS-T en el trazado ECG se muestren en el monitor del ordenador.
    NOTA: Dependiendo de la frecuencia cardíaca, las amplitudes P y T pueden no distinguirse del complejo QRS, y la onda R es el elemento más importante para determinar el tiempo de las formas de onda Doppler.

3. Configuración del ordenador

  1. Enciende el ordenador.
  2. Crea una carpeta en el ordenador identificando al animal y los datos de interés. Las instantáneas tomadas durante el experimento se guardarán en esta carpeta.
  3. Enciende el dispositivo Transceptor Doppler Pulsado en la parte delantera y trasera (caja azul grande).
  4. Enciende el procesador de señal Doppler (caja negra pequeña).
  5. Abre el icono de la estación de trabajo de procesamiento de señales Doppler para ejecutar el software.
    NOTA: Los ajustes iniciales del sistema son los siguientes: 10 MHz o 20 MHz en la configuración del sistema, Frecuencia de muestreo: 125 kHz, Tamaño de muestra: 512, Filtro pasa-bajos: 150 kHz, lo cual es adecuado para la mayoría de los experimentos.
  6. Haz clic en Configurar en la esquina superior izquierda.
  7. Selecciona Configuración del sistema.
  8. Seleccione la frecuencia adecuada de la sonda para el experimento (20 MHz para ratones y ratas pequeñas, 10 MHz para ratas grandes).
    NOTA: La interfaz tiene dos paneles: uno superior para la visualización de los espectrogramas de velocidad Doppler y un panel inferior para mostrar el ECG.
  9. Conecta la sonda de 20 MHz cuando investigues a una rata o ratón joven. Usa una sonda de 10 MHz para ratas mayores, grandes u obesas. Cabe destacar que ambas sondas pueden conectarse simultáneamente, y el módulo transceptor Doppler permite cambiar fácilmente entre frecuencias/sondas (interruptor de palanca en la parte frontal).
  10. Configura los ajustes Doppler en el módulo transceptor:
    1. Asegúrate de que el transductor de sonda de mano esté configurado en el receptáculo del canal A o B.
      NOTA: La selección del receptáculo no tendrá impacto en la adquisición de datos, ni provocará cambios en el software.
    2. Seleccione el canal de 10/20 MHz adecuado para operar la sonda portátil de 10/20 MHz, respectivamente.
    3. Establece la frecuencia de repetición de pulsos (PRF) en 62 kHz para lograr una ambigüedad óptima de rango, aumentando la velocidad máxima que puede detectarse con el Doppler PW desde el volumen de muestra más proximal, minimizando el aliasing.
    4. Configura el interruptor DIRECTION en TWD para mostrar cualquier flujo que se acerque a la sonda como una forma de onda por encima de la línea base de flujo cero.
      NOTA: Cualquier flujo que se aleje de la sonda se mostrará como una forma de onda por debajo de la línea base de flujo cero.
    5. Ajusta el RANGO a 2,5 - 3,5 mm para ratones y 4-6 mm para ratas para seleccionar la profundidad a la que se colocará el volumen de muestra.
      NOTA: El corazón de una rata está dentro del primer 1 cm de la cara del transductor, mientras que el corazón del ratón está dentro de los primeros 0,5 cm. Se mide la distancia desde la interfaz piel-sonda hasta la mitad del volumen de la muestra, y el rango para detectar el flujo transmisor varía según el tamaño, la edad y el hábito corporal del animal.
    6. Configurar FILTER en 15 para suavizar la salida de la velocidad fásica a "amortiguada", para evitar sobreestimaciones o subestimaciones y asegurar una estimación óptima de las velocidades.
  11. Pulsa GO en la esquina superior izquierda de la pantalla de la interfaz de usuario. Aparecerá una ventana emergente.
    1. En la nueva ventana, introduzca la Información de Adquisición relevante (tipo de animal, género, fecha de nacimiento, edad en la fecha de adquisición, peso, etc.).
    2. Selecciona la carpeta pre-creada deseada en el menú desplegable en Directorio (para crear la carpeta, véase el paso 3.2) con los identificadores de animal y experimento.
    3. Pulsa OK.
      NOTA: El número inicial de archivo está establecido en _00.
    4. Ajusta la línea base del ECG desplazándola hacia arriba o hacia abajo usando la barra de la báscula de la izquierda (clic izquierdo en el eje y arrastra hacia arriba o abajo), para que las ondas R sean claramente visibles.
      NOTA: La línea base puede desplazarse manteniendo el cursor en el panel del ECG, haciendo clic derecho con el ratón y moviendo el ratón hacia adelante y hacia atrás.

4. Realización de mediciones Doppler

  1. Aplica una pequeña cantidad de gel para ecografía en la región subesternal/epigástrica del pecho y abdomen del animal para facilitar la transmisión por ultrasonido entre la sonda y la piel.
  2. Coloca la sonda Doppler en la línea media bajo el diafragma, debajo del esternón (justo debajo y ligeramente a la izquierda del xifoides), con la cabeza apuntando en la cefálade y hacia la oreja izquierda del animal, y comienza a escanear el flujo moviendo lentamente la sonda en un pequeño movimiento circular con radio creciente (1 mm cada vez), usando un movimiento fino de la mano.
  3. Mantén una presión suave de la sonda sobre la piel bajo el diafragma en todo momento.
  4. Si no se detecta flujo mitral, ajustar el RANGO según sea necesario girando el dial RANGE en incrementos de 0,5 mm para detectar la forma de onda transmisora (Figura 1A), repitiendo el movimiento circular de escaneo con cada giro del dial.
    NOTA: Aparecerá un patrón de flujo antegrado diastólico en forma de M por encima de la línea base cero (cuando el interruptor de dirección está configurado en "TWD" (hacia)), indicando un patrón de flujo diastólico consistente con el flujo a través de la válvula mitral que ocurre con la apertura de la válvula mitral. Cabe destacar que la mayor parte del flujo debe estar por encima de la línea base para un patrón de flujo de válvula mitral, mientras que una forma de onda asimétrica en forma de V que está principalmente por debajo de la línea base indica un flujo sistólico a través de una válvula diferente, como la válvula aórtica. Si se encuentra una forma de onda coherente con un patrón de flujo aórtico, mueve la punta ligeramente hacia la derecha del animal e inclínala hacia arriba (requiere un movimiento mínimo de uno o dos milímetros). Todas las señales se muestran en tiempo real. El flujo diastólico a través de la válvula tricúspide aparecerá como una forma de onda similar en forma de M por encima de la línea base; sin embargo, debido a un menor gradiente de presión entre la aurícula derecha y el ventrículo derecho, las velocidades máximas serán significativamente menores (Figura 1B). Si se encuentra una forma de onda que es consistente con el flujo de la válvula tricúspide, desliza la sonda ligeramente hacia la izquierda del animal sin cambiar su ángulo respecto a la piel.
  5. Asegúrese de mostrar simultáneamente la forma de onda Doppler y el ECG en la pantalla.
    NOTA: La velocidad de barrido del ECG puede ajustarse a un nivel cómodo haciendo clic en las flechas arriba/abajo en la esquina inferior derecha del panel. 4-5 tiempos visibles por pantalla son lo óptimo.

5. Obtención de datos de la ecografía Doppler

  1. Crea instantáneas usando el pedal una vez que se identifique el flujo correcto. Esto puede repetirse varias veces según sea necesario para lograr una calidad óptima de los datos.
    NOTA: Una imagen ideal mostrará una definición clara de los bordes espectrales, sin ensanchamiento espectral, sin relleno espectral, sin visualización simultánea del flujo hacia adelante y hacia atrás, ni visualización simultánea de flujos transmisores y aórticos sistólicos. Las instantáneas se guardan automáticamente al pulsar el pedal.
  2. Detener la adquisición de datos cuando esté satisfecho con la calidad de los datos haciendo clic en el botón STOP en la esquina superior derecha de la interfaz de usuario. Es necesario un mínimo de 3 réplicas de un par de formas de onda ECG y Doppler para una representación fiable de velocidades medias y tiempos de contracción/relajación.
  3. Haz clic en el menú Archivo en la barra de funciones superior.
  4. Selecciona Abrir en el menú desplegable.
  5. Selecciona el archivo de mayor calidad de datos de la carpeta precreada para su análisis.
  6. Haz clic en Análisis en la esquina superior izquierda. Aparecerá una ventana emergente.
    1. Paso 2 de seleccione: Configuración general
      1. Tipo de dato: Doppler
      2. Señal: Entrada mitral
      3. Animal: Selecciona el modelo adecuado para el experimento.
      4. Establece "Todos los nombres de las mediciones" bajo los nombres de medición por defecto.
  7. Ve y haz clic en Paso 5: Editor de picos R desde el menú desplegable Control de Análisis. Selecciona Mostrar marcadores de pico de ritmo y R. Selecciona Cálculo automático.
    NOTA: Aparecerán marcadores verdes del pico R. Alinea los marcadores verdes con la punta de las ondas R. Los marcadores de ritmo no deseados pueden eliminarse del panel colocando el cursor sobre el marcador y realizando un rápido movimiento hacia adelante a la derecha con el ratón mientras mantienes pulsado el clic derecho.
  8. Haz clic en el Paso 6: Editor de Beats desde el menú desplegable Control de Análisis. Selecciona Mostrar marcadores de beats y R peak y haz clic en Seleccionar todos los beats.
  9. Haz clic en el Paso 7: Editor de marcadores desde el menú desplegable Control de Análisis. Haz clic en Marcadores de análisis de pantalla. Selecciona el parámetro deseado para la medición en "Marcador de corriente seleccionado".
    1. Asegúrese de que se requieran los siguientes parámetros para la completitud de los datos (Figura 1):
      1. ES: empezar temprano. Este es el inicio del trazo ascendente del flujo diastólico temprano, medido en la línea base.
      2. EPV: velocidad máxima temprana. La primera velocidad máxima por encima de la línea base refleja el gradiente de presión del auricular izquierdo (LA) - ventriculo izquierdo (VI) durante la diástole temprana (esta es la velocidad máxima del flujo pasivo de LA a LV debido al gradiente de presión LA-LV preexistente).
      3. EEAS: final anticipado, inicio auricular. Refleja la igualación de presión y la suspensión del flujo entre la LA y la LV (diástasis).
      4. APV: velocidad máxima auricular. La segunda velocidad máxima por encima de la línea base refleja el gradiente de presión entre el ventrículo auricular izquierdo y izquierdo durante la diástole tardía. Esta es la velocidad máxima del flujo sanguíneo durante el "impulso auricular".
      5. AE: extremo auricular. Refleja la cesación del flujo al final de la diástole tardía y la igualación de presión entre la LA y la LV.
      6. IVCTE: fin del tiempo de contracción isovolumétrica. Este es el intervalo de tiempo entre el cierre de la válvula mitral y la apertura de la válvula aórtica al inicio de la sístole.
      7. IVRT: comienza el tiempo de relajación isovolumétrica. Este es el intervalo de tiempo entre el cierre de la válvula aórtica y la apertura de la válvula mitral al inicio de la diástole.
    2. Tras tomar las mediciones anteriores, seleccione Paso 8: Resultados de la medición en el menú desplegable Control de Análisis .
    3. Copia los datos en un archivo de Excel haciendo clic en Copiar resultados a la portapapeles. Guarda los datos de Excel.
    4. Cierra la ventana de "Control de análisis".
    5. Haz clic en Archivo en la esquina superior izquierda y selecciona Guardar. Esto ahorrará las mediciones realizadas.
    6. Sal de la estación de trabajo de procesamiento de señales Doppler.

6. Finalización del experimento

  1. Apaga el isoflurano y quita la cinta de las patas del animal.
  2. Retira al animal de la almohadilla del electrodo.
  3. Limpia cualquier crema depiladora y gel de electrodos que queden.
  4. Coloca al animal de nuevo en su jaula con acceso libre a agua y comida.
  5. Permite que el animal se recupere de la anestesia mientras es monitorizado según el protocolo institucional.
  6. Apaga el oxígeno.
  7. Limpia la cámara de anestesia.

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Resultados

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Este método permite la evaluación longitudinal de la función diastólica en PH-LHD. Para una evaluación más precisa de la función diastólica, es necesario visualizar los patrones de flujo antegrado y retrógrado relacionados con la apertura y cierre de la válvula mitral y aórtica dentro del mismo ciclo cardíaco a lo largo de varios ciclos (Figura 1). El cierre de la válvula aórtica marca el inicio de la diástole, cuya fase más temprana es la relajación isovolu...

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Discusión

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En este artículo, se demuestra un método sustituto para evaluar la disfunción diastólica en PH-LHD en un modelo de roedor bien establecido utilizando ultrasonido Doppler de onda pulsada sin ecocardiografía 2D. El patrón de flujo transmisral diastólico se identifica a partir de la ventana apical y se correlaciona con un trazado ECG registrado simultáneamente, que permite determinar los índices de función diastólica. Esta técnica de bajo coste identifica los marcadores de función y disfunc...

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Divulgaciones

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Los autores no mantienen relaciones financieras con ningún fabricante de los materiales utilizados.

Agradecimientos

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Este trabajo fue apoyado por el Premio al Desarrollo Profesional de la American Heart Association para MB (24CDA1267633), un premio NHLBI R56 para JS (1R56HL169285) y un premio NHLBI para LS (R01HL14811201).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Montaje de anestesiaVetEquip Inc.901806
OrdenadorDell7420 Plus
Hisopo de algodónPuritan Medical Products Company806-WC
Crema depiladora    Church y Dwight300725
Sonda Doppler 10 y 20MHzINDUS InstrumentsNA
Configuración DopplerINDUS InstrumentsNA
Pad ECGINDUS InstrumentsNA
Gel de electrodosLaboratorios Parker45993
Vaporizador de isoflurano  VetEquip Inc.911103
Gel de ultrasonidosLaboratorios Parker45659
Cámara de inducción anestesiadora ventiladaVetEquip Inc.942102

Referencias

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
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