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Artículo de investigación

Mecanismo y validación experimental de flavonoides totales de Rhizoma Drynariae en el tratamiento de la artritis gotosa

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DOI:

10.3791/70849

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5 de junio de 2026

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1School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, 2Quality department, Beijing Tongrentang Kangyang Industry Development Co., Ltd, 3Engineering Research Center of Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs, Ministry of Education

En este artículo

Resumen

Los flavonoides totales del rizoma Drynariae (TFRD) alivian la artritis gotosa (AG) suprimiendo la infiltración de células inflamatorias y reduciendo los niveles de TNF-α, IL-6 e IL-17A, principalmente mediante la inhibición de las vías de señalización de AKT, MACK y NF-κB, destacando su potencial terapéutico antiinflamatorio e inmunomodulador.

Resumen

La artritis gotosa (AG) es una enfermedad inflamatoria de las articulaciones causada por la deposición de cristales de urato monosódico (MSU) en la zona articular y los tejidos circundantes. En la medicina tradicional china, el rizoma Drynariae (Gusuibu) se ha utilizado durante mucho tiempo ampliamente en el tratamiento clínico de la AG, y los flavonoides se consideran sus principales componentes bioactivos. Esta investigación empleó la farmacología de redes para construir una red componente-objetivo de flavonoides totales de Rhizoma Drynariae (TFRD) contra la GA, identificando así componentes clave, objetivos principales y vías relacionadas. Los modelos de rata se establecieron mediante la inyección intraarticular de una suspensión de cristal de urato monosódico y tratados con TFRD o el control positivo, colchicina, mediante gavage oral. Tras la recogida de muestras, los resultados de predicción basados en farmacología en red se validaron mediante metabolómica sérica de rata, ensayo inmunoenzimático ligado (ELISA) y análisis por Western blot. El análisis de farmacología de redes indicó que los efectos anti-GA de TFRD están mediados por objetivos clave, incluyendo IL6, AKT1, TNF, EGFR, JUN y PTGS2, y están principalmente asociados a vías relacionadas con inflamación, inmunolesiones y apoptosis, como las vías de señalización IL-17, TNF, NF-κB, MAPK, PI3K-AKT, JAK-STAT y las vías de señalización de los receptores de células T. De manera similar, la metabolómica también descubrió los roles fundamentales de la respuesta inflamatoria. La tinción de hematoxilina y eosina (H&E) confirmó que la TFRD redujo la infiltración de células inflamatorias. El ensayo ELISA confirmó que el grupo TFRD inhibía significativamente la expresión de factores inflamatorios TNF-α, IL-6 e IL-17A en el tejido sinovial. El análisis de Western blot reveló que TFRD inhibía la hiperfosforilación inducida por GA de AKT, MAPK p38 y NF-κB p65 en tejido sinovial de rata. La TFRD puede mitigar eficazmente los cambios provocados por la inflamación en las ratas de AG modulando directamente los factores inflamatorios y las vías inflamatorias relacionadas.

Introducción

La artritis gotosa (AG) es una enfermedad inflamatoria de las articulaciones desencadenada por la deposición de cristales de urato monosódico (MSU) dentro y alrededor de las articulaciones, que estimulan la zonaarticular 1,2. La patogénesis de la AG implica una compleja interacción de predisposición genética, influencias ambientales y desregulación metabólica, caracterizada principalmente por hiperuricemia resultante de una producción excesiva de ácido úrico o de una excreción renalinsuficiente 3,4. Esto conduce a la acumulación sistémica de cristales de urato en los tejidos renales y los espacios articulares, donde activan el sistema inmunitario innato y provocan intensas cascadasinflamatorias 5,6. En los últimos años, una serie de estudios han demostrado que la prevalencia global de la AG ha aumentado paralelamente a la creciente incidencia de obesidad y síndrome metabólico, lo que conduce a un deterioro funcional e impone una carga socioeconómica considerable para losafectados 7. La estrategia de tratamiento para la artritis gotosa se centra en controlar la artritis articular aguda y controlar los niveles de ácido úrico a largoplazo 8,9. No obstante, la utilidad de las farmacoterapias existentes suele estar limitada por sus perfiles de efectos adversos y contraindicaciones específicas. Por ejemplo, los antiinflamatorios no esteroideos generalmente se evitan en pacientes con enfermedad renal crónica debido al riesgo asociado de provocar o agravar la insuficiencia renalaguda 10,11. Del mismo modo, el agente bajista de urato alopurinol conlleva un riesgo bien documentado de reacciones adversas cutáneas graves como el síndrome de Stevens–Johnson, mientras que la benzbromarona puede inducir una hepatotoxicidadsignificativa 11,12,13,14,15. Por lo tanto, sigue existiendo una necesidad urgente de desarrollar terapias más seguras, de aplicación más amplia y dirigidas mecánicamente para el manejo eficaz de la AG.

En la medicina tradicional china (MTC), la AG se enmarca en categorías diagnósticas como "Enfermedad de Lijie" (dolor articular), "Gout bi" (impedimento de la gota) y "Yu Zhuo bi" (impedimento de la estasis-turbidez). Las intervenciones de MTC para la AG ofrecen efectos sinérgicos mediante acciones antiinflamatorias y analgésicas, la modulación del metabolismo del ácido úrico, la mejora de la microcirculación y la preservación de la función articular, convirtiéndola en un área destacada de investigacióncontemporánea 16,17,18,19. Rhizoma Drynariae (Gusuibu), derivado del rizoma seco de Drynaria fortunei (Kunze) J.Sm., un helecho perenne de la familia Polypodiaceae, se utiliza comúnmente en la práctica clínica para tratar la AG. Los compuestos bioactivos de Rhizoma Drynariae contienen principalmente flavonoides, fenilpropanoides, triterpenoides, ácidos fenólicos y susglucósidos 20,21. Entre ellos, los flavonoides representan la clase de compuestos más estudiada en los últimosaños 22,23,24. Estudios previos han demostrado que los flavonoides poseen propiedades antiinflamatorias y antioxidantesnotables 25.

Investigaciones preliminares han encontrado que los flavonoides totales del rizoma drynariae (TFRD) pueden suprimir eficazmente las respuestas inflamatorias en la osteoartritis, artritis reumatoide y otras afecciones inflamatoriasarticulares 26,27,28. Sin embargo, los mecanismos subyacentes de la TFRD frente a la AG aún no han sido investigados a fondo. Por ello, este estudio pretende emplear un enfoque integrado que combine farmacología de redes, metabolómica y experimentos de biología molecular para explorar y validar los mecanismos específicos y la eficacia terapéutica de la TFRD en el tratamiento de la AG. Se espera que una investigación sistemática de los mecanismos multicomponente, multiobjetivo y multivía subyacentes al tratamiento de TFRD contra la AG avance en el descubrimiento de fármacos y proporcione opciones innovadoras y soluciones prácticas para el manejo clínico de la AG.

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Protocolo

Este estudio fue revisado y aprobado por el Comité de Ética Animal del Hospital de la Amistad China-Japón (Aprobación: zryhyy21-22-08-10) y se llevó a cabo siguiendo las directrices institucionales para el cuidado ético y el uso de animales de laboratorio.

Predicción y cribado de objetivos relacionados con TFRD y asociados a GA
Los componentes químicos de Rhizoma Drynariae fueron obtenidos de la Plataforma de Datos y Análisis de Sistemas de Farmacología de Medicina Tradicional China (TCMSP) utilizando "Rhizoma Drynariae" como términode búsqueda 29. El cribado para posibles componentes bioactivos se realizó en función de los criterios de biodisponibilidad oral (OB) ≥ 30% y semejanza del fármaco (DL) ≥ 0,18, 30,31,32. Del conjunto resultante de compuestos, los componentes flavonoides fueron identificados y seleccionados posteriormente según sus estructuras químicas. Estos componentes flavonoides, en adelante denominados flavonoides totales de Rhizoma Drynariae (TFRD), fueron incorporados en el análisis aguas abajo. Al recuperar los genes objetivo asociados con TFRD de la base de datos TCMSP, sus símbolos génicos estandarizados correspondientes fueron anotados usando la base de datosUniProt 33. Usando "gota" como término de búsqueda, se recuperaron objetivos relacionados con enfermedades de la base de datos GeneCards para establecer un conjunto de genes candidatos34.

Establecimiento de la red de compuestos de objetivos
Se identificó y definió la intersección entre los objetivos asociados a TFRD y los objetivos relacionados con la AG como los principales objetivos terapéuticos que mediaban los efectos anti-AG de la TFRD, y el conjunto superpuesto se visualizó mediante un diagrama de Venn. Además, se construyó y analizó una red regulatoria de "TFRD - objetivos - GA" utilizando el softwareCytoscape 35.

Red de interacción proteína-proteína
Los principales objetivos terapéuticos de TFRD contra la AG se importaron a una base de datos en línea para generar una red de interacción proteína-proteína (PPI), con la puntuación mínima requerida de interacción establecida en "alta confianza (0,700)"36. La red PPI se optimizó usando el software Cytoscape, y se seleccionaron los 30 principales objetivos centrales clasificados por centralidad de grados para generar un gráfico debarras 37,38.

Análisis de enriquecimiento de vías KEGG
El análisis de enriquecimiento de vías KEGG se realizó sobre estos objetivos principales utilizando el software R y la base de datosBioconductor 38,39. Se consideraron estadísticamente significativas las vías con un valor p < 0,05. Tras excluir las vías relacionadas con enfermedades y metabolismo, se visualizó una red de interacción vía-objetivo en Cytoscape. Entre estas vías, las 20 mejores vías clasificadas por valor P ascendente se presentaron en un gráfico de barras.

Preparación de fármacos
Para la preparación de una suspensión cristalina de urato monosódico (MSU), se pesaron 500 mg de cristales MSU usando una balanza analítica, se dispersaron en 10 mL de solución salina normal y 2 mL de Tween 80, y se calentaron mientras se removía magnéticamente. La mezcla se ajustó luego a un volumen final de 20 mL con solución salina normal para obtener una suspensión de 25 mg/mL. Tras el autoclav, la suspensión se almacenaba a 4 °C hasta su uso. La dosis clínica habitual para TFRD es de 750 mg al día en un adulto de 70 kg, correspondiente a una dosis de rata de 67,5 mg/kg de peso corporal diario. TFRD se disolvía en agua destilada hasta una concentración de 6,75 mg/mL y se almacenaba a 4 °C para su uso posterior. Según el método de normalización del área de superficie corporal, la dosis oral equivalente de colchicina (el fármaco positivo) en ratas convertidas a partir de la dosis clínica humana (0,6 mg/60 kg) es de 0,062 mg/kg. Se preparó una solución de colchicina en agua destilada a una concentración de 0,0062 mg/mL y se almacenó a 4 °C para su uso posterior.

Animales
En este estudio se utilizaron un total de 36 ratas machos Sprague–Dawley (SD) de seis semanas (220 ± 10 g) (licencia animal nº SCXK [Jing] 2025-0008). Los animales se alojaban en el Centro de Animales de Laboratorio del Hospital de la Amistad China-Japón bajo condiciones dietéticas estándar, con una temperatura de 22–24 °C y una humedad del 50–70%.

Establecimiento e intervención del modelo
Tras una semana de aclimatación, las ratas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos (n = 9 cada uno): control, modelo, TFRD y fármaco positivo. La aleatorización se realizó utilizando una tabla de números aleatorios. La recogida y análisis de datos se realizaron en condiciones de cegamiento. Todos los tratamientos se administraban una vez al día mediante gavage oral. Todas las intervenciones se administraron una vez al día por gavage oral a las 08:00 durante siete días consecutivos. Los grupos de control y modelo en blanco recibieron solución fisiológica normal (10 mL/kg), mientras que a los grupos de TFRD y positivo se les administraron sus respectivas suspensiones en un volumen equivalente (10 mL/kg). En el cuarto día de las intervenciones, el grupo control en blanco recibió una inyección intraarticular de solución fisiológica normal estéril, mientras que las ratas del modelo, TFRD y los grupos positivos de fármacos fueron inyectados con una suspensión de cristal MSU para inducir artritis gotosa aguda. Antes de la inyección, las ratas fueron anestesiadas mediante un sistema de anestesia con isoflurano. Cada rata del modelo, TFRD y los grupos de fármacos positivos recibieron 200 μL de la suspensión MSU en la cavidad de la articulación del tobillo izquierdo. Tras la extracción de la aguja, se aplicó una presión suave en el lugar de la inyección con un hisopo de algodón estéril durante varios segundos para evitar fugas.

Recogida y procesamiento de muestras
72 horas después de la inducción modelo, las ratas fueron anestesiadas y colocadas en posición supina. Tras la desinfección abdominal, se abrió la cavidad peritoneal y se retrajeron suavemente los intestinos para exponer la aorta abdominal. Se insertaba una aguja de extracción de sangre paralela al vaso para extraer sangre de la aorta abdominal, que se transfería inmediatamente a tubos heparinizados preenfriados en un baño de agua con hielo. Las muestras se centrifugaron a 3000 × g durante 10 minutos a 4 °C para obtener suero, que se alicitó y almacenó a -80 °C para un posterior perfilado metabolómico. Después, los animales fueron eutanasiados mediante asfixia con CO₂. Se afeitó el pelaje alrededor de la articulación del tobillo izquierdo y se retiró cuidadosamente la piel y los músculos circundantes para exponer la estructura articular intacta. El tejido sinovial, que aparece como una membrana blanquecina fina que recubre la cápsula articular, fue aislado suavemente de la fascia adyacente mediante pinzas finas. Las muestras de la junta recogidas se fijaron en paraformaldehído al 4% a 4 °C durante 72 horas. Luego, parte del tejido articular se descalcificó en solución de descalcificación con EDTA, y la solución se refrescó semanalmente durante 8 semanas. La descalcificación completa se confirmó mediante pruebas de punción con aguja: si se encontraba resistencia, la descalcificación se continuaba hasta que el tejido fuera completamente penetrable.

Tras la descalcificación, las articulaciones del tobillo se seccionaron sagitalmente, se colocaron en casetes de procesamiento y se sometieron a deshidratación por etanol por gradiente. Los tejidos se limpiaron en xileno, se infiltraron con parafina e incrustaron bloques de parafina. Las secciones de 6 μm de grosor se cortaban usando un microtomo automatizado, flotaban en un baño de agua a 40 °C y se montaban sobre portaobjetos adhesivos. Tras secar a 60 °C durante 30 minutos, se desparafinizaron secciones, se teñieron con hematoxilina y eosina (H&E) según los protocolos estándar, y finalmente se cubrieron con bálsamo neutro. Se obtuvieron imágenes completas de diapositivas utilizando un escáner digital de diapositivas.

Análisis metabolómico sérico
Las muestras de suero del modelo y de los grupos TFRD se descongelaron a 4 °C antes del procesamiento. Para cada muestra, se transfirieron 100 μL de suero a un tubo microcentrífuga y se combinaron con 400 μL de disolvente de extracción preenfriado (metanol: acetonitrilo, 1:1, v/v) que contenía estándares internos. La mezcla se vórtice durante 1 minuto, seguida de la sonicación en un baño de agua con hielo durante 10 minutos. Luego se incubó a -40 °C durante 1 hora para facilitar la precipitación de proteínas y posteriormente se centrifugó a 12.000 × g durante 15 minutos a 4 °C. El sobrenadante obtenido tras la centrifugación fue cuidadosamente recogido y transferido a viales de automuestreador para el análisis UHPLC–MS. Además, se agruparon volúmenes iguales de sobrenadante de cada muestra dentro del mismo grupo para generar muestras de control de calidad (QC).

Tras la detección de metabolitos en muestras de suero de ambos grupos, los datos brutos de espectrometría de masas fueron procesados por software dedicado para la detección automatizada de picos, extracción, alineación e integración, produciendo una matriz de datos estructurada de características espectrales iónicas. Las características espectrales detectadas se compararon con bibliotecas espectrales metabolómicas establecidas para identificar metabolitos derivados de TFRD que habían entrado en circulación sistémica. Las características no identificadas y aquellas que contenían valores excesivos faltantes fueron eliminadas del conjunto de datos. El conjunto de datos seleccionado fue reindexado y estructurado en un formatoestandarizado 40.

La expresión diferencial de metabolitos entre ambos grupos se evaluó calculando tanto el cambio de pliegue (FC, expresado como la razón intergrupal) como la significación estadística (valor p). Metabolitos que cumplen el umbral de |log₂FC| ≥ 1 y P < 0,05 se definieron como metabolitos (DEMs) expresados diferencialmente. Los resultados del cribado se resumieron visualmente utilizando métodos como los gráficos volcánicos. Los metabolitos diferenciales filtrados fueron posteriormente importados a la base de datos PubChem para obtener sus identificadores canónicos (CIDs)41. Los identificadores KEGG correspondientes se obtuvieron entonces en función de los CID. Finalmente, los IDs KEGG se importaron a una plataforma de análisis metabolómico para realizar análisis de enriquecimiento metabólico de vías e identificar las vías de señalización significativamente asociadas con los DEMs.

ELISA
Las muestras de tejido sinovial se congelaron rápidamente en nitrógeno líquido y se pulverizaron hasta obtener un polvo fino. Aproximadamente 100 mg de la polvo se pesaban con una balanza electrónica de precisión, mezclados con 1 mL de PBS bien frío y homogeneizados sobre hielo usando un homogeneizador de vidrio. El homogenado fue centrifugado a 10.000 × g durante 5 minutos a 4 °C, y el sobrenadante se recogió para su posterior detección de ELISA. Antes del análisis, el kit ELISA se dejó equilibrar a temperatura ambiente durante 30 minutos. Todos los reactivos, incluidos los estándares diluidos en serie, el tampón de lavado, la solución de trabajo con anticuerpos marcada con biotina y la solución conjugada enzimática, se prepararon de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Posteriormente, se añadieron 100 μL de estandartes en diferentes concentraciones y muestras a los pozos designados de la microplaca prerecubierta. La placa se selló e incubó a 37 °C durante 90 minutos. Tras la incubación, se desechaba el contenido y los pozos se lavaban cuatro veces. Después, se añadieron 100 μL de solución activa de anticuerpos biotinilados a cada pozo, seguido de incubación a 37 °C durante 60 minutos y otro paso de lavado. A continuación, se introdujeron 100 μL de solución de trabajo conjugada enzimática, incubando la placa a 37 °C durante 30 minutos, seguida de un lavado adicional. Luego se añadió un sustrato cromogénico y la placa se incubó en la oscuridad a 37 °C durante 10 minutos. La reacción se terminaba añadiendo 100 μL de solución de parada, y la absorbancia se medía a 450 nm usando un lector de microplacas. Se construyó una curva estándar ajustando los valores de densidad óptica (OD) de los estándares con sus concentraciones correspondientes, y se calcularon las concentraciones de la muestra en consecuencia.

Western blot
Los tejidos sinoviales se congelaban rápidamente y se molían mecánicamente hasta obtener un polvo fino. Una porción medida del polvo se lisó en un volumen adecuado de tampón RIPA helado suplementado con inhibidores de proteasa y fosfatasa (1:100, v/v), seguido de incubación sobre hielo durante 30 minutos. Los lisados se centrifugaron luego a 10.000 × g durante 5 minutos a 4 °C, y los sobrenadados se recogieron cuidadosamente. Las concentraciones de proteínas se cuantificaron mediante un ensayo BCA y todas las muestras se ajustaron a concentraciones iguales con el tampón RIPA. Las proteínas se separaron mediante SDS-PAGE y se transfirieron a las membranas de PVDF. Las membranas se bloquearon y luego se incubaron con anticuerpos primarios (dilución 1:1000), seguidos de anticuerpos secundarios (dilución 1:5000). Las señales proteicas se visualizaron mediante un sistema de detección ECL, y las intensidades de las bandas se cuantificaron usando el software Image Lab (Versión 5.2.1). Los niveles relativos de expresión se normalizaron frente a la β-actina.

Análisis estadístico
Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SPSS (versión 20.0). Los datos se presentan como media ± desviación estándar (DS). Para comparaciones entre varios grupos, se utilizó análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) cuando se cumplía la suposición de homogeneidad de la varianza, seguido por la prueba LSD para comparaciones pares post hoc. Si no se cumplía la homogeneidad de la varianza, se realizaba la ANOVA de Welch, seguida de la prueba T3 de Dunnett para comparaciones múltiples. Se consideró estadísticamente significativo un valor p < 0,05.

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Resultados

Componentes clave de TFRD
Se recuperaron los posibles ingredientes bioactivos de Rhizoma Drynariae de la base de datos TCMSP, dando lugar a 71 candidatos. Estos 71 componentes activos fueron sometidos a un proceso de cribado basado en la biodisponibilidad oral (OB ≥ 30%) y la semejanza del fármaco (DL ≥ 0,18), que resultó en la identificación de 18 compuestos. Un refinamiento adicional de esta lista reveló que 10 de estos compuestos activos eran flavonoides, ...

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Discusión

La AG es una forma común de artritis inflamatoria. Actualmente, el manejo clínico se basa principalmente en antiinflamatorios no esteroideos (AINEs), corticosteroides y agentes que reducen elurato 42. Sin embargo, la administración combinada de estos fármacos inflige una serie de efectos adversos en los pacientes y supone una carga metabólica significativa sobre el hígado y losriñones 43. Esto es especialmente perjudicial para pacientes con...

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Divulgaciones

Los autores informan que no existen conflictos de interés en este trabajo.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
4% de paraformaldehídoSolarbioP1110
Amortiguador de carga de proteínas 5XSolarbioP1040
Anticuerpo AKTTecnología de señalización celular4691S
Solución diluyente de anticuerposBeyotime BiotecnologíaP0268
Base de datos de bioconductores  https://www.bioconductor.org/
ColchicinaShanghai Yuanye Co., Ltd
Base de datos GeneCards https://www.genecards.org/
Hematoxilina y eosina (H&; E) Kit de tinteSolarbioG1120
Plataforma online MetaboAnalyst 6.0  https://www.metaboanalyst.ca/
Kit ELISA IL-17A para ratón4a Biotech Co LtdCME0041
Kit ELISA IL-6 para ratón4a Biotech Co LtdCME0006
Ratón TNF-& alfa; ELISA Kit4a Biotech Co LtdCME0004
NF-κ Anticuerpo B p65Tecnología de señalización celular8242T
Leche seca desnatadaSolarbioD8340
Anticuerpo p38 MAPKAbclonalA14401
Cóctel inhibidor de fosfatasasBeyotime BiotecnologíaP1081
Anticuerpo fosfo-AKT (Ser473)Tecnología de señalización celular4060S
Fosfo-NF-y kappa; Anticuerpo B p65Tecnología de señalización celular3031S
Anticuerpo Fosfo-p38 MAPKAbclonalAP0526
Fenilmetilsulfonilfluoruro (PMSF)SolarbioR0010
Membrana de fluoruro de polivinilideno (PVDF)MilliporeIPVH00010
PubChem databashttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
R software www.r project.org/
Búfer de Lisis RIPASolarbioR0010
Agua libre de RNasaAmbiónAM9937
Ratas SDBeijing Vital River Laboratorio Animal Technology Co., Ltd. & nbsp;
Buffer de electroforesis SDS-PAGEServicebioG2144
Base de datos STRINGhttps://string-db.org/
Buffer TBST (10X)SolarbioT1085
TCMSPhttps://old.tcmsp-e.com
Tampón de transferencia de tris-glicinaServicebioG2017
TFRDBeijing Qihuang Pharmaceutical Co., Ltd.
UniProt database https://www.uniprot.org/
Anticuerpo β-ActinZhongshan Jingqiao BiotecnologíaTA-09

Referencias

  1. Keller, S. F., Mandell, B. F. Management and cure of gouty arthritis. Rheum Dis Clin North Am. 48 (2), 479-492 (2022).
  2. Ma, C., et al. Metabolic reprogramming of macrophages by biomimetic melatonin-loaded liposomes effectively attenuates acute gouty arthritis in a mouse model. Adv Sci (Weinh). , e2410107 (2024).
  3. Li, C., et al. Targeting neutrophil extracellular traps in gouty arthritis: insights into pathogenesis and therapeutic potential. J Inflamm Res. 17, 1735-1763 (2024).
  4. Zhang, Y., Chen, S., Yuan, M., Xu, Y., Xu, H. Gout and diet: a comprehensive review of mechanisms and management. Nutrients. 14 (17), 3525 (2022).
  5. Wang, R., et al. Sulforaphane-driven reprogramming of gut microbiome and metabolome ameliorates the progression of hyperuricemia. J Adv Res. 52, 19-28 (2023).
  6. Zhang, S., et al. Mechanism of reactive oxygen species-guided immune responses in gouty arthritis and potential therapeutic targets. Biomolecules. 14 (8), 978 (2024).
  7. GBD 2021 Gout Collaborators. Global, regional, and national burden of gout, 1990-2020, and projections to 2050: a systematic analysis of the Global Burden of Disease Study 2021. Lancet Rheumatol. 6 (8), e507-e517 (2024).
  8. Towiwat, P., Li, Z. Long-term remission in gout: challenges and future opportunities. Rheumatol Autoimmun. 6, 7-15 (2026).
  9. Chen, S., Li, Z., Deng, X., Gao, L. Advances in understanding the mechanisms of treatment for gouty arthritis: a comprehensive review. Physiol Res. 74 (5), 693-710 (2025).
  10. LaForge, J. M., et al. Non-steroidal anti-inflammatory drugs: clinical implications, renal impairment risks, and AKI. Adv Ther. 40 (5), 2082-2096 (2023).
  11. Klomjit, N., Ungprasert, P. Acute kidney injury associated with non-steroidal anti-inflammatory drugs. Eur J Intern Med. 101, 21-28 (2022).
  12. Anis, T. R., Meher, J. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome (SJS). Clin Pharmacol. 15, 99-105 (2023).
  13. Hasegawa, A., Abe, R. Stevens-Johnson syndrome and toxic epidermal necrolysis: updates in pathophysiology and management. Chin Med J (Engl). 137 (19), 2294-2307 (2024).
  14. Gupta, S. S., Sabharwal, N., Patti, R., Kupfer, Y. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome. Am J Med Sci. 357 (4), 348-351 (2019).
  15. Sun, W., et al. Risk of hepatotoxicity in patients with gout treated with febuxostat or benzbromarone: a propensity score-matched cohort study. Arthritis Care Res (Hoboken). 77 (9), 1149-1156 (2025).
  16. Guo, J. W., et al. Therapeutic potential and pharmacological mechanisms of traditional Chinese medicine in gout treatment. Acta Pharmacol Sin. 46 (5), 1156-1176 (2025).
  17. Jiang, Z., et al. The correlation between traditional Chinese medicine constitution and hyperuricemia and gout: a systematic review and meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med. 2023, 5097490 (2023).
  18. Wang, S., et al. Traditional herbal medicine: therapeutic potential in acute gouty arthritis. J Ethnopharmacol. 330, 118182 (2024).
  19. Wang, Y. B., Jin, C. Z. Roles of traditional Chinese medicine extracts in hyperuricemia and gout treatment: mechanisms and clinical applications. World J Gastroenterol. 30 (47), 5076-5080 (2024).
  20. Jingying, G., et al. A comprehensive review of Drynariae Rhizoma: botany, traditional applications, and active flavonoid components. J Pharm Pharmacol. 77 (10), 1319-1337 (2025).
  21. Chen, G. Y., et al. Prediction of Rhizoma Drynariae targets in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology and experimental verification. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5233462 (2021).
  22. Zhang, Y., et al. Total flavonoids from Rhizoma Drynariae (Gusuibu) for treating osteoporotic fractures: implication in clinical practice. Drug Des Devel Ther. 11, 1881-1890 (2017).
  23. Yu, X. B., et al. Chondroprotective effects of Gubitong Recipe via inhibiting excessive mitophagy of chondrocytes. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 8922021 (2022).
  24. Zhang, F., et al. Total flavonoids of Drynariae Rhizoma improve glucocorticoid-induced osteoporosis of rats: UHPLC-MS-based qualitative analysis, network pharmacology strategy and pharmacodynamic validation. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 920931 (2022).
  25. Liu, F., et al. Mechanism of flavonoids in the treatment of gouty arthritis (review). Mol Med Rep. 30 (2), 132 (2024).
  26. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology analysis and experimental validation to investigate the mechanism of total flavonoids of Rhizoma Drynariae in treating rheumatoid arthritis. Drug Des Devel Ther. 16, 1743-1766 (2022).
  27. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae restore the MMP/TIMP balance in models of osteoarthritis by inhibiting the activation of the NF-λB and PI3K/AKT pathways. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6634837 (2021).
  28. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae treat osteoarthritis by inhibiting arachidonic acid metabolites through AMPK/NFλB pathway. J Inflamm Res. 16, 4123-4140 (2023).
  29. Ru, J., et al. TCMSP: a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminform. 6, 13 (2014).
  30. Chen, G. Y., et al. Mechanisms of total glucosides of paeony in alleviating methotrexate-induced liver injury. Drug Des Devel Ther. 19, 3407-3423 (2025).
  31. Zhang, P., et al. Network pharmacology: towards the artificial intelligence-based precision traditional Chinese medicine. Brief Bioinform. 25 (1), bbad518 (2023).
  32. Luo, W., et al. Integration of molecular docking, molecular dynamics, and network pharmacology to explore the multi-target pharmacology of fenugreek against diabetes. J Cell Mol Med. 27 (14), 1959-1974 (2023).
  33. UniProt Consortium. UniProt: the universal protein knowledgebase in 2023. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D523-D531 (2023).
  34. Stelzer, G., et al. The GeneCards suite: from gene data mining to disease genome sequence analyses. Curr Protoc Bioinformatics. 54, 1.30.1-1.30.33 (2016).
  35. Chen, G. Y., et al. Integrating network pharmacology and experimental validation to explore the key mechanism of Gubitong Recipe in the treatment of osteoarthritis. Comput Math Methods Med. 2022, 7858925 (2022).
  36. Szklarczyk, D., et al. The STRING database in 2023: protein-protein association networks and functional enrichment analyses for any sequenced genome of interest. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D638-D646 (2023).
  37. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1826299 (2022).
  38. Robinson, M. D., McCarthy, D. J., Smyth, G. K. edgeR: a Bioconductor package for differential expression analysis of digital gene expression data. Bioinformatics. 26 (1), 139-140 (2010).
  39. Jin, Q., et al. Network and experimental pharmacology to decode the action of Wendan Decoction against generalized anxiety disorder. Drug Des Devel Ther. 16, 3297-3314 (2022).
  40. Pang, Z., et al. MetaboAnalyst 6.0: towards a unified platform for metabolomics data processing, analysis, and interpretation. Nucleic Acids Res. 52 (W1), W398-W406 (2024).
  41. Kim, S., et al. PubChem in 2021: new data content and improved web interfaces. Nucleic Acids Res. 49 (D1), D1388-D1395 (2021).
  42. Pillinger, M. H., Mandell, B. F. Therapeutic approaches in the treatment of gout. Semin Arthritis Rheum. 50 (3S), S24-S30 (2020).
  43. Yao, T. K., et al. Advances in gouty arthritis management: integration of established therapies, emerging treatments, and lifestyle interventions. Int J Mol Sci. 25 (19), 10853 (2024).
  44. Li, W., et al. Effects of total flavonoids of Rhizoma Drynariae on biochemical indicators of bone metabolism: a systematic review and meta-analysis. Front Pharmacol. 15, 1443235 (2024).
  45. Mohammed, H. S., et al. Investating the involvement of the NLRP3/ASC/caspase-1 and NF-λB/MAPK pathways in the pathogenesis of gouty arthritis: insights from irradiated and non-irradiated Trifolium alexandrium L. extracts and some metabolites. J Ethnopharmacol. 334, 118566 (2024).
  46. Shi, M. F., et al. Study on the effect and mechanism of Zexie Decoction in treating MSU-induced acute gouty arthritis model through PI3K-AKT-mTOR signaling pathway. Int Immunopharmacol. 150, 114214 (2025).
  47. Cui, L., et al. Selenium suppressed the LPS-induced inflammation of bovine endometrial epithelial cells through NF-λB and MAPK pathways under high cortisol background. J Cell Mol Med. 27 (10), 1373-1383 (2023).
  48. Balakin, E., et al. Regulation of stress-induced immunosuppression in the context of neuroendocrine, cytokine, and cellular processes. Biology (Basel). 14 (1), 76 (2025).
  49. Chen, L., et al. AMPK signaling in osteoarthritis: from mechanisms to targeted therapeutics. Front Pharmacol. 16, 1681610 (2025).
  50. FitzGerald, J. D., et al. 2020 American College of Rheumatology guideline for the management of gout. Arthritis Care Res (Hoboken). 72 (6), 744-760 (2020).
  51. Limbachia, V., et al. The effect of different types of oral or intravenous corticosteroids on capillary blood glucose levels in hospitalized inpatients with and without diabetes. Clin Ther. 46 (2), e59-e63 (2024).
  52. Xue, Y., et al. Association of serum glucocorticoids with various blood pressure indices in patients with dysglycemia and hypertension: the Henan Rural Cohort Study. Biomed Environ Sci. 34 (12), 952-962 (2021).
  53. Uson, J., et al. EULAR recommendations for intra-articular therapies. Ann Rheum Dis. 80 (10), 1299-1305 (2021).
  54. Lucenti, L., et al. Do preoperative corticosteroid injections increase the risk of infection after shoulder arthroscopy or shoulder arthroplasty? A systematic review. Healthcare (Basel). 12 (5), 543 (2024).
  55. Feng, W., Cui, D., Yang, T. Interpretation of key points of Chinese guidelines for diagnosis and management of hyperuricemia and gout (2019). J Clin Intern Med. 37 (07), 528-531 (2020).
  56. Lin, Y., et al. Luteolin-4'-O-glucoside and its aglycone, two major flavones of Gnaphalium affine D. Don, resist hyperuricemia and acute gouty arthritis activity in animal models. Phytomedicine. 41, 54-61 (2018).
  57. Wang, Y., et al. A luteolin-loaded electrospun fibrous implantable device for potential therapy of gout attacks. Macromol Biosci. 16 (11), 1598-1609 (2016).

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