Prueba de las barreras fisiológicas a la transmisión del virus en los áfidos con microinyección

Resumen

Los áfidos son transmisores eficaces de virus de plantas. Microinyección de áfidos del virus, el procedimiento que le mostrará hoy en día, es una técnica que permite a los investigadores a inyectar el virus directamente en el hemocele del pulgón, sin pasar por el intestino, una de las dos principales barreras para la transmisión de virus de forma circulatoria. La misma técnica también se utiliza para inyectar dsRNA de RNAi.

Resumen

Papa loafroll virus (PLRV), de la familia Luteoviridae infecta a las plantas solanáceas. Es transmitido por áfidos, principalmente, el pulgón verde del melocotonero. Cuando un áfido infectado se alimenta de una planta infectada se contrae el virus a través del floema de las plantas. Una vez ingerido, el virus tiene que pasar desde el intestino del insecto de la hemolinfa (la sangre del insecto) y luego debe pasar a través de las glándulas salivales, con el fin de ser transmitido de nuevo a una nueva planta. Un áfido puede tomar diferentes virus que comiendo una planta, sin embargo, sólo una pequeña fracción pasará a través de la glándula salival y el intestino, las dos principales barreras para la transmisión de infectar a más plantas. En el laboratorio, se utilizan plantas physalis para estudiar la transmisión del PLRV. En esta máquina, los síntomas se caracterizan por una clorosis intervenal y retraso del crecimiento (amarillamiento de las hojas entre las venas con el resto de venas verdes). El video que presentamos muestra un método para realizar la microinyección de áfidos en los insectos que no los virus vector PLVR y se comprueba si el intestino es la prevención de la transmisión viral. El video que presentamos muestra un método para realizar la microinyección de áfidos en los insectos que no los virus vector PLVR y se comprueba si el intestino o las glándulas salivales es la prevención de la transmisión viral.

Protocolo

1. Para probar si un áfido es capaz de vector un virus, que alimentan de los pulgones en los tejidos infectados durante 2 días.
2. A continuación, le permitimos que se alimentan en una planta sana durante 5 días. La planta se fumiga y después de 3 semanas de comenzar la búsqueda de síntomas.
3. Cuando nos encontramos con un pulgón que no pueden ser portadoras de un virus, se puede determinar cuál de las dos barreras es impidiendo que el virus mediante un procedimiento de microinyección.
4. El virus se inyecta directamente en el hemocele, evitando así la barrera de transmisión intestinal.

Por favor, visite las revisiones anuales de Biología Vegetal para obtener más información acerca de este protocolo y la inmunidad de plantas a la herbivoría de insectos.