Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética en Investigación Clínica de la Universidad de Ordu (Nº de aprobación: 09/11/2017–138). El estudio se llevó a cabo de acuerdo con las directrices éticas institucionales y nacionales pertinentes, incluida la Declaración de Helsinki. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes incluidos en el estudio. El consentimiento obtenido abarca explícitamente la realización de visitas domiciliarias y la recogida de muestras de polvo doméstico de las viviendas.
1. Diseño del estudio
Se trata de un estudio transversal y descriptivo sobre la prevalencia de los ácaros del polvo doméstico realizado en la provincia de Ordu, Turquía. Se recogieron muestras de polvo doméstico en superficies interiores específicas donde se espera comúnmente la acumulación de ácaros. Se realizó muestreo de colchones, materiales de ropa de cama (almohadas y edredones), alfombras y muebles tapizados ubicados en dormitorios y salones. El polvo se recogía con una aspiradora portátil y se agrupaban muestras de diferentes lugares dentro del mismo hogar para formar una muestra compuesta de polvo doméstico.
2. Definición de población y cohorte clínica del estudio
La población del estudio está compuesta por personas que acudieron a las Clínicas de Otorrinolaringología y Medicina Interna Ambulatoria del Hospital de Educación e Investigación de la Facultad de Medicina de la Universidad Ordu debido a asma y/o molestias alérgicas. Los criterios de inclusión para los participantes consistieron en tener 18 años o más, dar su consentimiento para la recogida de muestras de polvo de su entorno doméstico y aceptar responder al cuestionario. Las personas que no consintieron una visita domiciliaria, no proporcionaron consentimiento por escrito o para quienes no se pudieron obtener suficientes muestras de polvo doméstico fueron excluidas del estudio. Los diagnósticos clínicos se evaluaron en función de los autoinformes de los pacientes y de los motivos de las visitas ambulatorias; No se realizó ninguna verificación clínica ni pruebas diagnósticas. Cada paciente fue emparejado con un hogar y los análisis se realizaron a nivel de hogar. La provincia de Ordu está situada en la región oriental del Mar Negro de Turquía y presenta un clima húmedo y templado con alta humedad durante todo el año, condiciones que pueden favorecer la supervivencia y proliferación de los ácaros del polvo doméstico.
3. Unidad de muestreo y método de muestreo
La unidad principal de muestreo de este estudio fue el hogar. Se obtuvieron múltiples muestras de subpolvo de diferentes lugares interiores dentro de cada hogar, con especial atención a dormitorios y zonas de estar. Aunque estas submuestras se recogieron por separado, se agruparon y analizaron como una única muestra compuesta de polvo doméstico en el laboratorio para representar la exposición total a los ácaros en interiores. Para estimar la densidad de ácaros, se procesó aproximadamente 1 g de polvo de cada muestra compuesta doméstica utilizando el método de precipitación con ácido láctico. Se contaron todos los ácaros observados en las láminas microscópicas preparadas derivadas de esta muestra de polvo. El número total de ácaros detectados se expresó entonces como el número de ácaros por gramo de polvo doméstico.
Cada hogar fue muestreado solo una vez y no se realizó un muestreo repetido. Las muestras de polvo doméstico se recogieron utilizando bolsas desechables asignadas a cada área de muestreo y una aspiradora portátil con una potencia de succión de 1200 W. El muestreo se realizó a una tasa estandarizada de aproximadamente 2 min/m2 para garantizar la consistencia y reproducibilidad en todos los hogares.
4. Procedimientos de laboratorio e identificación de ácaros
Una vez llevadas las muestras al laboratorio, se tamizaban para eliminar partículas gruesas. Las muestras se examinaron mediante el método de precipitación con ácido láctico. El método de precipitación del ácido láctico se utilizó para clarificar muestras de polvo disolviendo restos orgánicos, facilitando la separación y visualización de ácaros y permitiendo una detección microscópica y morfológica fiable. Se añadió un gramo de polvo doméstico a 5 mL de ácido láctico al 90% en tubos de ensayo. Los tubos se mezclaron suavemente e incubaron durante 1 hora. Tras la incubación, las muestras recogidas tanto de la superficie como del fondo del líquido se montaron entre una lámina y un abrigo y se examinaron bajo un microscopio óptico a 100×, 200× y 400×aumentos 15. Posteriormente, la identificación de especies se realizó en muestras de polvo en las que se detectaron ácaros.
Las muestras en las que se detectaron ácaros se definieron como "positivas para ácaros". La presencia de al menos un ácaro en cualquier etapa de desarrollo (larva, ninfa o adulto) en una vivienda se consideró suficiente para que la vivienda fuera positiva para ácaros. Para la identificación de especies en muestras positivas, los ácaros visibles bajo un estereomicroscopio se recogieron utilizando una aguja de jeringuilla de insulina de punta fina tras la filtración del sobrenadante sobre papel de filtro y se montaron en el medio de Hoyer. Los ejemplares preparados fueron examinados bajo un microscopio óptico para su identificación morfológica. Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el softwarede análisis estadístico 16,17,18,19,20. Los ejemplares se identificaron con especie, género o niveles taxonómicos superiores dependiendo de la etapa de desarrollo y la disponibilidad de características diagnósticas. Dermatophagoides spp. incluye las etapas larvales, protoninfas y deutonimphas que no pudieron identificarse de forma fiable a nivel de especie. Oribatida representa ácaros identificados a nivel de orden. Larvas y ninfas no identificadas se refieren a ejemplares inmaduros, y los imago no identificados a ejemplares adultos, que no pudieron clasificarse taxonómicamente debido a características morfológicas insuficientes o dañadas. El número total representa el recuento acumulado de todos los individuos de ácaros detectados en muestras positivas.
5. Aplicación de la encuesta y definiciones de variables
Se realizó una encuesta con preguntas sobre características demográficas, estructura de la vivienda, factores ambientales y quejas alérgicas a los participantes. Los datos se evaluaron basándose en las declaraciones de los participantes y no fueron verificados clínicamente.
6. Análisis estadístico
La asociación entre variables categóricas se examinó mediante la prueba del qui-cuadrado, y el cambio en la densidad de ácaros según características demográficas y vitales se examinó mediante las pruebas Mann-Whitney U o Kruskal-Wallis. Se utilizó regresión logística binaria para examinar la asociación entre la variable dependiente (positividad de ácaros) y las variables independientes. Se calcularon razones de probabilidad (OR) con intervalos de confianza (IC) del 95%.