Enfoque técnico para el análisis estructural de un compuesto desconocido en el líquido oral Huoxiang Zhengqi basado en espectrometría de masas con trampa de iones lineales

Summary

Aquí mostramos un protocolo estándar que combina árboles de espectrometría de masas de varias etapas con un proceso de fragmentación basado en el líquido oral Huoxiang Zhengqi.

Abstract

Los compuestos herbales chinos (CHC) desempeñan un papel insustituible en la medicina china, y la identificación de sus complejos componentes ha sido un foco de investigación importante en los últimos años. El líquido oral Huoxiang Zhengqi es un medicamento chino clásico patentado cuya composición química requiere una investigación más profunda a nivel molecular. Los espectrómetros de masas tradicionales, como el tiempo de vuelo y el Orbitrap, normalmente solo proporcionan información secundaria sobre fragmentación. Basándose en un espectrómetro de masas de trampa iónica lineal, los compuestos podían descomponerse de forma más exhaustiva, obteniendo así información fragmentaria más profunda. Este artículo desarrolla una técnica de exploración estructural para compuestos desconocidos en los CHC, que abarca el pretratamiento de muestras, la preparación de cromatografía líquida de ultra-rendimiento, la preparación de espectrometría de masas, las pruebas de espectro completo, las pruebas de espectrometría de masas secundarias, las pruebas de espectrometría de masas multinivel y el análisis de resultados. Los resultados representativos demuestran el proceso de derivación de la estructura compuesta. Discutimos factores que influyen en la técnica experimental, como isómeros, compuestos polihidroxi y resolución de instrumentos. Basándose en la derivación de la estructura molecular microscópica de compuestos desconocidos mediante fragmentación por espectrometría de masas en varias etapas, el método experimental establecido es versátil y aplicable para la caracterización estructural de moléculas pequeñas bioactivas en la medicina tradicional china y su vinculación con mecanismos farmacológicos.

Introduction

Los compuestos herbales chinos (CHC), como activos invaluables de la medicina tradicional china (MTC), han acumulado milenios de experiencia clínica^{validada 1}. Cumplen un papel insustituible en la prevención de enfermedades, la intervención terapéutica y la^{rehabilitación 2}. A través del sinergismo multi-hierbas, los CHC tratan el cuerpo humano de forma holística, operacionalizando los principios fundamentales del holismo y la terapia basada en la diferenciación de^síndromes. Dentro de los marcos médicos contemporáneos, los CCC obtienen reconocimiento mundial por su....

Protocol

1. Pretratamiento de muestras

1. Abre el envase del HXZQ comercial. Transfiere con precisión 0,1 mL de HXZQ a una botella de muestra de 2 mL, luego añade 0,9 mL de agua. Sacude la solución hasta que esté bien mezclada.
2. Prepara una jeringuilla de inyección (1 mL) y un filtro de membrana microporosa (0,22 μm). Filtra la solución en un nuevo frasco de muestra de 2 mL.
   NOTA: Toma las precauciones personales adecuadas durante los procedimientos experimentales.

2. Preparación de cromatografía líquida de ultra-rendimiento (UPLC)

1. Haz doble c....

Results

Sugerimos que toda la información m/z debía ser recopilada primero, y luego se calculaba el valor de la diferencia de masa entre el ion padre y el ion fragmento. Encontré el compuesto que se reportó en la base de datos o la literatura, y luego deduje la estructura del compuesto desconocido de forma inversa basándose en esa estructura conocida.

Todos los compuestos detectados y sus iones fragmentos correspondientes se presentaban mediante valores m/z. Un subcon.......

Discussion

La combinación de LIT-MS y su tecnología^{de fragmentación} MS n proporciona un método para identificar compuestos desconocidos en los CHC. A diferencia de los modos MS en tándem tradicionales en Orbitrap y Q-TOF MS, la trampa iónica lineal puede capturar específicamente iones objetivo, evitando eficazmente la interferencia de iones coeluentes²³. Este método alcanza una precisión a nivel molecular, proporcionando información estructural química relativamen.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrilo	Termo Científica	CAS 75-05-8	Estado líquido
Ácido fórmico	Termo Científica	CAS 64-18-6	Estado líquido
Líquido Oral Huoxiang Zhengqi	Chongqing Taiji Industry (Group) Co., Ltd.	Código Estatal de Normas de Medicamentos Z50020409	Objeto de estudio
Espectrómetro de masas lineal de trampa iónica	Termo Científica	LTQ XL	Instrumento IT-MS
Cromatógrafo líquido	Termo Científica	U3000	Instrumento UPLC
Xcalibur	Termo Científica	Versión 2.0	Software operativo UPLC-IT-MS